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簡(jiǎn)介:中南大學(xué)博士學(xué)位論文EB病毒LMP1介導(dǎo)細(xì)胞增殖和調(diào)控凋亡雙重生物學(xué)效應(yīng)分子機(jī)制探討姓名唐發(fā)清申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師曹亞200251中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院腫瘤研究所博士學(xué)位論文唐發(fā)清AP1CASPASECDKCROSSTALKCTARLCTAR2DABDIKBDOXEBEBNAEGFRIAP1心EBVHRPJAKLMPLNFLCBNPCPCR英文縮寫注解ACTIVATORPROTIENCYSTEINYLASPARATESPECIFICPROTEINCYCLINDEPENDENTKINASECARBOXYTERMINALACTIVATINGREGION1CARBOXYTERMINALACTIVATINGREGION一2DIARNINOBENZIDINEDOMINANTNEGATIVEMUTANTOFIKBDOXYCYLINEEMIDIUMBROMIDEEPSTEINBARRVIRUSNUCLEARANTIGENEPIDERMALGROWTHFACTORRECEPTORINHIBITOROFAPOPTOSISPROTEININHIBITOROFNFLCBEPSTEINBARRVIRUSHORSERADISHPEROXIDASEJANUSKINASELATENTMEMBRANEPROTEINLNUCLEARFACTORRD3NASOPHARYNGEALCARCINOMAPOLYMERASECHAINREACTION6激活蛋白1半胱氨酰天冬酸周期素依賴性激酶信息交流C活化區(qū)1C活化區(qū)2二氨基聯(lián)苯胺ITJ3顯負(fù)突變體強(qiáng)力霉素溴乙錠EB病毒核抗原表皮生長(zhǎng)因子受體凋亡抑制蛋白NFKB抑制子EB病毒辣根過(guò)氧化物酶JANUS激酶潛伏膜蛋白1核轉(zhuǎn)錄因子RD3鼻咽癌聚合酶鏈反應(yīng)
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簡(jiǎn)介:該文亦在HGV體內(nèi)外復(fù)制與表達(dá)、HGV致病性、HGV與HCV復(fù)制和表達(dá)差異及疫苗評(píng)價(jià)等方面進(jìn)行了系列探討一、全長(zhǎng)HGV轉(zhuǎn)基因小鼠的遺傳育種與特性研究轉(zhuǎn)基因小鼠是病毒的有效體系利用該室克隆出的完整HGVCDNA克隆HGV構(gòu)建由CMV啟動(dòng)子調(diào)控的含HGV全長(zhǎng)基因的目的片段用顯微注射法建立了整合有HGV全長(zhǎng)基因的FOUNDER小鼠該研究利用已建立的4株2、4、8、9FOUNDER小鼠分別和同系正常異性小鼠交配的方式進(jìn)行了轉(zhuǎn)基因小鼠傳代培育及建系所產(chǎn)仔鼠經(jīng)PCR和SOUTHERNBLOT進(jìn)行篩選并以ELISA檢測(cè)小鼠血清HGV抗原含量免疫組織化學(xué)法檢測(cè)小鼠組織HGV抗原表達(dá)表達(dá)量較高的陽(yáng)性小鼠被用于進(jìn)一步傳代、保種目前2號(hào)FOUNDER小鼠已傳至F代并從中篩選出了表達(dá)量相對(duì)較高的小鼠品系8號(hào)FOUNDER小鼠已傳至F代但4、9號(hào)FOUNDER小鼠在傳代過(guò)程中整合的外源基因丟失對(duì)2號(hào)FOUNDER小鼠FF代HGVNS3基因的分析表明至少在有效的測(cè)序范圍內(nèi)未發(fā)現(xiàn)核苷酸的突變或缺失轉(zhuǎn)基因小鼠各組織RTPCR檢測(cè)表明HGVRNA可以在多個(gè)組織檢測(cè)到而且肝、腎、肺等若干組織還有復(fù)制中間體負(fù)鏈RNA的存在二、鼠傷寒沙門氏菌PAGC啟動(dòng)子的克隆與活性分析從鼠傷寒沙門菌中克隆出PAGC啟動(dòng)子PPAGC構(gòu)建體內(nèi)激活的表達(dá)質(zhì)粒PZW插入庚型肝炎病毒HGVNS3基因構(gòu)建出表達(dá)質(zhì)粒PZWNS3以其轉(zhuǎn)化減毒鼠傷寒沙門菌SL7207觀察PPAGC的啟動(dòng)活性三、含體內(nèi)激活啟動(dòng)子的重組減毒鼠傷寒沙門菌能誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因鼠細(xì)胞免疫應(yīng)答該研究以庚型肝炎病毒HEPATITISGVIRUSHGV轉(zhuǎn)基因小鼠為模型探討逆轉(zhuǎn)免疫耐受的方法及與HGV致病性的關(guān)系四、HCV1A1B型嵌合體能在HEPG2細(xì)胞內(nèi)復(fù)制與表達(dá)為研究丙型肝炎病毒HEPATITISGVIRUSHGV1A和1B型嵌合體全長(zhǎng)CDNA在HEPG2細(xì)胞中的復(fù)制和表達(dá)以HCV1A1B嵌合體CDNA構(gòu)建表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEPG2細(xì)胞免疫組化和WESTERNBLOTTING檢測(cè)HCV蛋白表達(dá)RTPCR檢測(cè)HCV正、負(fù)鏈RNA結(jié)果轉(zhuǎn)染細(xì)胞中檢測(cè)到分子量約70KD的HCVNS3蛋白轉(zhuǎn)染細(xì)胞連續(xù)傳20代仍能檢測(cè)到HCV正、負(fù)鏈RNA證明該HCV嵌合體可以在細(xì)胞中復(fù)制和表達(dá)HCV1B型的RNA依賴的RNA聚合酶RDRP可以起始含1A型非編碼區(qū)的病毒復(fù)制五、庚型肝炎病毒和丙型肝炎病毒的比較研究全長(zhǎng)CDNA克隆在體內(nèi)外的表達(dá)與復(fù)制HGV和HCV同屬黃病毒科二者有相似的基因結(jié)構(gòu)然而HGV和HCV在致病性、嗜性、流行病學(xué)等方面確存在很大差異研究HGV和HCV的復(fù)制和表達(dá)有助于理解二者生物學(xué)差異的機(jī)制該課題的特色與創(chuàng)新之處1、進(jìn)行了轉(zhuǎn)基因小鼠的遺傳育種工作并篩選出能穩(wěn)定傳代和較高表達(dá)的HGV轉(zhuǎn)基因小鼠品系為在分子水平、細(xì)胞水平及整體水平研究HGV提供了一個(gè)很好的技術(shù)平臺(tái)2、將體內(nèi)激活的PAGC啟動(dòng)子PPAGC應(yīng)用于重組減毒傷寒沙門菌口服疫苗的構(gòu)建3、以HGV轉(zhuǎn)基因小鼠為慢性帶病毒的動(dòng)物模型探討了逆轉(zhuǎn)免疫耐受的方法證明以體內(nèi)激活的PPAGC為轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件的重組減毒傷寒沙門菌具潛在的免疫治療作用為慢性病毒性肝炎的治療提供了一個(gè)新的思路同時(shí)打破T細(xì)胞耐受的轉(zhuǎn)基因小鼠使HGV的研究更接近于自然感染4、證明HCV嵌合體可以在細(xì)胞中復(fù)制和表達(dá)HCV1B型的RNA依賴的RNA聚合酶RDRP可以起始含1A型非編碼區(qū)的病毒復(fù)制對(duì)闡明HCV復(fù)制和翻譯機(jī)制有重要意義5、HGV和HCV體外復(fù)制和表達(dá)及HGV體內(nèi)、外復(fù)制和表達(dá)的差異研究有助于認(rèn)識(shí)HGV和HCV生物學(xué)差異及病毒復(fù)制、蛋白剪切的分子機(jī)制
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簡(jiǎn)介:目的醫(yī)院排出的污水、污物,往往含有大量病毒、病菌、寄生蟲卵和一些有毒有害物質(zhì),若不加以處置,任其排放,將會(huì)不同程度的污染大氣、土地、水域,使人致病甚至引起介水傳染病的流行。本研究通過(guò)醫(yī)院污水的衛(wèi)生學(xué)調(diào)查和對(duì)四種腸道病毒的檢測(cè),為了解醫(yī)院污水消毒處理狀況及探討能夠檢測(cè)柯薩奇病毒、??刹《?、甲型肝炎病毒、輪狀病毒的快速、有效檢測(cè)方法,為評(píng)價(jià)醫(yī)院污水消毒狀況以及檢測(cè)常見(jiàn)腸道病毒提供參考。方法本研究通過(guò)對(duì)某市市區(qū)的11家醫(yī)院處理的污水進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)調(diào)查,檢測(cè)醫(yī)院污水中一般化學(xué)物、微生物、病毒的含量,了解排放的污水中各種污染物的分布情況,通過(guò)對(duì)不同類型的醫(yī)院污水的檢測(cè),比較各種消毒處理方法的消毒處理效果。并通過(guò)實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)水中加標(biāo)回收的四種腸道病毒和醫(yī)院污水的病毒,分析該方法的靈敏度和特異度,探討該方法的應(yīng)用。結(jié)果醫(yī)院污水中的細(xì)菌學(xué)指標(biāo)一般都能達(dá)標(biāo)排放,消毒處理使醫(yī)院污水中的糞大腸茵群、COD、SS、氨氮合格率分別從處理前的儺、1591%、5455%、431蹦上升到處理后的9091%、8409%、100%、6591%;綜合醫(yī)院排放的污水合格率均高于專科醫(yī)院排放的污水三種不同消毒方式液氯消毒、二氧化氯消毒、次氯酸鈉消毒對(duì)醫(yī)院污水消毒效果并沒(méi)有明顯的差異。實(shí)時(shí)熒光PCR可以快速檢測(cè)柯薩奇病毒、??刹《?、甲型肝炎病毒、輪狀病毒,方法總的靈敏度達(dá)到100拷貝。方法的重復(fù)性好,靈敏度高,出結(jié)果快速,是較為理想的病毒學(xué)檢測(cè)方法。對(duì)醫(yī)院污水檢測(cè)未檢出四種腸道病毒。結(jié)論醫(yī)院污水經(jīng)過(guò)消毒處理后,細(xì)菌學(xué)指標(biāo)一般都能達(dá)標(biāo)排放,消毒處理使醫(yī)院污水的合格率上升;綜合醫(yī)院排放的污水合格率均高于專科醫(yī)院排放的污水;三種不同消毒方式對(duì)醫(yī)院污水消毒效果并沒(méi)有明顯的差異。實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)水中的四種腸道病毒,靈敏度高、特異性好、方便快速。
