食用菌栽培技術(shù)

1、食用菌栽培技術(shù),滁州職業(yè)技術(shù)學(xué)院生化工程系湯士勇: tangshiyong_tsy@163.com: 570424862,第二章 食用菌菌種生產(chǎn),菌種生產(chǎn)類型及生產(chǎn)流程菌種生產(chǎn)的基本設(shè)備培養(yǎng)基的配制消毒與滅菌接種與培養(yǎng)菌種的分離方法菌種的保藏與復(fù)壯液體菌種生產(chǎn),本章主要內(nèi)容,一、菌種的生產(chǎn)類型及生產(chǎn)流程,菌種：是指以適宜的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基為載體進(jìn)行純培養(yǎng)的菌絲體，也就是培養(yǎng)基質(zhì)和菌絲體的聯(lián)合體?；蛘哒f(shuō)是指人工培養(yǎng)，并供

2、進(jìn)一步繁殖的食用菌的純菌絲體。菌種的生產(chǎn)類型：食用菌菌種是通過(guò)三級(jí)逐步擴(kuò)大培養(yǎng)的方式來(lái)生產(chǎn)的，在生產(chǎn)上通常把菌種分為一級(jí)菌種（母種）、二級(jí)菌種（原種）和三級(jí)菌種（栽培種）。,一、菌種的生產(chǎn)類型及生產(chǎn)流程,,菌種,,一級(jí)菌種,二級(jí)菌種,三級(jí)菌種,從孢子分離培養(yǎng)或組織分離培養(yǎng)獲得的純菌絲體。,由一級(jí)菌種擴(kuò)大繁殖成的菌絲體。,由二級(jí)菌種擴(kuò)大繁殖成的菌絲體，是直接用于栽培的菌種。,一、菌種的生產(chǎn)類型及生產(chǎn)流程,母種,一、菌種的生產(chǎn)類型及生

3、產(chǎn)流程,原種,一、菌種的生產(chǎn)類型及生產(chǎn)流程,栽培種,一、菌種的生產(chǎn)類型及生產(chǎn)流程,三級(jí)菌種之間的關(guān)系,一、菌種的生產(chǎn)類型及生產(chǎn)流程,菌種生產(chǎn)流程：,種菇,一級(jí)菌種,二級(jí)菌種,三級(jí)菌種,栽培,,,,,一、菌種的生產(chǎn)類型及生產(chǎn)流程,菌種生產(chǎn)工藝流程：,三級(jí)種培養(yǎng)基制備,高壓或常壓滅菌,接種,三級(jí)菌種,栽培,培養(yǎng),一、菌種的生產(chǎn)類型及生產(chǎn)流程,菌種制作的四個(gè)基本環(huán)節(jié),,配制培養(yǎng)基,滅菌,接種,培養(yǎng),,,二、菌種生產(chǎn)的基本設(shè)備,菌種廠的布局,

4、二、菌種生產(chǎn)的基本設(shè)備,接種設(shè)備接種室,二、菌種生產(chǎn)的基本設(shè)備,接種設(shè)備接種室,二、菌種生產(chǎn)的基本設(shè)備,接種設(shè)備接種室,二、菌種生產(chǎn)的基本設(shè)備,接種箱,觀察窗,紫外燈,操作孔,二、菌種生產(chǎn)的基本設(shè)備,超凈工作臺(tái)（凈化工作臺(tái)）,二、菌種生產(chǎn)的基本設(shè)備,超凈工作臺(tái)（凈化工作臺(tái)）,二、菌種生產(chǎn)的基本設(shè)備,接種工具要求：前端為導(dǎo)熱性好的金屬材料,二、菌種生產(chǎn)的基本設(shè)備,培養(yǎng)設(shè)備培養(yǎng)室：培養(yǎng)大量菌種的恒溫房,要求,,光線暗；密閉好、通

