衍生化法測(cè)定蚯蚓、山藥中巰基化合物的研究.pdf

1、巰基化合物廣泛存在于生物體內(nèi)，在生物體內(nèi)扮演者重要的角色。巰基化合物具有抗氧化﹑延緩衰老﹑重金屬解毒﹑清除自由基等活性功能。巰基化合物的巰基會(huì)在提取過(guò)程中受胞外環(huán)境的影響，容易使巰基氧化，而導(dǎo)致巰基化合物的測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確，甚至漏檢。近年來(lái)，生物樣品中巰基化合物提取液的測(cè)定，大部分經(jīng)過(guò)細(xì)胞破壁、衍生化、除蛋白等前處理過(guò)程。本研究以三種不同前處理方法對(duì)巰基化合物的測(cè)定進(jìn)行了探討，其細(xì)胞破壁與衍生化為一體的同步衍生化法提取得到的樣品提取液的靈

2、敏度最高。采用細(xì)胞破壁與衍生化為同步提取方法，得到準(zhǔn)確的巰基化合物的含量信息。利用UV-Vis紫外分光光度法和高效液相色譜法測(cè)定蚯蚓中GSH﹑Cys和總巰基的含量，此外光譜法測(cè)定山藥中總巰基和GSH含量。
　　第一章緒論簡(jiǎn)單介紹巰基化合物研究概況與巰基化合物的分析方法，提出本論文的選題思想和本課題的主要研究?jī)?nèi)容。
　　第二章5,5`-二硫硝基苯甲酸衍生化法測(cè)定蚯蚓中巰基化合物的含量
　　利用衍生化試劑5,5`-二硫硝基

3、苯甲酸（DTNB），采用UV-Vis紫外分光光度法測(cè)定蚯蚓中的總巰基含量以及高效液相色譜法選擇性的測(cè)定GSH﹑Cys。GSH、Cys和總巰基含量分別為0.6268μmol/g、0.8511μmol/g和4.5087μmol/g。根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，蚯蚓中含有相對(duì)較高的Cys含量，說(shuō)明蚯蚓具有很高的同化代謝土壤中硫的能力并使其轉(zhuǎn)換成Cys,為GSH和MTs生物合成提供充足的含巰基氨基酸源。
　　第三章光譜法測(cè)定蚯蚓中總巰基和GSH的含量<

4、br>　　本研究利用4,4`-二硫代聯(lián)吡啶(4-DPS)和鄰苯二甲醛(OPA)衍生化試劑，光譜法測(cè)定蚯蚓中總巰基和GSH含量。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果，蚯蚓中富含GSH和巰基化合物，可知蚯蚓體內(nèi)的含巰基化合物對(duì)重金屬具有強(qiáng)的配位作用，這為利用蚯蚓生物修復(fù)重金屬污染提供了重要的化學(xué)依據(jù)。
　　第四章衍生化法測(cè)定山藥中的谷胱甘肽和總巰基的含量
　　利用4,4`-二硫代聯(lián)吡啶(4-DPS)和鄰苯二甲醛(OPA)為衍生化試劑，采用三種不同前處理方