簡(jiǎn)介：目的分析慢性丙型肝炎病毒（HCV）感染者血清中自身抗體陽(yáng)性率及其臨床意義。方法選擇2010年10月2012年10月在新疆醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院門(mén)診及病區(qū)就診的119例慢性HCV感染者為研究組，另選擇40例同時(shí)期在我院進(jìn)行健康體檢并排除病毒感染及自身免疫性疾病的健康體檢者為對(duì)照組，進(jìn)行抗核抗體（ANA）、抗可提取性核抗原（ENA）抗體、類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）檢測(cè)，比較兩組自身抗體的陽(yáng)性率，并探討自身抗體與年齡、性別、民族、肝功能指標(biāo)及病毒復(fù)制的關(guān)系。結(jié)果慢性HCV感染者中有64例檢測(cè)出至少1項(xiàng)自身抗體，陽(yáng)性率538％，健康對(duì)照者中有3例檢測(cè)出至少1項(xiàng)自身抗體，陽(yáng)性率75，兩組檢出率相比差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005）。HCVRNA陽(yáng)性組中自身抗體檢出率為646，HCVRNA陰性組檢出率為407，兩組檢出率相比差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005）。自身抗體檢出率與性別、民族無(wú)關(guān)（P＞005），與年齡有關(guān)（P＜005）。自身抗體陽(yáng)性組ALT、AST、TBIL均高于陰性組，兩組相比差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005）。結(jié)論HCV感染能誘導(dǎo)自身免疫反應(yīng)，使患者出現(xiàn)多種自身抗體，自身抗體的檢出率與年齡關(guān)系密切且與病毒的復(fù)制有關(guān)，自身免疫可能是HCV感染后組織損傷的重要因素。HCV感染者有必要作自身抗體檢測(cè)。

簡(jiǎn)介：目的本研究擬用化學(xué)交聯(lián)方法構(gòu)建一種人人抗體嵌合物作為抗甲型肝炎病毒HEPATITISAVIRUS，HAVIGM抗體檢測(cè)質(zhì)控品，并探討其在臨床應(yīng)用價(jià)值。方法一、嵌合抗體的構(gòu)建通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)篩選出抗HAVIGG陽(yáng)性效價(jià)高的血清抗HIV1、HBSAG陰性，抗HEV、抗HCV、梅毒抗體陰性，再以蛋白A柱純化出含高滴度抗HAVIGG的人總IGG，以分子篩色譜純化出健康人IGM抗體。選擇1乙基33二甲基氨基丙基碳二亞胺作為化學(xué)交聯(lián)劑將兩者交聯(lián)，得到的嵌合人人IGG、IGM抗體既能和甲型肝炎病毒抗原HEPATITISAVIRUSANTIGEN，HAVAG特異性結(jié)合，又能與檢測(cè)體系中的抗Μ鏈抗體特異結(jié)合。根據(jù)嵌合抗體的抗HAVIGM活性來(lái)確定交聯(lián)反應(yīng)的最佳反應(yīng)條件，并對(duì)該嵌合抗體的干擾反應(yīng)、交叉反應(yīng)進(jìn)行研究，同時(shí)以衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心的抗HAVIGM質(zhì)控品作為對(duì)照研究該嵌合抗體的適用性。二、嵌合抗體作為質(zhì)控物穩(wěn)定性及通用性研究對(duì)本嵌合抗體的穩(wěn)定性進(jìn)行研究，對(duì)不同稀釋保存液包括BSA、組氨酸、山梨醇等添加劑組分及濃度進(jìn)行篩選，尋找使嵌合抗體穩(wěn)定保存的條件。穩(wěn)定性的保存條件將上述11000倍稀釋后及未稀釋的嵌合抗體質(zhì)控物置于4℃、20℃、室溫、37℃、及70℃室溫反復(fù)凍融3次的條件下保存不同時(shí)間觀察其穩(wěn)定性。分別采用萬(wàn)泰、新創(chuàng)及雅培商品試劑盒對(duì)本嵌合抗體進(jìn)行檢測(cè)，考察其通用性。結(jié)果一、嵌合抗體的構(gòu)建本研究的最佳交聯(lián)反應(yīng)條件為IGG與IGM質(zhì)量比515MGIGG1MGIGM，每MGIGM反應(yīng)體系中加入10MG交聯(lián)劑，室溫反應(yīng)6～18H。交聯(lián)后得到了穩(wěn)定的嵌合抗體產(chǎn)物，且抗HAVIGM檢測(cè)滴度達(dá)到120000。將該產(chǎn)物11000倍稀釋后，檢測(cè)值仍與衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心發(fā)放的抗HAVIGM質(zhì)控品相當(dāng)，能夠作為抗HAVIGM檢測(cè)的陽(yáng)性質(zhì)控。干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，作為反應(yīng)物的IGG、IGM及交聯(lián)劑不影響嵌合抗體的陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果，且該嵌合抗體在抗HBCIGM、抗HEVIGM檢測(cè)中不存在交叉反應(yīng)。二、嵌合抗體質(zhì)控物穩(wěn)定性研究及通用性研究本嵌合抗體在4℃條件下能穩(wěn)定保存至少3個(gè)月，經(jīng)過(guò)稀釋保存液即含1％BSA、10MMOLL組氨酸的PBS溶液1000倍稀釋后，于4℃及20℃條件下可以穩(wěn)定保存至少4個(gè)月。本嵌合抗體采用以上3個(gè)廠(chǎng)家的商品試劑盒均能檢出陽(yáng)性結(jié)果，具有一定的通用性。結(jié)論通過(guò)化學(xué)交聯(lián)的方法成功構(gòu)建了人人嵌合抗體作為抗HAVIGM檢測(cè)質(zhì)控物。該質(zhì)控品具有良好的穩(wěn)定性和通用性。根據(jù)已經(jīng)建立的方法，可以構(gòu)建一系列用于其他病毒特異IGM抗體酶聯(lián)免疫檢測(cè)的質(zhì)控品。