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簡(jiǎn)介:分類號(hào)學(xué)號(hào)學(xué)號(hào)540D200978305學(xué)校代碼學(xué)校代碼10487密級(jí)密級(jí)博士學(xué)位論文HFGL2在肝癌和慢性病毒性肝炎中的作用及其免疫學(xué)機(jī)制研究學(xué)位申請(qǐng)人徐莉?qū)W科專業(yè)內(nèi)科傳染病指導(dǎo)教師寧琴教授答辯日期2012年5月HFGL2在肝癌和慢性病毒性肝炎中的作用及其免疫學(xué)機(jī)制研究學(xué)位申請(qǐng)人徐莉?qū)W科專業(yè)內(nèi)科傳染病指導(dǎo)教師寧琴教授答辯日期2012年5月獨(dú)創(chuàng)性聲明獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明,本學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果的總結(jié)。盡我所知,除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果。對(duì)本文的研究做出貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本人將承擔(dān)本聲明引起的一切法律后果。學(xué)位論文作者簽名日期年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□,在_____年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□。(請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”)學(xué)位論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期年月日日期年月日
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簡(jiǎn)介:本研究屬于“十五”國(guó)家科技攻關(guān)計(jì)劃課題“中醫(yī)藥治療病毒性肺炎療效評(píng)價(jià)方法研究”中的“臨床經(jīng)濟(jì)學(xué)評(píng)價(jià)”研究?jī)?nèi)容。評(píng)價(jià)本課題中西醫(yī)方案治療小兒呼吸道合胞病毒肺炎臨床經(jīng)濟(jì)學(xué)上的優(yōu)劣為本文主要研究目的。本文所研究病例數(shù)據(jù)資料均來(lái)自“十五”課題五中心研究資料,病例資料分為兩部分,一部分為課題研究病例共297例,另一部分為課題非研究病例共275例。對(duì)每一病例的住院花費(fèi)均按藥費(fèi)方案內(nèi)外、檢查費(fèi)方案內(nèi)外、治療費(fèi)、輸氧費(fèi)、床位費(fèi)、其他及合計(jì)項(xiàng)目分別統(tǒng)計(jì),作為每例患兒的直接醫(yī)療成本構(gòu)成;再行試驗(yàn)組與對(duì)照組、兩證型試驗(yàn)組與對(duì)照組、各中心試驗(yàn)組與對(duì)照組、研究病例試驗(yàn)組與非研究病例、研究病例對(duì)照組與非研究病例各種成本構(gòu)成統(tǒng)計(jì)學(xué)比較;統(tǒng)計(jì)以上比較組臨床療效;應(yīng)用成本效果分析方法分析臨床試驗(yàn)兩方案經(jīng)濟(jì)學(xué)意義,進(jìn)行總病例試驗(yàn)組與對(duì)照組、兩證型試驗(yàn)組與對(duì)照組、各中心試驗(yàn)組與對(duì)照組等成本效果比及增量分析,最后采用敏感度分析檢驗(yàn)成本效果分析結(jié)果。統(tǒng)計(jì)方法采用T檢驗(yàn)、X2檢驗(yàn)、KRUSKALWALLIS檢驗(yàn)和WILCOXON秩和檢驗(yàn),以SPSS115統(tǒng)計(jì)軟件統(tǒng)計(jì)。成本統(tǒng)計(jì)結(jié)果試驗(yàn)組方案內(nèi)平均成本為278595元,對(duì)照組方案內(nèi)平均成本為311208元,兩組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別P>005。試驗(yàn)組和對(duì)照組療效差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P<005。成本一效果分析結(jié)果為試驗(yàn)組CE307704,對(duì)照組CE380078,試驗(yàn)組較低,中藥試驗(yàn)方案治療小兒呼吸道合胞病毒肺炎的臨床經(jīng)濟(jì)學(xué)評(píng)價(jià)優(yōu)于西藥對(duì)照方案。敏感度分析證明原結(jié)果穩(wěn)定性好。本項(xiàng)小兒呼吸道合胞病毒肺炎中西醫(yī)治療方案成本效果分析研究,得出以清開靈注射液、兒童清肺口服液或小兒咳喘靈口服液為基本藥物的中藥試驗(yàn)方案的經(jīng)濟(jì)效果優(yōu)于以利巴韋林注射液、復(fù)方愈創(chuàng)木酚磺酸鉀口服液為基本藥物的西藥對(duì)照方案。用中藥方案治療小兒呼吸道合胞病毒肺炎值得向社會(huì)推廣。