5、風(fēng)性強(qiáng)；能升溫、降溫（空調(diào)機(jī)）；有培養(yǎng)架,二、菌種生產(chǎn)的基本設(shè)備,培養(yǎng)室：培養(yǎng)大量菌種的恒溫房,二、菌種生產(chǎn)的基本設(shè)備,培養(yǎng)箱培養(yǎng)少量菌種的恒溫電器（20~40℃）,二、菌種生產(chǎn)的基本設(shè)備,滅菌設(shè)備,手提式高壓滅菌鍋,三、培養(yǎng)基的配制,培養(yǎng)基概念：采用人工的方法，按照一定比例配制各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，以供給食用菌生長(zhǎng)繁殖的基質(zhì)。要求：含有該菌生長(zhǎng)發(fā)育所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；水分、pH適宜；必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌，保持無(wú)菌狀態(tài)。,三、培養(yǎng)基的配制

6、,培養(yǎng)基種類,類型,,三、培養(yǎng)基的配制,培養(yǎng)基成分：水分碳源：?jiǎn)翁?、雙糖、多糖氮源：有機(jī)氮（氨基酸、蛋白質(zhì)、尿素）、銨態(tài)氮（硫酸銨）無(wú)機(jī)鹽：磷、鉀、鈣、鎂、硫等。磷酸氫二鉀對(duì)pH變化具有緩沖作用生長(zhǎng)素：B族維生素凝固劑：瓊脂,三、培養(yǎng)基的配制,,,粉狀,條狀,屬天然植物多糖 融點(diǎn)96℃以上凝點(diǎn)40 ℃以下冷水中不溶透明度好、粘著力強(qiáng)不被微生物分解利用,瓊脂,,三、培養(yǎng)基的配制,,,三、培養(yǎng)基的配制,母種

7、培養(yǎng)基PDA培養(yǎng)基和PSA培養(yǎng)基是一級(jí)菌種最常用的培養(yǎng)基，適用于大部分食用菌菌種的分離、培養(yǎng)和保藏，既是一種廣泛培養(yǎng)基，也是一種基礎(chǔ)培養(yǎng)基。,三、培養(yǎng)基的配制,母種培養(yǎng)基配制過(guò)程,煮沸20min，取定量濾液,制馬鈴薯濾液,濾液沸時(shí)加入，融后加余料,融化瓊脂,調(diào)節(jié)pH值,勿污管口，控制裝量,分裝試管,準(zhǔn)備滅菌,包扎成捆,1%NaOH或HCl,三、培養(yǎng)基的配制,母種培養(yǎng)基配制過(guò)程,三、培養(yǎng)基的配制,原種、栽培種培養(yǎng)基,三、培養(yǎng)基的配制,

8、原種、栽培種培養(yǎng)基,調(diào)pH與分裝,,pH：一般為8.0左右原種培養(yǎng)基裝大口瓶栽培種培養(yǎng)基裝菌種袋,外緊內(nèi)松，上緊下松,四、消毒與滅菌,基本概念,殺死一切微生物，包括芽孢。,滅菌,,分為,,殺菌：菌體尚存溶菌：菌體消失,消毒：只殺死病原菌，未傷及芽孢防腐：暫時(shí)抑制微生物生長(zhǎng)除菌：用沖洗、過(guò)濾等法，除去微生物,四、消毒與滅菌,物理消毒滅菌法熱力滅菌,（一）原理,高溫,使菌體蛋白質(zhì)、核酸、酶等凝固或變性失活。,四、消毒與滅菌,物

9、理消毒滅菌法熱力滅菌,（二）方法,,濕熱滅菌,干熱滅菌,四、消毒與滅菌,,干熱滅菌,四、消毒與滅菌,,四、消毒與滅菌,,器皿包裝→160℃~170℃2h,干燥箱,,使用,四、消毒與滅菌,,濕熱滅菌,,方法,高壓蒸汽滅菌,常壓蒸汽滅菌,巴氏消毒,四、消毒與滅菌,,蛋白質(zhì)凝固點(diǎn)與其含水量的關(guān)系,熱蒸氣穿透力大蛋白質(zhì)凝固點(diǎn)隨其含水量的增加而降低,,四、消毒與滅菌,,干熱滅菌與濕熱滅菌穿透力的比較,四、消毒與滅菌,,高壓蒸氣滅菌,,四、消

