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1、臨床微生物檢驗(yàn),常見(jiàn)標(biāo)本的采集及相應(yīng)標(biāo)本的微生物分布情況,臨床常見(jiàn)的微生物檢驗(yàn)標(biāo)本,血液、骨髓標(biāo)本泌尿生殖道標(biāo)本糞便標(biāo)本呼吸道標(biāo)本膿液及創(chuàng)傷感染標(biāo)本穿刺液真菌感染標(biāo)本,,為了準(zhǔn)確檢出病原菌,避免漏檢及誤診,臨床醫(yī)護(hù)人員應(yīng)掌握細(xì)菌檢驗(yàn)標(biāo)本的采集、運(yùn)送、保存及處理的一般原則。 標(biāo)本采集尤為重要。,標(biāo)本采集的一般原則,早期采集 采集標(biāo)本最好是在病程早期、急性 期,且必須在使用抗菌素藥物之前嚴(yán)
2、格無(wú)菌操作 盡量減少或避免與病灶周?chē)>汉屯庠葱约?xì)菌污染標(biāo)本(如中段尿標(biāo)本及陰道分泌物的采集)采集適量標(biāo)本 標(biāo)本量過(guò)少可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果盛放標(biāo)本容器 無(wú)菌容器,血液及骨髓標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,標(biāo)本采集的時(shí)機(jī)與次數(shù):對(duì)懷疑菌血癥(包括真菌血癥)的患者,在考慮使用抗生素之前采集標(biāo)本。 一般建議在病人寒戰(zhàn)和
3、發(fā)熱高峰30~60分鐘內(nèi)于不同部位或短隔時(shí)間內(nèi)采集2套或2套以上血培養(yǎng)標(biāo)本。懷疑心內(nèi)膜炎和其他靜脈內(nèi)感染的,可分開(kāi)時(shí)段采集。標(biāo)本采集量:成人為10ml/瓶,兒童為2~5ml/瓶;骨髓量在1~2ml/瓶,血液及骨髓標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,采集方法:皮膚消毒—血培養(yǎng)瓶消毒—采集標(biāo)本(75%酒精在消毒部分作用1分鐘) 懷疑亞急性心內(nèi)膜炎患者,皮膚消毒尤為重要,因?yàn)槠渲饕≡鸀槠つw定植菌(如凝固酶陰性
4、葡萄球菌)標(biāo)本及時(shí)送檢,血液及骨髓標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,注意事項(xiàng):嚴(yán)格消毒并執(zhí)行無(wú)菌操作避免皮膚正常菌群污染。不要與其他血液標(biāo)本同時(shí)采集,防止抗凝劑對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)影響切忌在靜滴抗生素的靜脈處采血不宜在靜脈導(dǎo)管或靜脈置流口采血不主張換針頭入瓶,血液及骨髓標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,正常人血液是無(wú)菌的,人體血液感染是細(xì)菌易位感染,當(dāng)人體局部感染向全身播散和出現(xiàn)全身感染時(shí)可出現(xiàn)菌血癥、敗血癥和膿毒血癥;細(xì)菌侵入骨髓時(shí)可引起嚴(yán)重的骨髓炎。,血
5、液及骨髓標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,泌尿生殖道標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,標(biāo)本采集時(shí)間:抗生素使用之前采集。通常采集晨起第1次尿液,確保尿液在膀胱停留4小時(shí)以上,沙門(mén)菌感染一般在發(fā)病2周左右采集尿液培養(yǎng)。采集方法 1、中斷尿采集:用肥皂水清洗外陰,或以無(wú)菌生理鹽水沖洗尿道口后留取中斷尿 2、膀胱穿刺發(fā):對(duì)恥骨聯(lián)合上皮膚消毒,穿刺抽取標(biāo)本 3、導(dǎo)尿法:直接導(dǎo)尿法由于容易導(dǎo)致繼發(fā)感染,一般不提倡使用;留置導(dǎo)管