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簡(jiǎn)介:目的評(píng)價(jià)病毒特異抗體IGM測(cè)定在病毒性腦炎診斷中的意義。期望尋找一種理想的病毒性腦炎的病原學(xué)診斷方法來(lái)提高病毒性腦炎的診斷水平為病毒性腦炎的臨床治療和發(fā)病機(jī)制研究提供依據(jù)。方法臨床診斷為病毒性腦炎的患者48例入院3天內(nèi)留取血清和腦脊液標(biāo)本。所有標(biāo)本凍存于70℃低溫冰箱分批進(jìn)行檢測(cè)。用美國(guó)ADL公司提供的ELISA試劑盒定量檢測(cè)標(biāo)本中三種病毒特異性抗體IGM的相對(duì)濃度。實(shí)驗(yàn)中血清及腦脊液標(biāo)本均用稀釋液11稀釋;通過(guò)六個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)本酶標(biāo)檢測(cè)結(jié)果代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算相關(guān)病毒特異性抗體IGM的濃度。實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)單純皰疹病毒1型HSV1巨細(xì)胞病毒HCMV柯薩奇病毒CBV;通過(guò)病毒抗體IGM濃度及陽(yáng)性率的測(cè)定建立病毒性腦炎的病原學(xué)診斷。實(shí)驗(yàn)設(shè)立非中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染疾病患者40例多發(fā)性硬化10例吉蘭巴雷綜合征20例腦囊蟲5例神經(jīng)官能癥3例良性高顱壓綜合征2例為對(duì)照組。對(duì)兩組患者病毒抗體的濃度及陽(yáng)性率進(jìn)行比較來(lái)評(píng)價(jià)病毒抗體IGM測(cè)定作為病原學(xué)診斷的意義。觀察病腦組患者的腦脊液細(xì)胞學(xué)特點(diǎn)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS120軟件計(jì)量資料采用T檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料采用X2檢驗(yàn)檢驗(yàn)水準(zhǔn)Α005。結(jié)果1在研究組48例中通過(guò)血清中病毒性腦炎抗體IGM測(cè)定診斷為單純皰疹病毒性腦炎的13例2708%巨細(xì)胞病毒性腦炎11例2292%柯薩奇病毒性腦炎7例1458%。通過(guò)腦脊液中病毒性腦炎抗體IGM測(cè)定診斷為單純皰疹病毒性腦炎的7例1458%巨細(xì)胞病毒性腦炎6例1250%柯薩奇病毒性腦炎3例625%。對(duì)照40例中有1例臨床診斷為吉蘭巴雷綜合征但單純皰疹病毒抗體檢測(cè)為陽(yáng)性;3例分別診斷為多發(fā)性硬化、吉蘭巴雷綜合征、腦囊蟲但巨細(xì)胞病毒抗體檢測(cè)為陽(yáng)性。在研究組中有1例出現(xiàn)單純皰疹病毒抗體和巨細(xì)胞病毒抗體重疊出現(xiàn)陽(yáng)性的現(xiàn)象。在血清病毒特異抗體IGM的測(cè)定中發(fā)現(xiàn)對(duì)于單純皰病毒特異抗體IGM的測(cè)定病例組與對(duì)照組在濃度及陽(yáng)性率的比較上均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P值分別為00002和00017對(duì)于巨細(xì)胞病毒抗體的測(cè)定病例組與對(duì)照組在濃度及陽(yáng)性率的比較上有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P值分別為00073和00183對(duì)于柯薩奇病毒抗體的測(cè)定病例組與對(duì)照組在濃度的比較上有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P00173在陽(yáng)性率的比較上無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P01116。在腦脊液病毒特異抗體IGM的測(cè)定中發(fā)現(xiàn)對(duì)于單皰病毒特異抗體IGM的測(cè)定病例組與對(duì)照組在濃度及陽(yáng)性率的比較上均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P值分別為00001和00339;對(duì)于巨細(xì)胞病毒特異抗體的測(cè)定病例組與對(duì)照組在濃度的比較上有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P00001在陽(yáng)性率的比較上無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P00585;對(duì)于柯薩奇病毒特異抗體的測(cè)定病例組與對(duì)照組在濃度及陽(yáng)性率的比較上均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P值分別為04404和03082。2在研究組中對(duì)于三種病毒特異抗體IGM的測(cè)定血清的測(cè)定中互相比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P03163腦脊液的測(cè)定中互相比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P04009。3記錄血清及腦脊液中測(cè)定病毒特異性抗體IGM的陽(yáng)性標(biāo)本數(shù)結(jié)果中有一種病毒抗體陽(yáng)性即記錄為該標(biāo)本陽(yáng)性所有病毒抗體陰性方記錄為陰性每位患者任一標(biāo)本病毒抗體陽(yáng)性即為該患者病原學(xué)檢測(cè)陽(yáng)性。血清中測(cè)定的總陽(yáng)性數(shù)為31占6458%腦脊液中測(cè)定的總陽(yáng)性數(shù)為16占3333%任何一種標(biāo)本中陽(yáng)性即記為總陽(yáng)性為42個(gè)占8750%。