測定巰基類化合物的熒光探針的合成及應用研究.pdf

1、巰基化合物是生物體中許多蛋白質和小分子的重要組成部分，在細胞抗氧化系統(tǒng)中具有重要的作用。細胞內巰基化合物(包括半胱氨酸、高半胱氨酸和還原型谷胱甘肽等)在維持生命體系的氧化還原動態(tài)平衡方面起著重要的作用，它們是與酶活性有關的最具有反應性的官能團，并且在酶代謝過程中起著重要的作用。體內某些巰基化合物水平的高低與很多疾病密切相關，如：癌癥、老年癡呆癥和心血管疾病等。熒光分析法因其具有靈敏度高、選擇性好、動態(tài)響應范圍寬及易于進行原位分析等優(yōu)點而

2、在生物分子檢測中受到人們的廣泛關注。因此設計合成具有選擇性好、靈敏度高、可用于實時檢測巰基化合物的熒光探針成為一個十分活躍的研究方向。 文獻報道硝基是強吸電子基團，它能有效的活化苯磺酸酯中的C—S鍵，使其與親核試劑發(fā)生反應。基于上述原理，本論文設計合成了檢測巰基化合物的熒光探針，并對其機理做了初步的探討。具體研究內容如下： 首先，利用2,4—二硝基苯磺酰氯與熒光素反應合成了熒光探針熒光素-2,4—二硝基苯磺酸酯(Ⅰ)，并

3、開發(fā)了一種檢測硫離子的新型化學劑量計(chemdosimeter)。硫離子作為親核試劑可使熒光探針Ⅰ中的C—S鍵發(fā)生斷裂，釋放出強熒光物質熒光素，從而導致體系的吸光度值和熒光強度均顯著增強，且熒光強度與硫離子濃度在一定的范圍內呈線性關系，實驗結果表明，當向Ⅰ的溶液中加入硫離子后，溶液的顏色由淺黃色變?yōu)辄S綠色，因此利用該探針可實現(xiàn)對硫離子的裸眼分辨。硫普羅寧中的巰基作為親核試劑與熒光探針Ⅰ發(fā)生親核反應，生成強熒光物質熒光素，導致體系的吸光

4、度和熒光強度均顯著增強。該探針己被成功的用于硫普羅寧的藥物分析中。其次，以四甲基傘形酮為母體設計合成了一系列苯磺酸酯類化合物(4—MUDNBS、4—MUNBS和4—MUTS)，并將熒光探針4—MUDNBS(Ⅱ)用于藥物中卡托普利含量的分析測定。實驗中，我們研究了該探針分子中苯磺?；糠值娜〈鶎晒馓结橅憫匦缘挠绊懀Y果表明強吸電子性的硝基有利于親核反應的發(fā)生。實驗中利用新魚腥草素鈉在堿性條件下可分解生成十二酰乙醛和Na2SO3，SO