粒毛盤菌黑色素及其衍生物結(jié)構(gòu)、生物活性與作用機(jī)制.pdf

1、本研究通過深層發(fā)酵獲得粒毛盤菌YM30菌絲體，采用化學(xué)方法對(duì)菌絲體進(jìn)行提取、純化獲得粒毛盤菌胞內(nèi)黑色素LIM。采用紫外吸收光譜，紅外光譜，元素分析，核磁共振譜及質(zhì)譜等技術(shù)解析出LIM可能的結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明，LIM是一種真黑色素，具有羥基吲哚結(jié)構(gòu)。
　　對(duì)LIM的抑菌活性進(jìn)行研究。采用微孔稀釋法檢測LIM對(duì)大腸桿菌等革蘭氏陰性菌和李斯特菌等革蘭氏陽性菌的抑菌效果，結(jié)果表明LIM對(duì)測試菌株均有抑制，且對(duì)副溶血性弧菌和金黃色葡萄球菌抑制效

2、果較好。選擇副溶血性弧菌和金黃色葡萄球菌兩種菌株對(duì)LIM抗菌效果進(jìn)行進(jìn)一步探究，通過掃描電鏡觀察、細(xì)菌細(xì)胞膜通透性檢測、N-苯基-1-萘胺(NPN)吸收和膜電位(MP)的檢測得到以下結(jié)果:LIM可以影響細(xì)菌細(xì)胞膜通透性和完整性，增加細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)容物的泄漏量，提高NPN攝入量并降低細(xì)菌膜電位，并且低濃度LIM對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2細(xì)胞無細(xì)胞毒性。以上結(jié)果表明，LIM具有抑菌活性，并可影響細(xì)菌的膜功能，可作為潛在的天然抑菌劑應(yīng)用于食品工業(yè)或藥物

3、制備。
　　采用精氨酸對(duì)LIM進(jìn)行修飾獲得衍生物ALIM，采用紅外、質(zhì)譜對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行驗(yàn)證，研究LIM、ALIM以及陽性藥物+LIM聯(lián)合治療在脂多糖/D-氨基半乳糖(LPS/D-GalN)肝損傷小鼠模型中的抗炎保肝效果。結(jié)果顯示，各處理組均顯著降低血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、肝臟核轉(zhuǎn)錄因子kappa B(NF-κB)水平，降低血清中腫瘤壞死因子-α（Tumor Necrosis Factor-alpha，TNF

4、-α)、白介素-8（Interleukin-8，IL-8）、白介素-1β(Interleukin-1β，IL-1β)含量，并且顯著降低了誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(Inducible Nitric Oxide Synthase，iNOS)及NO水平以及提高了白介素-4(Interleukin-4，IL-4)、白介素-10(Interleukin-10，IL-10)的含量。結(jié)果表明，LIM與ALIM均有顯著的抗炎保肝活性，陽性藥物+LIM聯(lián)合治療