早期妊娠對(duì)牛外周血單核細(xì)胞表達(dá)Th1、Th2免疫因子的影響.pdf

1、外周血單個(gè)核細(xì)胞源于骨髓中的造血干細(xì)胞，主要包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞，經(jīng)血液循環(huán)或淋巴循環(huán)到達(dá)組織或器官，作為一個(gè)整體參與機(jī)體的系統(tǒng)免疫。為探索妊娠早期牛外周血單個(gè)核細(xì)胞表達(dá)Th1型細(xì)胞因子和Th2型細(xì)胞因子的變化規(guī)律，本研究以12頭健康的奶牛為研究對(duì)象，采用密度梯度離心的方法得到牛外周血單個(gè)核細(xì)胞，并運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR、蛋白免疫印跡和細(xì)胞免疫化學(xué)等實(shí)驗(yàn)方法，研究了早期妊娠奶牛在外周血單個(gè)核細(xì)胞表達(dá)Th1和Th2免疫因子的變化。得到

2、了如下結(jié)果：
　　1、利用密度梯度離心的方法，成功從牛外周血中分離得到了單個(gè)核細(xì)胞。從分離的結(jié)果來(lái)看，細(xì)胞分層明顯，由上層到下層依次為血漿，單個(gè)核細(xì)胞，粒細(xì)胞，紅細(xì)胞。牛外周血單個(gè)核細(xì)胞為云霧狀，利用此方法較易獲取。
　　2、利用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，妊娠早期牛外周血單個(gè)核細(xì)胞中的Th1型細(xì)胞因子中的IFN-γ表達(dá)量逐漸降低，但是TNF-α和IL-2的表達(dá)量逐漸升高。然而，在妊娠30d的牛外周血單個(gè)核細(xì)胞中的Th2

3、型細(xì)胞因子，包括IL-4， IL-5，IL-6，IL-10和IL-13表達(dá)量逐漸升高?？傊?，妊娠早期牛外周血單個(gè)核細(xì)胞中Th2細(xì)胞因子表達(dá)量增加，這對(duì)牛妊娠成功是必不可少的。
　　3、采用蛋白免疫印跡檢測(cè)早期妊娠對(duì)牛外周血單個(gè)核細(xì)胞中的IFN-γ蛋白表達(dá)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，未妊娠牛外周血單個(gè)核細(xì)胞中IFN-γ的表達(dá)量高于妊娠期牛外周血單個(gè)核細(xì)胞?？梢园l(fā)現(xiàn)，牛外周血單個(gè)核細(xì)胞IFN-γ表達(dá)量顯著降低對(duì)牛早期妊娠十分關(guān)鍵。
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