簡(jiǎn)介：病毒性心肌炎VIRALMYOCARDITIS，VMC是一類(lèi)臨床上常見(jiàn)的心血管系統(tǒng)疾病，主要由柯薩奇病毒B3型CVB3感染造成，目前已成為青少年心源性猝死的主要原因。VMC發(fā)病具有較明顯的性別差異，其中男性好發(fā)、病情嚴(yán)重，目前導(dǎo)致該發(fā)病的性別差異機(jī)制尚不明確。在本研究中，我們首先探討了CVB3感染雌雄小鼠病毒性心肌炎的發(fā)病情況，結(jié)果顯示雄性小鼠心肌組織出現(xiàn)彌漫性炎癥和壞死灶，心肌損傷血清學(xué)指標(biāo)顯著上升，心肌炎發(fā)病率及死亡率均顯著高于雌性，提示雌雄小鼠對(duì)于CVB3誘導(dǎo)的心肌炎呈現(xiàn)不同敏感性。為了探討該心肌炎差異性誘導(dǎo)的機(jī)制，我們分析了CVB3感染小鼠脾臟T細(xì)胞亞群TH1、TH2、TH17、TREG標(biāo)志性細(xì)胞因子IFNΓ、IL4、IL17、FOXP3的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)在雌雄小鼠間IL17的表達(dá)差異最為顯著P＜005。同時(shí)流式結(jié)果顯示，雄性脾臟TH17CD4IL17百分比為234％，顯著高于雌性的092％，上調(diào)約255倍，且該上調(diào)效應(yīng)存在明顯的病毒劑量依賴(lài)性。進(jìn)一步分析脾臟TH17比例改變與病毒性心肌炎疾病進(jìn)程、嚴(yán)重程度間的相關(guān)性后發(fā)現(xiàn)，雄性小鼠脾臟TH17于病毒感染后第5天即出現(xiàn)明顯上調(diào)趨勢(shì)，至感染第7天其比例達(dá)到高峰約25％，顯著高于感染前的05％P＜005。該動(dòng)態(tài)變化曲線(xiàn)與病毒性心肌炎的疾病進(jìn)程高度一致，且與心肌炎嚴(yán)重程度指標(biāo)體重減輕率、心肌病理評(píng)分呈現(xiàn)正相關(guān)，其中與心肌病理評(píng)分的R2值高達(dá)078。上述結(jié)果充分說(shuō)明，對(duì)病毒性心肌炎敏感性不同的雌雄小鼠差異性誘導(dǎo)了TH17細(xì)胞，并且后者在病毒性心肌炎發(fā)病過(guò)程中扮演了重要角色。隨后，我們分析了心肌炎小鼠脾臟局部參與TH17分化發(fā)育的重要細(xì)胞因子如TGFΒ、IL6、IL21、IL22以及轉(zhuǎn)錄因子RΓT和RΑ的表達(dá)情況。結(jié)果顯示正常雌雄小鼠上述分子表達(dá)未見(jiàn)差異，而在CVB3感染7天后，雄性小鼠脾臟IL6、IL21、IL22、RΓT和RΑ等表達(dá)較雌性顯著上調(diào)，提示雄性脾臟免疫微環(huán)境更易誘導(dǎo)TH17細(xì)胞產(chǎn)生。那么，心肌炎中TH17性別差異性誘導(dǎo)分化是否由性激素不同而導(dǎo)致呢我們向感染雄小鼠體內(nèi)注射雌激素，發(fā)現(xiàn)其脾臟TH17比例下調(diào)約33倍，同時(shí)心肌炎癥浸潤(rùn)和壞死明顯減少，生存率大幅上升30％VS80％，提示雌激素可通過(guò)下調(diào)TH17進(jìn)而保護(hù)心肌炎。而當(dāng)向雌小鼠注射雄激素后，并未見(jiàn)到TH17比例的顯著改變，同時(shí)心肌病理改變及生存率也無(wú)明顯變化，提示雄激素可能未參與TH17細(xì)胞的分化發(fā)育。本研究不僅有助于解析病毒性心肌炎發(fā)病的性別差異機(jī)制，了解TH17在病毒性心肌炎發(fā)病中的重要作用并認(rèn)識(shí)其差異性誘導(dǎo)的免疫學(xué)機(jī)制，同時(shí)也為闡明性激素在誘導(dǎo)TH17分化發(fā)育中的差異性作用提供了一定基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

簡(jiǎn)介：8、9歲的小學(xué)兒童，是心理發(fā)展中的一個(gè)重要轉(zhuǎn)折時(shí)期，他們進(jìn)入學(xué)校后，學(xué)習(xí)活動(dòng)就逐漸取代游戲活動(dòng)成為兒童主要的活動(dòng)形式，并對(duì)兒童的心理產(chǎn)生重大的影響。而注意力是他們有效學(xué)習(xí)的重要基礎(chǔ)。兒童注意力的發(fā)展主要與兩個(gè)方面有關(guān)一是兒童本身心理發(fā)展的成熟。二是環(huán)境與教育的作用。隨著社會(huì)的發(fā)展和教育的普及使大眾對(duì)小學(xué)兒童教育越來(lái)越重視，有意識(shí)的對(duì)兒童進(jìn)行注意力提升訓(xùn)練正逐漸成為家長(zhǎng)與老師的關(guān)注重點(diǎn)，有針對(duì)性的注意力提升訓(xùn)練應(yīng)運(yùn)而生，本研究主要從腦電生物反饋訓(xùn)練和認(rèn)知行為團(tuán)體訓(xùn)練兩個(gè)方面出發(fā)，并結(jié)合兩種訓(xùn)練模式對(duì)被試兒童進(jìn)行注意力訓(xùn)練，考察三類(lèi)注意力訓(xùn)練模式的可行性以及有效性。實(shí)驗(yàn)被試為湖南省婁底市40名小學(xué)三年級(jí)兒童，年齡在9歲左右，隨機(jī)分為四組，每組10名。實(shí)驗(yàn)組一進(jìn)行腦電生物反饋訓(xùn)練，實(shí)驗(yàn)組二進(jìn)行認(rèn)知行為團(tuán)體訓(xùn)練，實(shí)驗(yàn)組三進(jìn)行腦電生物反饋和認(rèn)知行為團(tuán)體的綜合訓(xùn)練，對(duì)照組不做訓(xùn)練。訓(xùn)練時(shí)間為8周，每周2次，共16次。結(jié)果如下1、結(jié)果顯示通過(guò)腦電生理測(cè)量?jī)x測(cè)量出來(lái)的注意力指數(shù)與通過(guò)中小學(xué)生注意力測(cè)驗(yàn)量表測(cè)出來(lái)注意力分?jǐn)?shù)之間存在明顯的相關(guān)，表明這兩類(lèi)指標(biāo)的吻合度高，都能有效檢測(cè)被試的注意力水平，因此具有良好的信度和效度。2、腦電生物反饋訓(xùn)練和認(rèn)知行為團(tuán)體訓(xùn)練對(duì)注意力都有提高，但是各自提高的側(cè)重點(diǎn)不同。通過(guò)腦電生物反饋訓(xùn)練，被試兒童大腦的自我調(diào)節(jié)功能得到顯著提高。通過(guò)認(rèn)知行為團(tuán)體訓(xùn)練，兒童注意指標(biāo)顯著提高。對(duì)照組的被試兒童，注意力三項(xiàng)指標(biāo)都沒(méi)有提高。3、綜合訓(xùn)練的效果和單一訓(xùn)練方式差異顯著，綜合訓(xùn)練要優(yōu)于單一訓(xùn)練，說(shuō)明從不同的方面進(jìn)行訓(xùn)練，彌補(bǔ)相互的不足之處，相輔相成，能取得更好的效果。4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，小學(xué)三年級(jí)兒童的注意力是可訓(xùn)練的。兩種訓(xùn)練方式都顯著提高了注意力測(cè)驗(yàn)分?jǐn)?shù)，進(jìn)一步說(shuō)明了注意力和大腦控制能力之間的密切關(guān)系。