10、毒與滅菌,,,四、消毒與滅菌,四、消毒與滅菌,排氣,四、消毒與滅菌,純蒸氣壓力與溫度的關(guān)系,1kg/cm2=0.098Mpa(兆帕）=98Kpa（千帕）,四、消毒與滅菌,,常壓蒸氣滅菌,四、消毒與滅菌,,常壓蒸氣滅菌,四、消毒與滅菌,,3.巴氏消毒,四、消毒與滅菌,物理消毒滅菌法紫外線滅菌,四、消毒與滅菌,物理消毒滅菌法紫外線滅菌,便攜式,四、消毒與滅菌,物理消毒滅菌法紫外線滅菌,四、消毒與滅菌,化學(xué)消毒滅菌法,,四、消毒與

11、滅菌,氣霧消毒滅菌法,四、消毒與滅菌,氣霧消毒滅菌法,機(jī)理：結(jié)合蛋白質(zhì)氨基， 使其變性 。,甲醛,有刺激性和腐蝕性,四、消毒與滅菌,液體消毒滅菌法,,,,四、消毒與滅菌,液體消毒滅菌法,（一）氧化劑,四、消毒與滅菌,液體消毒滅菌法,高錳酸鉀,,紫色針狀結(jié)晶 0.1%~0.2%浸泡手、器具等。,,四、消毒與滅菌,液體消毒滅菌法,過(guò)氧化氫,無(wú)色液體，屬環(huán)保型消毒劑3%皮膚、傷口消毒 6％浸泡器皿30min,四、消毒與滅菌,液體消毒滅

12、菌法,漂白粉,四、消毒與滅菌,過(guò)氧乙酸無(wú)色至微黃色液體，有刺激性、腐蝕性、揮發(fā)性。,四、消毒與滅菌,液體消毒滅菌法,（二）表面活性劑,四、消毒與滅菌,勿與肥皂混用,四、消毒與滅菌,液體消毒滅菌法（三）重金屬鹽類1、氯化汞（升汞）：常用濃度0.1%~0.2%，主要用于食用菌菌種分離2、硝酸銀：0.1%~1.0%3、硫酸銅：常配制波爾多液,五、接種與培養(yǎng),母種的接種與培養(yǎng)接種（轉(zhuǎn)管）：,五、接種與培養(yǎng),培養(yǎng)：接種后的試管放入溫

13、箱內(nèi)，于25℃左右的溫度條件下培養(yǎng)。3d后檢查菌絲生長(zhǎng)情況及有無(wú)雜菌，培養(yǎng)7~15d母種菌絲即可長(zhǎng)好。,五、接種與培養(yǎng),原種的接種與培養(yǎng)接種：,五、接種與培養(yǎng),培養(yǎng)：前3-5d內(nèi)直立放置，當(dāng)菌絲吃料后倒臥疊放，并適時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)，這樣可以保證水分分布均勻，使菌絲生長(zhǎng)一致。定期檢查有無(wú)雜菌污染。原種應(yīng)在3個(gè)月內(nèi)使用。,五、接種與培養(yǎng),栽培種的接種與培養(yǎng)接種：,過(guò)程,用接種匙（鑷、鏟）取棗大原種放于袋的兩端或瓶中料面上,五、接種與培養(yǎng),培養(yǎng)：