三組兩兩比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4將研究組48例患者按留取標(biāo)本時(shí)間早晚分為兩組在10天之內(nèi)的為急性期組共32例;在10天之后的為亞急性期組共16例。兩組在濃度及陽(yáng)性率的比較上有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P00024。5將研究組48例患者按腦脊液細(xì)胞學(xué)分類分為三組其中以淋巴細(xì)胞反應(yīng)為主的構(gòu)成比為5417%以嗜中性粒細(xì)胞反應(yīng)為主的占1250%完全正常的占3333%。結(jié)論1應(yīng)用腦脊液常規(guī)、生化、細(xì)胞學(xué)等檢測(cè)可對(duì)病腦患者進(jìn)行臨床診斷和鑒別診斷。2應(yīng)用特異性抗體IGM檢測(cè)方法簡(jiǎn)單迅速可對(duì)病毒性腦炎進(jìn)行早期病原學(xué)診斷有一定價(jià)值。3我們將繼續(xù)擴(kuò)大病例繼續(xù)探索病毒特異性抗體在病毒性腦炎中的診斷價(jià)值。4血與腦脊液聯(lián)合應(yīng)用在病毒性腦炎的診斷中有互補(bǔ)的意義。5在發(fā)病的不同時(shí)間選擇不同的抗體更有意義早期選擇IGM晚期選擇IGG對(duì)病毒性腦炎的診斷可能更有價(jià)值。
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簡(jiǎn)介:針對(duì)近些年我國(guó)腎綜合征出血熱疫情發(fā)展趨勢(shì),本研究在東北黑龍江、吉林、華北北京、東南浙江、西南貴州、西北新疆不同類型的疫源地中選擇代表性調(diào)查點(diǎn),采用分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)和序列分析以及應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)ELISA對(duì)鼠類宿主動(dòng)物和家畜漢坦病毒感染進(jìn)行了調(diào)查。結(jié)果如下1采集鼠類13種526只,總帶毒率228%,各地陽(yáng)性率差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義X7238,P0204;大林姬鼠、黑線姬鼠、褐家鼠、棕背鼠平感染率分別為381%、141%、435%、408%,其余鼠種均陰性;2對(duì)上述鼠陽(yáng)性代表性標(biāo)本進(jìn)行漢坦病毒的分型研究和M、S基因序列測(cè)定分析表明目前我國(guó)流行的漢坦病毒仍然以HANTAANVIRUSHTNV和SEOULVIRUSSEOV為主;并首次從我國(guó)大林姬鼠中發(fā)現(xiàn)AMUR漢坦病毒的存在;在貴州褐家鼠中發(fā)現(xiàn)了漢灘型漢坦病毒感染。3豬、牛、羊血清中漢坦病毒抗體檢測(cè)陽(yáng)性率分別為339%、174%和139%,證實(shí)漢坦病毒在家畜中的感染普遍存在。綜上所述,本研究進(jìn)一步證實(shí)我國(guó)鼠類宿主動(dòng)物攜帶了多種型別的漢坦病毒;揭示了褐家鼠作為漢灘型漢坦病毒溢出宿主的可能性;并首次發(fā)現(xiàn)我國(guó)大林姬鼠攜帶AMUR漢坦病毒;同時(shí)進(jìn)一步證實(shí)了漢坦病毒在家畜中普遍感染,但鑒于其感染率偏低,其在傳播HFRS上的作用有待進(jìn)一步研究。
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簡(jiǎn)介:目的了解病毒性乙型肝炎在人群中傳播的主要危險(xiǎn)因素方法采用病例對(duì)照研究從湖南省5個(gè)市、2個(gè)縣的共7家醫(yī)院中隨機(jī)抽取乙肝患者和對(duì)照各148人從長(zhǎng)沙某區(qū)隨機(jī)抽取L79人其中乙肝慢性感染者11人對(duì)照168人以上述總共475人為研究對(duì)象對(duì)其一般人口學(xué)特征、既往史、家族病史等進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查同時(shí)采集社區(qū)研究對(duì)象的血標(biāo)本檢測(cè)乙肝五項(xiàng)指標(biāo)和肝功能調(diào)查資料用SPSS110、SAS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果1全體資料成組分析單因素分析顯示輸血次數(shù)Z5807P36464P4310LP33490P005是乙肝感染的危險(xiǎn)因素多因素分析中引入LOGISTIC回歸方程的危險(xiǎn)因素為輸血次數(shù)、母親乙肝、共用剃刀、共用浴巾、避孕套使用情況和不安全注射史其中值最大的危險(xiǎn)因素是母親乙肝史2按病情分級(jí)配對(duì)資料的分析顯示輕中度組感染乙肝的危險(xiǎn)因素主要為共用浴巾、避孕套使用情況和不安全注射重度肝硬化組感染乙肝的危險(xiǎn)因素主要為輸血次數(shù)母親乙肝和避孕套使用情況3按年齡分段配對(duì)資料的分析顯示青年組感染乙肝的危險(xiǎn)因素主要為母親乙肝和共用浴巾中老年組感染乙肝的危險(xiǎn)因素主要為輸血次數(shù)和不安全注射史4對(duì)乙肝患者調(diào)查其所認(rèn)為的乙肝最有可能的傳播途徑6918%的患者選擇日常生活接觸傳播1321%的患者選擇母嬰傳播結(jié)論乙肝感染的危險(xiǎn)因素主要是輸血次數(shù)、母親乙肝、共用浴巾、避孕套使用情況及不安全注射青年組乙肝傳播的危險(xiǎn)因素為母親乙肝和共用浴巾中老年組乙肝傳播的危險(xiǎn)因素為不安全注射、輸血次數(shù)乙肝患者認(rèn)為乙肝最有可能的傳播途徑為日常生活接觸傳播其次為母嬰傳播