6、采集法:消毒導(dǎo)管壁,無(wú)菌注射器穿刺導(dǎo)管采集尿液。注意,長(zhǎng)期導(dǎo)尿因更換導(dǎo)管后留取標(biāo)本。,泌尿生殖道標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,4、集尿法:懷疑結(jié)核桿菌感染時(shí),可用清潔容器收集24小時(shí)尿,取其沉渣10-15ml送檢,泌尿生殖道標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,尿液培養(yǎng)結(jié)果判定:正常情況下尿液是無(wú)菌的,尿液培養(yǎng)是診斷尿路感染的主要指標(biāo)。一般認(rèn)為,清潔中段尿標(biāo)本培養(yǎng)結(jié)果有以下幾種判斷情況:G-b≥105cfu/ml、 G+c≥104cfu/ml時(shí)有臨床診斷意
7、義(高指標(biāo))細(xì)菌總數(shù)≤ 103cfu/ml考慮為污染菌(伴有膿尿是也具有臨床意義),泌尿生殖道標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,注意事項(xiàng)1、最好留取晨起第一次尿液標(biāo)本(或憋尿4小時(shí)以上)2、必須嚴(yán)格無(wú)菌操作3、尿液標(biāo)本應(yīng)及時(shí)送檢4、標(biāo)本中不得加防腐劑或消毒劑5、不能直接用導(dǎo)尿管頭劃線(xiàn)培養(yǎng),培養(yǎng)結(jié)果可能是 導(dǎo)尿管頭上的定植菌6、尿液對(duì)細(xì)胞系有毒性作用,一般不用于支原體培養(yǎng),泌尿生殖道標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,生殖道標(biāo)本采集,標(biāo)本采
8、集:根據(jù)不同感染種類(lèi)和病變特征采集不同標(biāo)本,比較常見(jiàn)的有:1、陰道標(biāo)本 在陰道上端采集粘膜分泌物,如B群鏈球菌篩查在陰道口和肛門(mén)部位采集2、前列腺液標(biāo)本 清洗尿道口,排尿沖洗尿道后用前列腺按摩法采集前列腺液,收集于無(wú)菌容器中3、精液標(biāo)本 受檢者應(yīng)在3天以上未排精,清洗尿道口后采用手淫法,射精于無(wú)菌容器中,注意事項(xiàng)生殖器是開(kāi)放性器官,標(biāo)本采集過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作以減少雜菌污染,生殖道標(biāo)本采集,生殖道標(biāo)本采集,糞便標(biāo)本采集
9、及常見(jiàn)病原菌,采集方法 1、自然排便采集法:自然排便后,挑取有膿血或粘液部位的糞便,液狀糞便取絮狀物盛于無(wú)菌容器中及時(shí)送檢2、直腸拭子采集法:適用于排便困難患者或嬰幼兒。用肥皂水清洗肝門(mén)周?chē)?,用無(wú)菌鹽水、保存液潤(rùn)濕肝門(mén)采集拭子插入肝門(mén)(成人約4~5cm,嬰幼兒約2~3cm)輕輕旋轉(zhuǎn),采集后及時(shí)送檢,糞便標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,標(biāo)本采集的量一般為2克左右,若標(biāo)本為水樣便,則采集2ml左右標(biāo)本,置于無(wú)菌容器中送檢采集時(shí)間及頻率 盡量在發(fā)
10、病早期(急性期)和應(yīng)用抗生素治療前采集標(biāo)本,懷疑沙門(mén)菌感染則在發(fā)病2周后采集標(biāo)本;重復(fù)采集標(biāo)本頻率每日最多1次。,糞便標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,注意事項(xiàng)1、標(biāo)本采集做好在使用抗生素前采集2、無(wú)菌容器收集標(biāo)本3、采集新鮮糞便培養(yǎng),可提高陽(yáng)性率4、腹瀉患者應(yīng)盡量在急性期采集標(biāo)本,糞便標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,呼吸道標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,一、上呼吸道標(biāo)本的采集標(biāo)本采集 上呼吸道 標(biāo)本包括鼻、鼻咽部和口咽拭子標(biāo)本。1、鼻拭子的采集:最好使