簡(jiǎn)介：華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文電視觀看與受眾認(rèn)知培養(yǎng)關(guān)于涵化研究的后設(shè)分析（19962008）姓名周莉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)新聞學(xué)指導(dǎo)教師石長(zhǎng)順20090519II華中科中科技大學(xué)博士學(xué)位論大學(xué)博士學(xué)位論文在涵化關(guān)系的調(diào)節(jié)因素上，傳統(tǒng)的和新加入的控制變量共同影響著當(dāng)代電視涵化關(guān)系；在涵化機(jī)制的控制方式上，當(dāng)代電視涵化的主流化特征在共時(shí)性維度和歷時(shí)性維度上都是存在的，當(dāng)代電視涵化對(duì)受眾認(rèn)知的控制方式就是跨群體、跨時(shí)間的整合受眾認(rèn)知。最后，在后設(shè)分析得出的結(jié)論基礎(chǔ)上，本研究建構(gòu)了當(dāng)代電視涵化模式，并進(jìn)一步挖掘了當(dāng)代電視涵化的意識(shí)形態(tài)內(nèi)涵。本研究的電視涵化模式引入了多種影響因素，呈現(xiàn)了各種因素與電視涵化之間的動(dòng)態(tài)關(guān)系，在因素構(gòu)成和關(guān)系建構(gòu)上都超越了以往的涵化模式。此外，本研究還從權(quán)力宰制、符號(hào)選擇和認(rèn)知整合三個(gè)方面對(duì)當(dāng)代電視涵化的意識(shí)形態(tài)功能進(jìn)行了考察。本研究的不足和下一步研究的計(jì)劃也在結(jié)尾處加以討論。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞電視觀看認(rèn)知培養(yǎng)涵化后設(shè)分析

簡(jiǎn)介：喉癌1ARYNGEALCARCINOMA，LC死亡率以中國(guó)為最高。人乳頭瘤病毒HUMANPAPILLOMAVIMSHPV與喉癌的關(guān)系，一直是病因?qū)W研究的熱點(diǎn)。自首次從喉癌中發(fā)現(xiàn)HPV以來(lái)，人們進(jìn)行了廣泛深入的研究，并取得了一些共識(shí)，但不可否認(rèn)的是陽(yáng)性檢出率相差很大3～100％不等。本課題設(shè)計(jì)了多對(duì)引物進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)POLYMERASECHAINREACTION，PCR，同時(shí)進(jìn)行DNA測(cè)序，并利用原位雜交INSITUHYBRIDIZATION，ISH方法，對(duì)北京地區(qū)的123例喉癌組織進(jìn)行檢測(cè)，從多方面印證HPV的感染率及闡明引起以往文獻(xiàn)報(bào)道陽(yáng)性率差異的原因。研究結(jié)果表明1用PCR檢出HPVL1引物GP5／GP6、一16E6、一16E7、18E6、一18E7、一31E7、33E7、45E7和52E7的陽(yáng)性率分別為7642％、5447％、5854％、4228％、4878％、1057％、813％、732％和1220％。2DNA測(cè)序的結(jié)果為HPV6型、一N型、一26型、一54型、58型、73型和84型的陽(yáng)性率分別為¨38％、1220％、244％、488％、325％、L63％和325％。3ISH檢出HPV16E6的陽(yáng)性率為4634％，HPV18E6的陽(yáng)性率為3577％。HPVL1的高檢出率及HPVE6、E7基因常伴隨檢出且檢出率較高，提示可能在腫瘤細(xì)胞中通用型引物GP5／GP6可作為檢測(cè)HPV的指標(biāo)；HPVE6、E7常在整合中保留。HPV16型可能與喉癌發(fā)生密切相關(guān)。對(duì)“正常人”的喉粘膜上皮進(jìn)行研究，以探討HPV與喉病變過(guò)程的關(guān)系。對(duì)北京地區(qū)123例“正常人的喉粘膜樣品進(jìn)行HPV感染的檢測(cè)。PCR和DNA測(cè)序結(jié)果表明低危型HPV的陽(yáng)性率與喉癌相近；高危型HPV的陽(yáng)性率雖遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于喉癌，但隨著組織病變程度加重從正常喉上皮一輕度不典型增生一重度不典型增生一癌前病變陽(yáng)性率逐漸升高；HPV16E6、E7的檢出率非常接近；HPVU的陽(yáng)性率高于HPV16E6、E7，隨著組織病變程度加重，HPVL1的檢出率逐漸增高。ISH結(jié)果表明HPV一16E6和一18E6的表達(dá)率為1382％和N38％。HPV16E6和18E6的表達(dá)率隨著組織病變的加重顯著升高。此外，HPV18E6的檢出率與E7相同，而且大多數(shù)HPV18陽(yáng)性的標(biāo)本同時(shí)HPV16陽(yáng)性。對(duì)上述結(jié)果用SPSS100軟件進(jìn)行CASECONTR01X2分析，HPV16感染會(huì)增加喉上皮病變的風(fēng)險(xiǎn)508，而同時(shí)感染HPV18時(shí)，喉上皮病變的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)一步增加890。通過(guò)本研究得出的結(jié)論是HPV16感染是北京地區(qū)喉癌的重要發(fā)病因素；HPV一16感染后E6／E7片段的保留并持續(xù)表達(dá)與喉組織的癌變進(jìn)程密切相關(guān)；HPV16感染會(huì)增加喉上皮病變的風(fēng)險(xiǎn)，而HPV18有協(xié)同作用；U片段適合用于檢測(cè)HPV感染。

