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文檔簡介
1、通過觀察哮喘小鼠干細胞因子(stem cell factor,SCF)、巨噬細胞集落刺激因子(macrophagecolony-stimulating factor,M-CSF)及白細胞介素-12(interleukin-12,IL-12)表達的變化以及卡介苗(bacillus calmette-guerin,BCG)干預的影響,了解SCF、M-CSF在哮喘發(fā)病中的作用,探討B(tài)CG抗哮喘氣道炎癥可能的機制。 方法: 健康
2、雄性昆明小鼠30只,隨機分成三組,每組10只。①哮喘組:每只小鼠用10μg卵清蛋白(ovalbumin,OVA)和1mg氫氧化鋁(Al(OH)3)腹腔注射進行致敏,1%OVA霧化吸入激發(fā)建立小鼠哮喘模型。②BCG干預組:OVA致敏、激發(fā)方法同哮喘組,在OVA致敏前7、3、1天每只小鼠皮內(nèi)注射BCG 0.025mg。③對照組:用同等劑量的生理鹽水(NS)代替OVA進行腹腔注射和霧化吸入。所有小鼠于末次霧化吸入24小時后取材,收集支氣管肺泡
3、灌洗液(bronchoal veolar lavage fluid,BALF)進行細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞(eosinpohils,EOS)計數(shù);采用酶聯(lián)免疫吸附(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)方法檢測BALF及骨髓沖洗液中SCF、M-CSF以及BALF中IL-12的水平;肺組織切片行蘇木素-伊紅(HE)染色,觀察病理學改變;采用免疫組織化學圖象分析技術(shù)測定肺組織中SCF、M-CSF蛋白的表
4、達。 結(jié)果: 1.肺組織病理學分析:哮喘組肺組織中可見大量的炎性細胞浸潤,BCG干預組炎性細胞浸潤較哮喘組顯著減輕,對照組未見明顯炎性細胞浸潤。 2.哮喘組、BCG干預組BALF中細胞總數(shù)、EOS計數(shù)均較對照組明顯增高。BCG干預組與哮喘組比較,細胞總數(shù)、EOS計數(shù)有明顯下降。 3.與對照組比較,哮喘組小鼠肺組織及BALF中的SCF表達均增多。BCG干預組與哮喘組比較,肺組織及BALF中的SCF表達均無顯
5、著變化。哮喘組肺組織及BALF中的SCF表達均與BALF中EOS計數(shù)呈正相關。 4.哮喘組小鼠肺組織及BALF中的M-CSF表達較對照組均顯著增高,BCG干預組與哮喘組比較,肺組織及BALF中的M-CSF表達均下降。 5.哮喘組小鼠BALF中IL-12較對照組明顯下降,BCG干預組與哮喘組比較IL-12水平上升。哮喘組BALF中M-CSF與IL-12水平呈負相關,BCG干預組BALF中M-CSF與IL-12水平亦呈負相關
6、。 6.三組小鼠骨髓中均有SCF、M-CSF表達,但三組間差異無統(tǒng)計學意義。 結(jié)論: 1.早期給予BCG干預能夠顯著抑制哮喘小鼠氣道EOS的浸潤,但無法完全消除哮喘小鼠的氣道炎癥。 2.哮喘小鼠SCF、M-CSF表達增多,SCF、M-CSF均參與了哮喘變應性炎癥的形成。 3.BCG通過抑制M-CSF的表達,促使IL-12表達增多,發(fā)揮抗哮喘氣道炎癥的作用。 4.小鼠骨髓中SCF、M-CSF
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