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簡(jiǎn)介:目的急性呼吸道感染為臨床上常見(jiàn)疾病,兒童及老年人發(fā)病率較高,病原體種類多。病毒感染與急性呼吸道感染發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)。副粘病毒科中呼吸道合包病毒(RSV),副流感病毒PIVS和偏肺病毒HMPV是常見(jiàn)的重要呼吸道病原體,可引起多種呼吸道疾病。目前實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法以熒光定量PCR和免疫熒光法為主,這2種方法有快速簡(jiǎn)便特點(diǎn),但無(wú)法獲取病毒毒株,尤其HMPV,限制了對(duì)病毒進(jìn)一步的研究。因此建立3種副粘病毒分離培養(yǎng)方法獲取毒株,尤其是HMPV,為今后研究提供物質(zhì)基礎(chǔ),具有十分重要的意義。據(jù)報(bào)道3種副粘病毒在不同國(guó)家或地區(qū)不同人群中的發(fā)病率和所致疾病嚴(yán)重程度存在差異。廣州地區(qū)地處亞熱帶,常見(jiàn)3種副粘病毒感染,但受人口衛(wèi)生環(huán)境等因素影響,病毒的流行周期及所致疾病嚴(yán)重程度可能存在差異。但關(guān)于這方面的流行病學(xué)研究仍然甚少,尤其是較晚發(fā)現(xiàn)的HMPV。甚少研究同時(shí)囊括3種副粘病毒進(jìn)行流行病學(xué)研究,比較感染臨床特征,探索病毒間的差異。而且過(guò)去副粘病毒研究對(duì)象以兒童患者為主,較少闡述病毒對(duì)成人的影響,比較二者之間病程差異。本研究通過(guò)收集廣州地區(qū)急性呼吸道感染患者的鼻咽拭子,建立適用于3種副粘病毒的細(xì)胞分離培養(yǎng)方法,尤其是HMPV。同時(shí)描述3種副粘病毒在廣州地區(qū)的流行病學(xué)特點(diǎn),比較RSV、PIVS和HMPV臨床特征,探索兒童與成人及3種病毒之間的臨床特征差異。方法⑴收集2009720119間廣州地區(qū)急性呼吸道感染(ARTIS)患者的鼻咽拭子。熒光定量PCR(REALTIMEPCR)檢測(cè)常見(jiàn)呼吸道病毒。⑵挑選RSV、PIVS和HMPV陽(yáng)性標(biāo)本各60份用于病毒細(xì)胞分離培養(yǎng)。本研究采用離心培養(yǎng)法進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)。RSV和PIVS接種細(xì)胞后(HEP2或LLCMK2細(xì)胞)3000RPM離心1H,連續(xù)培養(yǎng)510D。由于HMPV較難培養(yǎng),分離方法有所不同,使用離心培養(yǎng)法基礎(chǔ)上,接種VEROE6細(xì)胞,且盲傳3代,每代培養(yǎng)18D。同時(shí)利用HMPV毒株比較不同病毒培養(yǎng)方法轉(zhuǎn)鼓、離心和靜置培養(yǎng)法對(duì)病毒復(fù)制效率影響。⑶統(tǒng)計(jì)3種副粘病毒感染率及描述病毒人群和季節(jié)分布,整理患者信息(相關(guān)個(gè)人信息、實(shí)驗(yàn)室檢查信息和臨床特征等),應(yīng)用卡方檢驗(yàn)和FISHER確切概率法比較患者的臨床癥狀等,探索兒童與成人及3種病毒之間的臨床特征差異。結(jié)果本研究從2009年7月2011年9月開始收集急性呼吸道感染患者的呼吸道標(biāo)本,共27個(gè)月,REALTIMEPCR檢測(cè)5424例標(biāo)本,5111例標(biāo)本符合入選標(biāo)準(zhǔn),兒童患者(≤15歲)標(biāo)本3089例,成人患者(≥15歲)標(biāo)本2022例,男女比例是30942027。5111例標(biāo)本中,檢出HMPV陽(yáng)性175例,占34%。RSV陽(yáng)性576例(104),高于PIV,205例(40)。成功分離出14株RSV、19株P(guān)IVS和3株HMPV。922副粘病毒感染患者是兒童,兒童3種副粘病毒感染率285(9563089),高于成人患者37(752022)。兒童患者中,3種副粘病毒患者的平均年齡,RSVPIVSHMPV。通過(guò)27個(gè)月對(duì)急性呼吸道感染患者常見(jiàn)副粘病毒的監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn),廣州地區(qū)3種副粘病毒流行周期是相互重疊,RSV為主導(dǎo)。RSV和HMPV的流行季節(jié)較為相似,與INFLUENZA流行周期也重疊。RSV和HMPV流行高峰出現(xiàn)在晚冬和初春,HMPV流行高峰一般會(huì)比RSV晚1個(gè)月出現(xiàn),PIVS以PIV1和PIV3檢出為主,占897。PIV1和PIV3流行高峰相互重疊,夏季和秋季。副粘病毒患者混合感染其他呼吸道病毒現(xiàn)象較為常見(jiàn),INFLUENZA、EV、HCOV和MP4種病原體是的3種病毒患者最常混合感染其他呼吸道病毒。比較3種副粘病毒臨床特征,兒童患者臨床癥狀較嚴(yán)重,成人患者病情較輕。