11、用擴(kuò)鼻器,用無(wú)菌拭子蘸取無(wú)菌生理鹽水,插入鼻孔采集病灶標(biāo)本。2、鼻咽拭子的采集:清水漱口,用無(wú)菌拭子采集鼻咽紅腫處標(biāo)本。標(biāo)本采集后存放于無(wú)菌試管內(nèi)。,呼吸道標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,標(biāo)本采集時(shí)間及頻率采集時(shí)間:抗生素使用前采集,時(shí)間上無(wú)嚴(yán)格的限制,但咽部是呼吸和食物的通路,也因晨起后采集為佳。采集標(biāo)本的頻率:重復(fù)采集標(biāo)本的頻率一般每日最多1次,呼吸道標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,注意事項(xiàng)1、抗生素使用前采集2、標(biāo)本采集前數(shù)小時(shí)不得使用消毒
12、藥水漱口3、用拭子采集標(biāo)本時(shí)要小心、準(zhǔn)確地在病灶部位采集,盡量避免口腔正常菌群污染4、采集標(biāo)本時(shí)應(yīng)戴口罩和手套,以防傳染,呼吸道標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,呼吸道標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,二、下呼吸道的標(biāo)本采集標(biāo)本采集時(shí)間:以晨痰為好(一般晨痰量比較多),且在抗生素藥物使用前采集為佳。標(biāo)本采集方法1、自然咳痰法:用冷開(kāi)水(或無(wú)菌生理鹽水)反復(fù)漱口后,用力自氣管咳出第一口痰。對(duì)于少痰或無(wú)痰可采集霧化后咳痰。2、支氣管鏡采痰法:用支氣管鏡
13、在肺內(nèi)病灶處采集痰標(biāo)本。(比較痛苦,少用),呼吸道標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,3、人工氣道采痰法:通過(guò)氣管切口插管,負(fù)壓吸引取得痰液。(標(biāo)本合格率較高)外觀(guān)判斷痰液標(biāo)本是否合格 1、標(biāo)本為水樣或唾液樣,為口腔標(biāo)本 2、標(biāo)本中含有食物殘?jiān)?3、標(biāo)本量少用1ml(陽(yáng)性率較低),呼吸道標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,注意事項(xiàng)1、采集標(biāo)本以晨痰為佳,采集前應(yīng)先冷開(kāi)水或無(wú)菌生理鹽水充分漱口,以免口腔正常菌群污染標(biāo)本2、標(biāo)本采集后立即送檢
14、3、肺部感染的患者患菌血癥的可能性較大,應(yīng)同時(shí)做血液培養(yǎng),呼吸道標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,組織或器官化膿性感染分為內(nèi)源性和外源性感染兩類(lèi),病灶膿液可來(lái)自開(kāi)放性膿腫或閉鎖性膿腫。標(biāo)本采集1、開(kāi)放性膿腫:開(kāi)放性膿腫標(biāo)本包括眼(結(jié)膜、角膜)、耳(外耳)、扁桃體、術(shù)后切口感染等膿性分泌物。首先用無(wú)菌生理鹽水清洗病灶表面的污染雜菌,用無(wú)菌棉拭子先蘸取少許生理鹽水,然后采集靠近組織部分膿液及病灶深部的分泌物
15、(最好從膿腫底部或膿腫壁取樣)立刻送檢。,膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,2、閉鎖性膿腫:閉鎖性膿腫標(biāo)本指有完整膿壁與體腔,與外界不相通的膿腫,如淋巴結(jié)膿腫、乳腺膿腫、胸腔膿腫、腹腔積液、關(guān)節(jié)腔積液及各器官膿腫等標(biāo)本。之類(lèi)標(biāo)本應(yīng)采集滲出物和膿腫壁標(biāo)本,一般不主張用拭子采集標(biāo)本,采集此類(lèi)標(biāo)本前應(yīng)對(duì)病灶局部皮膚或粘膜表面進(jìn)行消毒,用無(wú)菌注射器將膿腫內(nèi)容物抽出,然后切開(kāi)膿腫、引流,采集膿液標(biāo)本(大于1ml)送檢。,膿液及創(chuàng)傷感染分泌
