病毒性心肌炎中Th17細胞誘導的性別差異性及其機制.pdf

1、病毒性心肌炎(viral myocarditis，VMC)是一類臨床上常見的心血管系統(tǒng)疾病，主要由柯薩奇病毒B3型(CVB3)感染造成，目前已成為青少年心源性猝死的主要原因。VMC發(fā)病具有較明顯的性別差異，其中男性好發(fā)、病情嚴重，目前導致該發(fā)病的性別差異機制尚不明確。
　　 在本研究中，我們首先探討了CVB3感染雌雄小鼠病毒性心肌炎的發(fā)病情況，結果顯示雄性小鼠心肌組織出現(xiàn)彌漫性炎癥和壞死灶，心肌損傷血清學指標顯著上升，心肌炎發(fā)病

2、率及死亡率均顯著高于雌性，提示雌雄小鼠對于CVB3誘導的心肌炎呈現(xiàn)不同敏感性。為了探討該心肌炎差異性誘導的機制，我們分析了CVB3感染小鼠脾臟T細胞亞群(Th1、Th2、Th17、Treg)標志性細胞因子(IFN-γ、 IL-4、IL-17、Foxp3)的表達情況，發(fā)現(xiàn)在雌雄小鼠間IL-17的表達差異最為顯著(P＜0.05)。同時流式結果顯示，雄性脾臟Th17(CD4+IL-17+)百分比為2.34％，顯著高于雌性的0.92％，上調約2

3、.55倍，且該上調效應存在明顯的病毒劑量依賴性。進一步分析脾臟Th17比例改變與病毒性心肌炎疾病進程、嚴重程度間的相關性后發(fā)現(xiàn)，雄性小鼠脾臟Th17于病毒感染后第5天即出現(xiàn)明顯上調趨勢，至感染第7天其比例達到高峰約2.5％，顯著高于感染前的0.5％(P＜0.05)。該動態(tài)變化曲線與病毒性心肌炎的疾病進程高度一致，且與心肌炎嚴重程度指標體重減輕率、心肌病理評分呈現(xiàn)正相關，其中與心肌病理評分的r2值高達0.78。上述結果充分說明，對病毒性心

4、肌炎敏感性不同的雌雄小鼠差異性誘導了Th17細胞，并且后者在病毒性心肌炎發(fā)病過程中扮演了重要角色。
　　 隨后，我們分析了心肌炎小鼠脾臟局部參與Th17分化發(fā)育的重要細胞因子如TGF-β、IL-6、IL-21、IL-22以及轉錄因子RORγt和RORα的表達情況。結果顯示:正常雌雄小鼠上述分子表達未見差異，而在CVB3感染7天后，雄性小鼠脾臟IL-6、IL-21、IL-22、RORγt和RORα等表達較雌性顯著上調，提示雄性脾臟

5、免疫微環(huán)境更易誘導Th17細胞產生。那么，心肌炎中Th17性別差異性誘導分化是否由性激素不同而導致呢？我們向感染雄小鼠體內注射雌激素，發(fā)現(xiàn)其脾臟Th17比例下調約3.3倍，同時心肌炎癥浸潤和壞死明顯減少，生存率大幅上升(30％ vs 80％)，提示雌激素可通過下調Th17進而保護心肌炎。而當向雌小鼠注射雄激素后，并未見到Th17比例的顯著改變，同時心肌病理改變及生存率也無明顯變化，提示雄激素可能未參與Th17細胞的分化發(fā)育。