兒童患者的臨床特征以發(fā)熱,咳嗽,咳痰,喘息,腹瀉,納差等為主。RSV與PIVS患兒常發(fā)展為肺炎,HMPV常發(fā)展為支氣管肺炎?!?歲的兒童比較中,RSV患者表現(xiàn)咳痰和厭吃更多,而PIVS患兒乏力和咽痛癥狀比其他2種病毒顯著。發(fā)熱和肺部啰音是HMPV患兒較顯著的臨床特征。成年人以流感樣癥狀為主,HMPV患者全身癥狀比RSV患者明顯。結(jié)論①建立RSV、PIVS和HMPV分離培養(yǎng)方法,應(yīng)用離心培養(yǎng)法能較有效分離出RSV和PIVS。同時(shí)離心培養(yǎng)法與盲傳聯(lián)合應(yīng)用可實(shí)現(xiàn)HMPV分離培養(yǎng),適合臨床病毒實(shí)驗(yàn)室。②描述了廣州地區(qū)RSV、PIVS和HMPV的流行病學(xué)特點(diǎn),3種副粘病毒中,以RSV感染率最高,占主導(dǎo)。3種病毒流行周期相互重疊?!?歲的兒童是病毒的主要感染人群。③通過(guò)比較3種副粘病毒患者臨床特征發(fā)現(xiàn),兒童比成人嚴(yán)重。RSV、PIVS和HMPV臨床特征及病情發(fā)展存在差異。與RSV和PIVS相比,HMPV同樣是十分重要的病原體,不能被忽視。
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簡(jiǎn)介:碩士學(xué)位論文論文題目蘇州地區(qū)兒童呼吸道病毒流行病學(xué)及人類博卡病毒感染的臨床特征分析研究生姓名尹芳指導(dǎo)教師姓名季偉(教授)專業(yè)名稱兒科學(xué)研究方向小兒呼吸論文提交日期2014年3月
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簡(jiǎn)介:研究目的通過(guò)乙型病毒性肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查,了解浙江省湖州市20歲以上人群乙型肝炎病毒HBV的感染現(xiàn)狀及流行特征;深入研究乙肝感染的高危人群,評(píng)估政府預(yù)防乙肝的效果,發(fā)現(xiàn)和掌握目前乙肝防治工作的薄弱環(huán)節(jié)和重點(diǎn)工作,為政府部門進(jìn)一步制定乙肝的防治措施提供科學(xué)依據(jù);同時(shí)了解HBV感染者和未感染者中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的升高情況。方法1抽樣方法采用多階段分層隨機(jī)整群抽樣的方法,將浙江湖州市4個(gè)市縣內(nèi)≥20歲人群作為研究總體。首先,每個(gè)市縣根據(jù)經(jīng)濟(jì)水平,將所有鄉(xiāng)鎮(zhèn)街道分為高、中、低三層,每層隨機(jī)抽取1個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)街道,其次,在每個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)街道再根據(jù)經(jīng)濟(jì)水平,隨機(jī)抽取3個(gè)自然村居委會(huì)。全市共抽取12個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)街道,36個(gè)村居委會(huì),共調(diào)查15487人。每個(gè)市縣的調(diào)查人數(shù)占該區(qū)縣常住人口數(shù)的2%。2調(diào)查方法對(duì)每個(gè)調(diào)查對(duì)象按統(tǒng)一調(diào)查表進(jìn)行詢問(wèn)調(diào)查,同時(shí)采集靜脈血,分離血清,低溫保存,檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)。3檢測(cè)方法用酶聯(lián)免疫法ELISA檢測(cè)乙肝病毒表面抗原BBSAG、乙肝病毒表面抗體抗HBS和乙肝病毒核心抗體抗HBC。檢測(cè)在杭州艾迪康生物檢測(cè)有限公司進(jìn)行。使用艾康生物技術(shù)杭州有限公司的ELISA試劑,檢測(cè)儀器為日本BIORAD公司生產(chǎn)的680型酶標(biāo)分析儀。同時(shí)采用IFCC速率法,對(duì)每個(gè)對(duì)象進(jìn)行丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶ALT檢測(cè),試劑盒購(gòu)于北京利德曼生化股份有限公司,檢測(cè)儀器為美國(guó)ABBOTT公司生產(chǎn)的C8000全自動(dòng)生化分析儀。并采用ELISA法,對(duì)≥30歲并且HBSAG陽(yáng)性者進(jìn)行甲胎蛋白AFP檢測(cè),試劑金購(gòu)自鄭州博賽生物技術(shù)股份有限公司。4統(tǒng)計(jì)方法應(yīng)用WHO推薦的資料統(tǒng)計(jì)軟件SPSS130進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。統(tǒng)計(jì)方法采用卡方檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)為雙側(cè)Α005。結(jié)果湖州市≥20歲人群HBSAG攜帶率、HBSAB陽(yáng)性率、HBCAB陽(yáng)性率和乙型肝炎感染率經(jīng)標(biāo)化后分別為636%、4180%、3277%和3461%,男、女性人群HBSAG攜帶率分別為736%、606%。