簡(jiǎn)介：最近幾十年來(lái)由于全球人口數(shù)量和流動(dòng)性持續(xù)增加登革熱在全球的流行范圍不斷擴(kuò)大并已成為目前世界上分布最廣、發(fā)病最多的蟲(chóng)媒病毒病對(duì)人類(lèi)健康造成嚴(yán)重的威脅。由于缺乏疫苗登革熱的防治一直是世界性難題。除了媒介控制外感染者的及時(shí)發(fā)現(xiàn)、隔離以及治療是目前預(yù)防登革熱進(jìn)一步擴(kuò)散的重要手段因此早期診斷對(duì)于登革熱的預(yù)防控制至關(guān)重要。登革熱的早期診斷一直是登革熱防治研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)診斷技術(shù)也在不斷發(fā)展包括病毒核酸檢測(cè)、抗原抗體檢測(cè)在內(nèi)的多種實(shí)驗(yàn)診斷技術(shù)已被應(yīng)用于常規(guī)的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)工作。目前國(guó)外已經(jīng)有多家試劑公司研制成功并推出了包括酶聯(lián)免疫吸附法ELISA、膠體金免疫層析法ICT等在內(nèi)的商品化病毒抗體檢測(cè)試劑盒此類(lèi)試劑盒具有快速、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)為大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室特別是基層實(shí)驗(yàn)室所采用。近年來(lái)國(guó)內(nèi)雖然也有不少研究機(jī)構(gòu)開(kāi)展登革病毒抗體檢測(cè)試劑盒的研制并有相關(guān)研制的報(bào)道但其實(shí)際應(yīng)用一直沒(méi)有取得突破試劑的國(guó)產(chǎn)化一直是國(guó)內(nèi)登革熱防控工作的短板。本課題以登革2型病毒外膜蛋白ENVELOPEE為研究對(duì)象在其編碼基因的DIII區(qū)上下游各設(shè)計(jì)8條引物分別引入NDEI和XHOI兩個(gè)酶切位點(diǎn)交叉配對(duì)共擴(kuò)增出64條DIII區(qū)基因片段利用PET30A表達(dá)系統(tǒng)在大腸桿菌BL21DE3中分別克隆和表達(dá)經(jīng)SDSPAGE和WESTERNBLOT驗(yàn)證其表達(dá)含量及重組蛋白的免疫反應(yīng)性篩選表達(dá)量大且有較強(qiáng)免疫反應(yīng)性的重組蛋白抗原進(jìn)行純化并建立間接ELISA法用以檢測(cè)登革熱IGM抗體為國(guó)產(chǎn)試劑提供候選抗原和方法。為評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)建立的ELISA法檢測(cè)效果我們以PANBIO公司生產(chǎn)的登革熱IGM檢測(cè)試劑盒作為對(duì)照選取112份臨床血清標(biāo)本進(jìn)行了初步的試劑評(píng)估。檢測(cè)結(jié)果表明以IFA檢測(cè)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)本研究ELISA法檢測(cè)IGM的靈敏度為9464％特異度為9107與PANBIO公司生產(chǎn)試劑盒相比本研究建立的ELISA法檢測(cè)登革病毒IGM抗體的檢測(cè)陽(yáng)性符合率為9285陰性符合率為8929總符合率為9107KAPPA值為08214提示兩檢測(cè)方法具有較高的一致性且兩種檢測(cè)方法差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義Χ203P005。提示本研究所建立的方法具有較好的應(yīng)用前景。

簡(jiǎn)介：Y30112單位代碼L壁壘塹學(xué)號(hào)2壁Q塑2I西南蟲(chóng)學(xué)碩士學(xué)位論文35～55歲兒童心理理論與時(shí)序認(rèn)知能力關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究論文作者黃彥萍指導(dǎo)教師李紅學(xué)科專(zhuān)業(yè)發(fā)展與教育心理學(xué)研究方向認(rèn)知發(fā)展提交論文日期’2006年4月論文答辯日期2006年6月學(xué)位授予單位疆南大學(xué)中國(guó)重慶2006年6月序，這實(shí)際上是一種動(dòng)作推理。2、45歲以后兒童的心理理論開(kāi)始發(fā)展起來(lái)，到了55歲兒童的心理理論水平日趨成熟。所不同的是，在本研究中側(cè)重了從時(shí)間因素的角度，考察了心理理論任務(wù)問(wèn)題的不同含義，具體包括了兒童對(duì)自己過(guò)去心理狀態(tài)的認(rèn)識(shí)、兒童對(duì)他人將米心理狀態(tài)的認(rèn)識(shí)、兒童對(duì)他人現(xiàn)在心理狀態(tài)的認(rèn)識(shí)。發(fā)現(xiàn)兒童認(rèn)識(shí)這三者之間的順序?yàn)閷?duì)自己過(guò)去心理狀態(tài)的認(rèn)識(shí)對(duì)他人現(xiàn)在心理狀態(tài)的認(rèn)識(shí)對(duì)他人將來(lái)心理狀態(tài)的認(rèn)識(shí)。3、時(shí)序認(rèn)知能力與兒童對(duì)他人將來(lái)心理狀態(tài)理解能力有顯著相關(guān)，但與兒童對(duì)自己過(guò)去心理狀態(tài)理解能力沒(méi)有顯著性的相關(guān)。這說(shuō)明區(qū)分自己和他人心理狀態(tài)能力的發(fā)展和錯(cuò)誤信念能力的發(fā)展可能是兒童心理理論發(fā)展的前后兩個(gè)階段。4、兒童的心理理論與時(shí)序認(rèn)知有一定的相關(guān)，但是排除年齡的影響，兩者相關(guān)不顯著。在排除了年齡影響后，心理任務(wù)排序和預(yù)測(cè)問(wèn)題之間仍然有顯著的相關(guān)。影響兒童心理理論水平的是兒童對(duì)任務(wù)本身所含時(shí)序的理解程度，應(yīng)該對(duì)時(shí)序進(jìn)行更準(zhǔn)確的定義兒童對(duì)心理理論任務(wù)本身所含時(shí)序的認(rèn)知。5、兒童在知否問(wèn)題上的得分明顯高于他們?cè)陬A(yù)測(cè)問(wèn)題上的得分，兩者差異顯著。知否問(wèn)題任務(wù)本身沒(méi)有包含地點(diǎn)或內(nèi)容的轉(zhuǎn)化，而預(yù)測(cè)任務(wù)涉及到了一個(gè)信息轉(zhuǎn)換的問(wèn)題在3～4歲這個(gè)年齡階段，兒童還不能很好地對(duì)信息進(jìn)行轉(zhuǎn)換。說(shuō)明心理理論任務(wù)本身的時(shí)序問(wèn)題更能影響兒童在心理理論任務(wù)中的表現(xiàn)。關(guān)鍵詞時(shí)序認(rèn)知心理理論兒童

