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1、第三章 消毒與滅菌教學(xué)目的: 掌握常見消毒藥品;熟練掌握消毒、滅菌技術(shù);,教學(xué)重點:,消毒、滅菌技術(shù),在制種過程中,消毒與滅菌是不可缺少的環(huán)節(jié)。消毒是指采用物理或化學(xué)的方法殺死物體表面或環(huán)境中的部分有害微生物;滅菌是指用物理或化學(xué)的方法殺死物體中或環(huán)境中的一切微生物,也就是說滅菌的物體不再有任何活的微生物存在。,消 毒 一、常用消毒藥劑及使用方法1.高錳酸鉀 強氧化殺菌劑,常用0.1-0.2%的溶液(取高錳酸鉀1
2、g,加水1000ml)對床架、器皿、用具和皮膚表面消毒。隨用隨配,2. 過氧化氫氧化型消毒劑。市售品為30%或3%水溶液,常用1%濃度消毒器皿、用具和皮膚。組織分離時用20%溶液浸種菇1-3分鐘。3. 漂白粉常用2-5%的漂白粉溶液(取2-5g漂白粉加水100ml)洗刷菇房的墻壁、床架、地面和用具等表面消毒4. 甲醛強還原性殺菌劑。市售品含量為37-41%噴霧:按1:5的比例配成水溶液。,5. 石炭酸 5%水溶液消毒,
3、配制時先用熱水溶化再加入所需水量。6. 來蘇兒(煤酚皂) 常用1-3%的溶液擦洗或用于手、用具的浸泡(2分鐘)或空間噴霧。7. 乙醇 70-75%手、接種工具等表面消毒,8.新潔爾滅 原溶液為5%,常用0.25%濃度對手和器具作表面消毒。9.石灰(Cao),熟石灰Ca(OH)2 壓蓋10.多菌靈 產(chǎn)品多為5%或25%可濕性粉劑,常用于培養(yǎng)基拌料消毒,添加量因品種而異。11.甲基托布津 常見劑型為50%、
4、70%可濕性粉劑,生產(chǎn)上用70%甲基托布津稀釋1000-1500倍噴霧菇床消毒。,,二、消毒方法(一)空間消毒法1.化學(xué)藥劑噴霧消毒法:2%-3%的來蘇水、2-5%漂白粉、0.25%多菌靈或新潔爾滅、5%石炭酸、1000-1500mg/L甲基托布津、10%澄清石灰水等2.化學(xué)藥劑熏蒸消毒法:A.甲醛-高錳酸鉀氧化熏蒸法 1m3空間用10ml甲醛加7g高錳酸鉀熏蒸,.,B.氣霧焚燒熏蒸消毒法: 1m3空間用2g菇保1號等氣
5、霧消毒劑熏蒸3.物理消毒法A.紫外線消毒一般用30-40W的紫外燈管,有效作用距離為1.5-2m照射20-30分鐘以上。B.臭氧發(fā)生器把空氣中的O2變成O3,O3具有強氧化作用。,(二)物體表面消毒法: 1-3%的來蘇兒溶液擦洗或用于手、用具的浸泡(2分鐘)。 70-75%酒精手、接種工具、菇體表面等表面擦拭消毒 0.1-0.2%的高錳酸鉀溶液對床架、器皿、用具和皮膚表面消毒?! ?.25%濃度對手和器具作表
6、面消毒。(三)培養(yǎng)料消毒 1.藥物消毒 0.2%多菌靈、0.1%克霉靈拌料消毒,2. 生、熟石灰 2-5%石灰拌料3. 巴氏消毒 法國微生物學(xué)家、化學(xué)家路易士、巴斯德首創(chuàng)的低溫消毒法。加熱到62℃,經(jīng)過30分鐘,以殺死不耐高溫的物質(zhì)中的微生物的消毒法。,滅菌一、滅菌方法(一)火焰滅菌法 利用酒精燈火焰外焰球形區(qū)域燒灼滅菌 適用于能耐高溫而不被破壞的器物如接種工具、培養(yǎng)皿、試管口或菌種玻璃瓶口,也可用于菇體等
7、。,(二)干熱滅菌 利用加熱的高溫(160-170℃,維持2小時)空氣使菌體蛋白變性從而達(dá)到滅菌。 適用于玻璃器皿、器械、棉塞、濾紙等(三)高壓濕熱蒸汽滅菌: 適用于培養(yǎng)基、玻璃器皿及用具等的滅菌手提式高壓蒸汽滅菌鍋的構(gòu)造和使用: 1.構(gòu)造:?。?)鍋體:一般以2KW電熱管作內(nèi)熱源,直接浸在鍋內(nèi)水中,通電后產(chǎn)生蒸汽。另附有支架,以承受內(nèi)鍋體。,(2)內(nèi)鍋:由鋁楹嵌接而成,用于承放待滅物品。底附有活動的柵格板,以防回
8、流冷凝水將物品弄濕。其邊上還有一用于插排氣管的槽?! 。?)鍋蓋:上有木把手、安全閥、放氣閥、壓力表(4)其它:橡皮墊圈、旋鈕等 2.使用方法:(1)加水:往鍋里加水與支架齊平 或稍高出支架。(2)裝鍋:往鍋中放入培養(yǎng)基試管。,(3)封鍋、接通電源:蓋好鍋蓋,對角線擰緊螺旋。關(guān)閉放氣閥和安全閥,接通電源,加熱。(4)排冷空氣:當(dāng)壓力達(dá)到0.5 Kg/cm2 (0.05Mpa) 時,打開放氣閥放冷氣。
9、(5)升溫升壓:壓力回零后,關(guān)閉放氣閥,繼續(xù)加熱加壓。(6)保溫保壓:當(dāng)壓力達(dá)到0.1Mpa時計時,使壓力保持在0.1-0.15Mpa之間,維持20-30min。(7)斷電降溫、出鍋:滅菌完畢后,撤掉電源,壓力自然降到“0”時打開鍋蓋,取出試管。,(四)常壓濕熱滅菌:用土蒸鍋等進(jìn)行滅菌 適用于原種、栽培種的培養(yǎng)基和熟料栽培的培養(yǎng) 料的滅菌操作方法:a 加水至八分滿b 裝鍋,要留有空隙。瓶呈品字形,袋呈井字形c
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