ALT陽(yáng)性率為756%,其中男、女陽(yáng)性率分別為1090%、542%。在年齡≥30歲并且HBSAG陽(yáng)性者中,AFP陽(yáng)性率為418‰。湖州市各地區(qū)的乙肝流行率不同,差異具有顯著性。成人中乙肝疫苗接種率在20%30%之間。結(jié)論與1992年浙江省病毒性肝炎流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果相比,湖州市≥20歲人群的HBSAG攜帶率、HBCAB陽(yáng)性率、乙型肝炎感染率均有明顯下降,但某些區(qū)縣的陽(yáng)性率仍較高,為使我國(guó)乙肝攜帶率降至低流行水平,今后在繼續(xù)做好計(jì)劃免疫人群乙肝疫苗接種的基礎(chǔ)上,還應(yīng)提高成人,特別是重點(diǎn)人群的乙肝疫苗接種。
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簡(jiǎn)介:背景單純皰疹病毒1型(HERPESSIMPLEXVIRUSTYPE1,HSV1)是有包膜的雙鏈DNA病毒,感染率高,作用范圍廣,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)主要導(dǎo)致單純皰疹病毒性腦炎(HERPESSIMPLEXENCEPHALITIS,HSE)。HSE因發(fā)病率較高成為威脅人類健康的重要疾病而受到高度重視。此外,據(jù)研究發(fā)現(xiàn)HSV1與老年癡呆癥、難治性局灶性癲癇、多發(fā)性硬化和急性播散性腦脊髓炎也有密切的關(guān)系。但HSV1感染的分子機(jī)制仍不清楚,據(jù)以往的研究表明HSV1感染擾亂了細(xì)胞的代謝,但缺乏代謝物整體改變的研究。目的研究單純皰疹病毒1型(HERPESSIMPLEXVIRUSTYPE1,HSV1)對(duì)人類少突膠質(zhì)細(xì)胞(OLIGODENDROGLIACELLS,OL細(xì)胞)代謝的影響,從而探討HSV1感染的機(jī)制。方法將OL細(xì)胞隨機(jī)分為兩組一組感染HSV1,另一組不感染HSV1。當(dāng)感染細(xì)胞出現(xiàn)明顯的細(xì)胞病變效應(yīng)時(shí),用甲醇氯仿法分別提取兩組培養(yǎng)液中的代謝產(chǎn)物,代謝物經(jīng)核磁共振氫譜1HNUCLEARMAGICRESONANCE,1HNMR檢測(cè)和鑒別,最后由偏最小二乘法判別分析PARTIALLEASTSQUAREDISCRIMINANTANALYSIS,PLSDA對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果感染HSV1和未感染HSV1的OL細(xì)胞代謝物存在明顯差異,主要差異代謝物包括氨基酸(亮氨酸、谷氨酸、纈氨酸、丙氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、谷氨酰胺)、乳酸、肌酸、葡萄糖。結(jié)論HSV1顯著地?cái)_亂了少突膠質(zhì)細(xì)胞的代謝平衡,可能影響了三羧酸循環(huán)、能量代謝和嘌呤核苷酸合成,從而建立它自己特有的代謝網(wǎng)絡(luò)。
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簡(jiǎn)介:中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文第一部分宮頸細(xì)胞學(xué)異常者的高危型HPV感染情況第二部分實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在人乳頭狀瘤病毒檢測(cè)中的應(yīng)用研究姓名歐華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師卞美璐20060901中周協(xié)和醫(yī)科大學(xué)碩士研究生論文LSILMHCNILMORORFSPBSPCRPFSRPMROU/CRSCCTBSURRVLPWNLLOWGRADESQUAMOUSINTRAEPITHELIALLESIONMAJORHISTOCOMPATIBILITYCOMPLEXNEGATIVEFORINTRAEPITHELIALLESIONORMALIGNANCYODDSRATIOOPENREADINGFRAMESPHOSPHATEBUFFEREDSALINEPOLYMERASECHAINREACTIONPROGRESSIONFREESURVIVALREVOLUTIONSPERMINUTESRELATIVELIGHTUNIT/POSITIVECONTROLSRELATIVERISKSQUAMOUSCELLCARCINOMATHEBETHESDASYSTEMUPPERREGULATORYREGIONVIRUSLIKEPARTICLESWI也INNORMALLESION2低度鱗狀上皮內(nèi)病變組織相容復(fù)合體無(wú)上皮內(nèi)病變或惡性病變比值比開放讀碼框磷酸緩沖鹽溶液聚合酶鏈反應(yīng)無(wú)進(jìn)展生存期每分鐘轉(zhuǎn)相對(duì)光單位/陽(yáng)性對(duì)照相對(duì)危險(xiǎn)度鱗狀上皮細(xì)胞癌伯塞斯達(dá)系統(tǒng)上游調(diào)節(jié)區(qū)類病毒樣小體正常范圍內(nèi)
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