簡(jiǎn)介：目的本文主要研究嬰幼兒人巨細(xì)胞病毒HCMV臨床分離株包膜糖蛋白HGH的基因多態(tài)性分析該基因不同型別在HCMV感染引起的不同疾病中的分布情況及其與不同疾病之間的關(guān)系為進(jìn)一步了解HCMV致病機(jī)理及亞單位疫苗研究提供參考。方法1、HCMV臨床分離株的分離培養(yǎng)取患兒尿液標(biāo)本接種于人胚肺細(xì)胞孵育812小時(shí)后換液連續(xù)培養(yǎng)至細(xì)胞發(fā)生病變CPE再取上清液接種于新鮮人胚肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)至CPE達(dá)80％90病變時(shí)收集和保存。2、GH基因分型應(yīng)用巢式PCR擴(kuò)增HCMV臨床分離株和AD169株GH基因核苷酸純化試劑盒純化PCR產(chǎn)物用限制性?xún)?nèi)切酶HHAI酶切酶切片段經(jīng)12聚丙烯酰胺凝膠電泳銀染顯色比對(duì)分型。3、GH基因序列多態(tài)性分析將部分PCR擴(kuò)增陽(yáng)性的產(chǎn)物純化后測(cè)序與AD169株、TOWNE株序列進(jìn)行比對(duì)用DNASIS軟件分析。結(jié)果1、HCMV臨床分離株的分離培養(yǎng)共選擇105例樣本進(jìn)行分離最終CPE陽(yáng)性病毒株50株分離成功率為476。2、GH基因分型經(jīng)巢式PCR擴(kuò)增50例臨床分離株中有34例14例為嬰兒肝炎綜合征12例為無(wú)黃疸型肝炎5例為肺炎1例為先天性CMV感染GH基因陽(yáng)性陽(yáng)性率為68分型顯示GH1型21株占618GH2型13株占382未見(jiàn)混合型和發(fā)現(xiàn)新的型別GH基因型別在不同疾病間呈散在分布X20336P005。3、GH基因序列多態(tài)性分析隨機(jī)挑選15株GH基因陽(yáng)性標(biāo)本測(cè)序分型并與AD169和TOWNE株序列比對(duì)GH1型有10株GH2型有5株其結(jié)果與酶切分型結(jié)果完全符合。其中所選的第2、4、5、6、7、9、10、11臨床株堿基序列相同編碼的氨基酸也相同同源性為100與AD169株核苷酸相似性、氨基酸一致性分別為972、9552同源性較高第8、12、14臨床株堿基序列、氨基酸相同相互間同源性也高達(dá)100與TOWNE株核苷酸相似性為9953氨基酸一致性為9552。GH序列變異以核苷酸替換為主也可見(jiàn)插入和缺失突變與AD169株相比核苷酸相似性為891～972氨基酸一致性為7424～9552與TOWNE株相比核苷酸相似性為9112～9953氨基酸一致性為8006～985。DNA變異位點(diǎn)分布比較散在氨基酸變異相對(duì)集中與AD169相比氨基酸變異集中在41～87位點(diǎn)與TOWNE株比對(duì)則集中于33～74位點(diǎn)。結(jié)論1、嬰幼兒HCMV臨床分離株GH基因型別以GH1為主GH基因型別在嬰兒肝炎綜合征、無(wú)黃疸型肝炎、肺炎疾病中的分布未見(jiàn)明顯差異。2、不同HCMV臨床分離株GH基因相對(duì)保守但仍存在一定的多態(tài)性。3、未發(fā)現(xiàn)HCMVGH基因多態(tài)性與不同臨床疾病的關(guān)聯(lián)性。

簡(jiǎn)介：背景肝移植術(shù)后膽道并發(fā)癥發(fā)生率高，是影響患者長(zhǎng)期存活及導(dǎo)致移植物丟失的最主要原因之一，因此肝移植后膽道并發(fā)癥的防治是進(jìn)一步提高移植受體存活率和遠(yuǎn)期療效的關(guān)鍵。移植肝膽管缺血再灌注損傷是肝移植術(shù)后膽道并發(fā)癥的重要病因?qū)W因素，肝臟缺血再灌注損傷是早期多種炎性因子激活的結(jié)果。NFΚB作為一種普遍存在的轉(zhuǎn)錄因子在調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的基因中起關(guān)鍵作用。研究肝膽管缺血再灌注損傷過(guò)程中NFΚB的作用，并以其為靶點(diǎn)的干預(yù)措施有可能對(duì)移植肝膽管缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。本研究擬觀察腺相關(guān)病毒攜帶NFΚB超抑制物IΚBΑMRAAVIΚBΑM對(duì)肝移植膽道缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。第一部分大鼠自體原位肝移植膽道缺血再灌注損傷模型的建立及肝臟再灌注損傷中NFΚB激活的研究目的建立穩(wěn)定的大鼠自體原位肝移植膽道缺血再灌注損傷模型，觀察建立模型手術(shù)并發(fā)癥、存活率及肝臟缺血再灌注損傷中NFΚB的激活。方法門(mén)靜脈和腹主動(dòng)脈雙重灌注法建立大鼠自體原位肝移植膽道缺血再灌注損傷模型，將WEISTAR大鼠隨機(jī)分成兩組肝移植膽道缺血再灌注損傷手術(shù)組LTIRIGROUP行大鼠原位肝移植膽道缺血再灌注損傷；假手術(shù)組SHAMGROUP，SHGROUP僅行開(kāi)腹和肝門(mén)區(qū)解剖手術(shù)；分別于術(shù)后12H，24H72H，7D取肝組織行NFΚB免疫組化檢測(cè)，取外周血檢測(cè)肝臟酶學(xué)指標(biāo)。結(jié)果共進(jìn)行大鼠自體原位肝移植膽道缺血再灌注損傷模型80例，其中穩(wěn)定模型60例，穩(wěn)定模型期手術(shù)存活率約90％，一周存活率約為817％。