14、30-40d后栽培菌種即可長(zhǎng)滿菌絲，供栽培使用。,五、接種與培養(yǎng),菌種質(zhì)量鑒定母種質(zhì)量鑒定：1、形態(tài)（外觀）：,五、接種與培養(yǎng),好母種,五、接種與培養(yǎng),2、長(zhǎng)勢(shì)：將菌種接入合適的培養(yǎng)基，在適宜的溫度條件下培養(yǎng)，若菌絲生長(zhǎng)快而整齊，濃而健壯，則為優(yōu)良品種。若菌絲生長(zhǎng)過(guò)快或過(guò)慢，菌絲不整齊且凌亂，則為劣質(zhì)品種。,五、接種與培養(yǎng),3、出菇試驗(yàn)：,五、接種與培養(yǎng),2、溫度適應(yīng)性：,五、接種與培養(yǎng),2、干濕性鑒定：,,仍正常生長(zhǎng),濕：15g瓊

15、脂/1000ml培養(yǎng)基 適宜：16.5g瓊脂/1000ml培養(yǎng)基干：18g瓊脂/1000ml培養(yǎng)基,五、接種與培養(yǎng),原種與栽培種質(zhì)量鑒定：,具有,菌絲白（符合該菌種的顏色）均勻、粗壯、有菇香味接種后萌發(fā)快,,,,菌種種類品種名稱菌種級(jí)別代 時(shí)生產(chǎn)廠家接種日期,合格菌種,,,用于生產(chǎn),五、接種與培養(yǎng),原種與栽培種質(zhì)量鑒定：,產(chǎn)生原基,五、接種與培養(yǎng),原種與栽培種質(zhì)量鑒定：,黃水,污染,六、菌種分離方法,孢子

16、分離法：,孢子分離法,,概念,特點(diǎn),操作過(guò)程,利用子實(shí)體產(chǎn)生的成熟有性孢子分離培養(yǎng)獲得純菌種的方法,,屬于有性繁殖，后代易發(fā)生變異，可用此法培育新品種分離過(guò)程較復(fù)雜，適用于膠質(zhì)菌類和小型傘菌,孢子的采集→孢子的分離→孢子的萌發(fā),六、菌種分離方法,孢子分離法：,孢子分離法,多個(gè)孢子萌發(fā)后自由交配獲得純菌種的方法,多孢分離,單孢分離,單個(gè)孢子萌發(fā)獲得純菌種的方法,,,,,,整菇插種法鉤懸法孢子印法,平板稀釋法連續(xù)稀釋法毛細(xì)血管法,

17、六、菌種分離方法,組織分離法：,組織分離法,將食用菌的部分組織移接到斜面培養(yǎng)基上獲得純培養(yǎng)的方法,,簡(jiǎn)單易行保持原菌種性狀適用于大型肉質(zhì)子實(shí)體重復(fù)多易退化,種菇選擇→種菇消毒→切取組織塊→移接組織塊至斜面中央→培養(yǎng),特點(diǎn),概念,操作過(guò)程（以傘菌為例）,,六、菌種分離方法,基內(nèi)菌絲分離法：,基內(nèi)菌絲分離法,,概念,特點(diǎn),適用范圍,從生長(zhǎng)子實(shí)體的培養(yǎng)基中分離菌絲獲得純培養(yǎng)的方法,易感染雜菌,子實(shí)體已腐爛，但又必須保留該種菌種子實(shí)體小

18、而薄，用組織分離法和孢子分離法較困難混合菌絲培養(yǎng)類型，如銀耳，多采用此法,,七、菌種的保藏與復(fù)壯,菌種的保藏,使菌種不死亡不生長(zhǎng)不污染，不降低或不喪失其優(yōu)良性，以盡量延長(zhǎng)使用時(shí)間。,保藏目的,保藏原理,創(chuàng)造不利于菌種生長(zhǎng)的一切條件，使其代謝處于休眠狀態(tài)。,七、菌種的保藏與復(fù)壯,菌種的保藏,七、菌種的保藏與復(fù)壯,菌種的保藏,特點(diǎn),簡(jiǎn)便保藏時(shí)間短易污染及退化不適于草菇等菌類,,1.斜面低溫法斜面菌種置4~6℃冰箱中（3~6個(gè)月）,