16、物標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,送檢時(shí)間:懷疑感染存在時(shí)應(yīng)盡早采集標(biāo)本,一般在患者使用抗生素之前或停藥1~2天后采集標(biāo)本。,膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,注意事項(xiàng)1、盡可能在使用抗生素之前或停藥1~2天后采集標(biāo)本。2、開(kāi)放性病灶和膿腫,應(yīng)盡量去除表面污染菌,用拭子在病灶活動(dòng)區(qū)域或其底部采集標(biāo)本送檢。3、閉合膿腫應(yīng)采取滲出物和膿腫壁標(biāo)本,盡量不用拭子采集標(biāo)本,避免細(xì)菌對(duì)干燥敏感。,膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,穿刺液
17、標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,一、腦脊液標(biāo)本采集標(biāo)本采集1、采集時(shí)間:懷疑患者腦膜炎時(shí)應(yīng)立即采集腦脊液,并盡量在使用抗生素前采集。2、標(biāo)本采集方法:嚴(yán)格無(wú)菌操作下進(jìn)行腰椎穿刺采集標(biāo)本,一般為1~2ml。,穿刺液標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,注意事項(xiàng)1、最好在抗生素使用前采集標(biāo)本2、采集標(biāo)本過(guò)程中嚴(yán)格無(wú)菌操作3、做腦脊液培養(yǎng)的同時(shí)建議做血培養(yǎng),穿刺液標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,二、膽汁標(biāo)本的采集采集方法:常用的有膽囊穿刺法和手術(shù)采取法。1、膽囊
18、穿刺法:在進(jìn)行膽囊造影術(shù)時(shí)可同時(shí)采取膽汁。不易污染,宜做細(xì)菌培養(yǎng)。2、手術(shù)采取法:在進(jìn)行膽囊及膽管手術(shù)時(shí)可由膽總管,膽囊主機(jī)穿刺采取膽汁。不易污染,宜做細(xì)菌培養(yǎng)。,穿刺液標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,穿刺液標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,三、胸腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜積液標(biāo)本的采集采集方法1、漿膜腔積液標(biāo)本由臨床醫(yī)生穿刺采集,手術(shù)過(guò)程中必需無(wú)菌操作。2、送檢標(biāo)本最好留取中段液于無(wú)菌試管中或直接接種也血培養(yǎng)瓶中,標(biāo)本采集量為1~5ml,不能用無(wú)菌
19、拭子蘸取送檢。3、如標(biāo)本注入無(wú)菌試管時(shí),試管應(yīng)用先加入滅菌肝素后在注入標(biāo)本,防止標(biāo)本凝固;另一方面是由于標(biāo)本在接種時(shí)發(fā)生二次污染的機(jī)會(huì)較大,本人建議少用。,穿刺液標(biāo)本采集及常見(jiàn)病原菌,注意事項(xiàng)1、標(biāo)本采集過(guò)程嚴(yán)格無(wú)菌操作,防止污染。2、為了防止標(biāo)本凝固,最好在無(wú)菌試管中預(yù)先加入滅菌肝素抗凝劑,抗凝劑:標(biāo)本=1:10 或可以直接注入血培養(yǎng)瓶送檢3、標(biāo)本送檢過(guò)程中必須保證其安全,防止溢出,避免環(huán)境污染。4、此類(lèi)培養(yǎng)時(shí)最好同時(shí)
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