免疫組化顯示術(shù)后2HLTIRI組NFBΚ激活細(xì)胞明顯多于SH組；而其肝功能損傷指標(biāo)外周血ALT在各時(shí)點(diǎn)IXIRI組均較SH組亦明顯增加，兩組比較具有明顯差異，以術(shù)后24H最為顯著4172±453VS576±54。結(jié)論成功建立大鼠自體原位肝移植膽道缺血再灌注損傷模型，無(wú)肝期約14±3MIN。肝移植缺血再灌注過(guò)程中早期即有NFΚB的激活。第二部分IΚBΑM基因重組腺相關(guān)病毒載體的構(gòu)建及鑒定目的構(gòu)建攜帶NFΚB超抑制物IΚBΑM基因的重組腺病毒載體。方法應(yīng)用BAMHI和XHOII內(nèi)切酶雙酶切PAAVMCS質(zhì)粒和PCDNA30IΚBΑM，經(jīng)過(guò)膠回收和純化后，在T4連接酶作用下，構(gòu)建PAAVMCSIΚBΑM，酶切和測(cè)序鑒定，293細(xì)胞病毒包裝，重組腺病毒載體大量擴(kuò)增，病毒滴度的測(cè)定及濃縮純化。結(jié)果經(jīng)雙酶切和連接成重組質(zhì)粒PAAVMCSIΚBΑM，雙酶切PAAVMCSIΚBΑM得到大小分別為64KB和970BP的載體和目的基因片段；經(jīng)PCR鑒定得到大小為970BP的IΚBΑM片段；測(cè)序鑒定正確；經(jīng)測(cè)定分離濃縮和純化重組腺相關(guān)病毒獲得病毒滴度約為7108PFUML～5109PFUML。結(jié)論成功構(gòu)建IΚBΑM基因重組腺相關(guān)病毒載體，病毒濃縮純化滴度滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)要求。第三部分RAAVIΚBΑM對(duì)大鼠自體原位肝移植膽道缺血再灌注損傷的保護(hù)作用目的觀察RAAVIΚBΑM轉(zhuǎn)染肝臟術(shù)后肝內(nèi)NFΚB及其下游炎性分子的表達(dá)，膽管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡和電鏡形態(tài)學(xué)變化情況，探討RAAVIΚBΑM在大鼠肝移植膽道缺血再灌注損傷中的作用。方法將WEISTAR大鼠分為三組假手術(shù)組單純行開(kāi)關(guān)腹手術(shù)，對(duì)照組行肝移植膽道缺血再灌注損傷手術(shù)，RAAVIΚBΑM轉(zhuǎn)染組術(shù)前兩天行RAAVIΚBΑM轉(zhuǎn)染。分別于術(shù)后2H，24H，72H，7D取材。常規(guī)HE染色觀察肝外膽管和肝組織學(xué)變化，用WESTERNBLOT檢測(cè)NFΚBP65的表達(dá)，RTPCR測(cè)定肝組織中TNFΑ、ICAM1MRNA的表達(dá)，免疫組化檢測(cè)TNFΑ、ICAM1的表達(dá)，ELESA檢測(cè)血清TNFΑ的水平，各時(shí)點(diǎn)肝臟酶學(xué)的變化及膽管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡和電鏡形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果RAAVIΚBΑM轉(zhuǎn)染組與對(duì)照組相比NFΚBP65于術(shù)后2H、24H表達(dá)具有顯著性差異，核內(nèi)蛋白水平明顯降低，72H后各時(shí)點(diǎn)NFΚBP65核內(nèi)蛋白差異不明顯；術(shù)后2H、24HTNFΑ及ICAM1MRNA的表達(dá)水平具有顯著性差異；免疫組化示TNFΑ、ICAM1于移植后24H、72H的表達(dá)具有顯著性差異；術(shù)后24H血清TNFΑ具有顯著性差異；肝臟酶學(xué)指標(biāo)ALT、GGT在各時(shí)點(diǎn)具有顯著性差異，尤其在術(shù)后24H，72H最為顯著；術(shù)后2H、24H、72H膽管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡明顯減少；術(shù)后24H電鏡下膽管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷明顯減輕。各移植組與假手術(shù)組差異顯著。結(jié)論IΚBΑM通過(guò)抑制NFΚB核移位抑制其激活及抑制其下游基因的表達(dá)，從而減輕大鼠肝移植膽管缺血再灌注損傷。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多高校學(xué)生對(duì)人體器官捐獻(xiàn)認(rèn)知情況的調(diào)查研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：中圖分類(lèi)號(hào)B849UDC1OO訶{L￡解■刪擘I砷密級(jí)學(xué)校代碼碩士學(xué)位論文學(xué)歷應(yīng)用心理碩士公開(kāi)100948～11歲兒童無(wú)意視盲的認(rèn)知機(jī)制研究THECOGNITIVEMECHANISMOFINATTENTIONALBLINDNESSIN8。TO11一YEAR0LDCHILDREN研究生姓名王佳慧指導(dǎo)教師學(xué)科專(zhuān)業(yè)研究方向論文開(kāi)題日期陳洪震副教授應(yīng)用心理注意與記憶2016年3月10日H事尤乒巳0●摘要無(wú)意視盲是指當(dāng)注意集中于一個(gè)具體的任務(wù)時(shí)，即使某個(gè)刺激十分明顯，人們也往往不能注意到這個(gè)非期望刺激的現(xiàn)象。研究者們對(duì)影響無(wú)意視盲現(xiàn)象產(chǎn)生的因素探討已久，但對(duì)于兒童無(wú)意視盲機(jī)制的研究甚少，且系統(tǒng)性不高。鑒于注意對(duì)兒童和青少年認(rèn)知功能發(fā)展的重要影響，本研究從發(fā)展性的角度探索無(wú)意視盲現(xiàn)象的年齡發(fā)展進(jìn)程，并試圖探討產(chǎn)生這種發(fā)展差異的原因。實(shí)驗(yàn)一使用經(jīng)典靜態(tài)無(wú)意視盲范式，探究無(wú)意視盲現(xiàn)象在年齡發(fā)展上的差異。隨機(jī)選取某小學(xué)8～11歲的兒童120名，采用單因素被試問(wèn)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，結(jié)果顯示，無(wú)意視盲現(xiàn)象的發(fā)生率隨年齡的增加而減少，與年齡較大的兒童相比，8歲到9歲的兒童對(duì)非期望刺激的覺(jué)察率顯著低于10歲和1L歲兒童。實(shí)驗(yàn)二和實(shí)驗(yàn)三在實(shí)驗(yàn)一的基礎(chǔ)上，分別從注意資源有限的兩個(gè)角度來(lái)探索出現(xiàn)此年齡差異的相關(guān)原因。兩個(gè)實(shí)驗(yàn)的被試與實(shí)驗(yàn)一相同，自變量都為年齡和任務(wù)類(lèi)型。研究結(jié)果與以往研究一致，反應(yīng)時(shí)績(jī)效都隨年齡的增長(zhǎng)而增長(zhǎng)，兩種注意行為都顯著增強(qiáng)的關(guān)鍵年齡區(qū)間在9歲到10歲之間。實(shí)驗(yàn)二考察注意資源總量在年齡發(fā)展上的差異，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，任務(wù)類(lèi)型與年齡因素的交互作用不顯著，說(shuō)明注意資源總量的絕對(duì)有限性對(duì)轉(zhuǎn)折點(diǎn)前后兩個(gè)年齡階段的兒童影響一致。實(shí)驗(yàn)三考察抑制控制能力在年齡發(fā)展上的差異。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同的任務(wù)類(lèi)型與年齡因素的交互作用顯著，說(shuō)明10歲和1L歲的兒童與8歲和9歲兒童相比，其抑制控制能力發(fā)展水平有了較明顯的提高。綜上，本研究發(fā)現(xiàn)年齡發(fā)展與無(wú)意視盲的發(fā)上存在密切關(guān)系，8歲和9歲的兒童比10歲和1L歲的兒童更容易發(fā)生無(wú)意視盲現(xiàn)象。而對(duì)于兒童無(wú)意視盲現(xiàn)象產(chǎn)生這種年齡差異的原因，我們認(rèn)為主要是由于兒童抑制控制能力發(fā)生變化。關(guān)鍵詞無(wú)意視盲年齡發(fā)展抑制控制能力注意資源總量

簡(jiǎn)介：本課題組一直致力于研究反式作用HDV核酶對(duì)于乙型肝炎病毒（HEPATITISBVIRUS，HBV）表達(dá)的工作，研究證實(shí)了HDV核酶作為HBV反義抑制劑的可行性，目前所需解決的是如何構(gòu)建高效、安全、且具有靶向性的轉(zhuǎn)移載體攜帶反式HDV核酶進(jìn)入肝細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用，更接近于臨床治療途徑。攜帶外源性治療基因的轉(zhuǎn)運(yùn)載體是基因治療的一個(gè)中心環(huán)節(jié)，決定著外源性治療基因是否能夠成功轉(zhuǎn)運(yùn)至靶細(xì)胞內(nèi)，也影響著外源性治療基因能否在細(xì)胞內(nèi)高效的表達(dá)。腺相關(guān)病毒（ADENOASSOCIATEDVIRUS，AAV）屬于微小病毒科，依賴(lài)病毒屬。AAV是一種可感染人類(lèi)和一些其他靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物的的小病毒。目前AAV不導(dǎo)致任何已知的疾病，因此這種病毒只引起非常輕微的免疫反應(yīng)。AAV即可感染分裂期細(xì)胞也可感染非分裂期細(xì)胞，并可將其基因組整合入宿主細(xì)胞基因組中位于人19號(hào)染色體的特異位點(diǎn)（AAVS1）中。制備AAV基因治療載體是需要剔除AAV基因組中的REP和CAP區(qū)域，并將所需外源基因和能夠啟動(dòng)其轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)子插入到兩端的反向重復(fù)序列（INVERTEDTERMINALREPEATS，ITR）之間，有助于單鏈DNA的載體轉(zhuǎn)染的宿主細(xì)胞的DNA聚合酶作用下形成雙鏈DNA時(shí)在宿主細(xì)胞核內(nèi)形成多聯(lián)體結(jié)構(gòu)。腺相關(guān)病毒為基礎(chǔ)的基因治療載體在宿主細(xì)胞中主要以多聯(lián)體形式存在與宿主細(xì)胞核中。腺相關(guān)病毒還具有非常低的免疫原性，似乎僅限于新一代的中和抗體，但它們誘導(dǎo)沒(méi)有明確界定的細(xì)胞毒性反應(yīng)。這些特點(diǎn)使得AAV成為備受矚目的基因治療潛在病毒載體。HBV侵入肝細(xì)胞的機(jī)制是研究熱點(diǎn)之一。自發(fā)現(xiàn)HBVPRES2多肽與聚合白蛋白的結(jié)合活性只限于人和黑猩猩的聚合白蛋白而證實(shí)肝細(xì)胞存在白蛋白受體以來(lái)，便認(rèn)為HBV系借這種白蛋白受體同肝臟結(jié)合即侵入肝細(xì)胞。這種由HBV被膜抗原蛋白HBVDNAPRES2所編碼的聚合人血清白蛋白的受體（POLYMERIZEDHUMANSERUMALBUMINRECEPT，PHSAR），又稱(chēng)HBV聚合白蛋白受體（HBVPAR）很可能具有HBV種特異性與臟器特異性，因而在HBV侵入肝細(xì)胞機(jī)制中起有基因的表達(dá)；探討重組腺相關(guān)病毒的靶向性改造以及重組后腺相關(guān)病毒的包裝制備方法。研究方法重組有HDV核酶的腺相關(guān)病毒載體的構(gòu)建利用DNA重組技術(shù)將本課題組前期設(shè)計(jì)合成的反式作用HDV片段及其啟動(dòng)子U6一同構(gòu)建入腺相關(guān)病毒載體PSNAV中，并在此載體中摻入EGFP熒光標(biāo)記蛋白基因。2、重組有HDV核酶的腺相關(guān)病毒載體抑制HBV基因表達(dá)用陽(yáng)離子脂質(zhì)體法將帶有綠色熒光蛋白標(biāo)簽的重組HDV核酶的腺相關(guān)病毒載體轉(zhuǎn)染入表達(dá)HBV的肝癌細(xì)胞HEPG2215中，用ELISA方法檢測(cè)其S抗原和E抗原的表達(dá)抑制作用。3、重組有HDV核酶的腺相關(guān)病毒載體系統(tǒng)的構(gòu)建利用DNA重組技術(shù)將反式作用HDV片段及其啟動(dòng)子U6一同構(gòu)建入腺相關(guān)病毒載體PAAVIRESHRGFP中。將肝細(xì)胞靶向性序列PRES2構(gòu)建入表達(dá)AAV殼體蛋白的控制質(zhì)粒PAAVRC中，并將AAV殼體蛋白中的感染相關(guān)R585、R588位點(diǎn)通過(guò)突變的方式封閉。4、重組腺相關(guān)病毒的包裝將構(gòu)建好的帶有HDV核酶的結(jié)構(gòu)質(zhì)粒和靶向性改造后的控制質(zhì)粒及輔助質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T包裝細(xì)胞，反復(fù)凍融方法收獲重組腺相關(guān)病毒顆粒。然后感染肝癌細(xì)胞HEPG2，檢測(cè)包裝效率。研究結(jié)果1、經(jīng)酶切鑒定和PCR鑒定，構(gòu)建了分別含有針對(duì)HBV基因組C區(qū)和PRES2區(qū)的反式作用HDV核酶的重組腺相關(guān)病毒載體PSNAVCMVEGFPCU6和PSNAVCMVEGFPPRES2U6。2、利用陽(yáng)離子脂質(zhì)體法將PSNAVCMVEGFPCU6和PSNAVCMVEGFPPRES2U6質(zhì)粒轉(zhuǎn)染表達(dá)HBV的HEPG2215細(xì)胞，并用ELISA方法檢測(cè)到其對(duì)HBV表達(dá)的抑制作用。PSNAVCMVEGFPPRES2U6對(duì)HBEAG和HBSAG的抑制率約為2953％和25％，PSNAVCMVEGFPCU6對(duì)HBEAG和HBSAG的抑制效果約為635％和5007％，3、經(jīng)酶切鑒定和PCR鑒定，構(gòu)建了重組入反式作用HDV核酶的PAAVIRESHRGFPU6CRZ和PAAVIRESHRGFPU6S2RZ結(jié)構(gòu)質(zhì)粒和重組入肝細(xì)胞靶向序列PRES2和AAV殼體蛋白靶向相關(guān)序列突變的控制質(zhì)粒PAAVRCPRES2CAPA、PAAVRCCAPPRES2B、PAAVRCA585588。4、利用鈣磷沉淀法和陽(yáng)離子脂質(zhì)體法將PAAVIRESHRGFPU6CRZ和PAAVIRESHRGFPU6S2RZ結(jié)構(gòu)質(zhì)粒和PAAVRCPRES2CAPA、PAAVRCCAPPRES2B、PAAVRCA585588控制質(zhì)粒及輔助質(zhì)粒PHELPER共轉(zhuǎn)染包裝細(xì)胞293T，收集包裝出的重組腺相關(guān)病毒顆粒。5、經(jīng)倒置熒光顯微鏡觀察，重組的腺相關(guān)病毒顆?？筛腥靖伟┘?xì)胞，但其感染效率偏低。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建了重組HDV核酶的腺相關(guān)病毒載體，在細(xì)胞水平上驗(yàn)證了腺相關(guān)病毒載體轉(zhuǎn)運(yùn)的反式作用HDV核酶可抑制HBV基因的表達(dá)。同時(shí)改造了AAV的殼體蛋白，使其帶有靶向肝細(xì)胞的PRES2序列，并通過(guò)基因突變封閉了其原有的感染相關(guān)位點(diǎn)，采用無(wú)輔助病毒的方法包裝出了重組腺相關(guān)病毒顆粒，為進(jìn)一步研究重組了靶向HBV基因組特定區(qū)域反式作用HDV核酶的重組腺相關(guān)病毒顆粒特異性感染肝細(xì)胞的研究建立基礎(chǔ)。

簡(jiǎn)介：蘇州大學(xué)博士學(xué)位論文腺病毒介導(dǎo)的雙基因（ANTIVEGF發(fā)夾狀核酶IL24）治療結(jié)腸癌的實(shí)驗(yàn)研究姓名常樹(shù)建申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)內(nèi)科學(xué)（消化內(nèi)科）指導(dǎo)教師陳衛(wèi)昌20090501腺病毒介導(dǎo)的雙基因ANTIVEGF發(fā)夾狀核酶IL24治療結(jié)腸癌的實(shí)驗(yàn)研究中文摘要及ELISA檢測(cè)其對(duì)VEGFMRNA及蛋白表達(dá)的抑制作用，MTT法和流式細(xì)胞儀檢測(cè)ADRZ／Ⅱ，24對(duì)HT29細(xì)胞生長(zhǎng)抑制和凋亡誘導(dǎo)作用。在BALB／C裸鼠皮下建立HT29細(xì)胞動(dòng)物移植瘤模型，觀察ADRZ／IL24基因治療對(duì)結(jié)腸癌移植瘤生長(zhǎng)的抑制作用，免疫組化法檢測(cè)白細(xì)胞介素。24、生長(zhǎng)抑制和DNA損傷基因GADD及VEGF在移植瘤組織中的表達(dá)，CD34標(biāo)記檢測(cè)移植瘤組織微血管密度MVD。結(jié)果成功將抗VEGF發(fā)夾狀核酶和白細(xì)胞介素24克隆至同一復(fù)制缺陷型腺病毒載體上。實(shí)驗(yàn)所構(gòu)建復(fù)制缺陷型腺病毒ADRZ／IL24可以有效感染結(jié)腸癌HT29細(xì)胞，ADRZ／IL24感染HT29細(xì)胞后抗VEGF發(fā)夾狀核酶和白細(xì)胞介素24可在HT29細(xì)胞中高效表達(dá)。ADRZ／IL24能顯著抑制HT29細(xì)胞VEGF的表達(dá)，ADRZ／IL24、ADRZ、ADIL24感染48小時(shí)后HT29細(xì)胞中VEGFMRNA的相對(duì)表達(dá)量分別為PBS組的3901O％，45010％和91O10％，與PBS比較P005。ADRZ／IL24誘導(dǎo)的HT29細(xì)胞凋亡率為1100080％，大約為ADIL24所誘導(dǎo)凋亡的兩倍ADIL24凋亡率560土0271％，PO05。使用免疫組化方法在ADRZ／IL24及ADIL24處理組移植瘤中均檢測(cè)到了白細(xì)胞介素24及GADD的表達(dá)，ADRZ／IL24可以顯著抑制移植瘤組織中VEGF的表達(dá)及微血管密度MVD，各組MVD分別為PBS128111，ADGFP11510，ADIL一246010，ADRZ43O5，ADRZ／IL243506PO05。結(jié)論腺病毒載體介導(dǎo)的雙基因ANTIVEGF核酶和IL24ADRZ／IL24可顯著降低結(jié)腸癌HT29細(xì)胞中VEGF的表達(dá)和抑制HT29細(xì)胞的生長(zhǎng)，可顯著減少移植瘤組織玨

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多慢病毒介導(dǎo)的iNOS siRNA對(duì)大鼠腎臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf精彩內(nèi)容。