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文檔簡介
1、常見標(biāo)本的采集,,海恩法則:德國飛機(jī)渦輪機(jī) 的發(fā)明者德國人帕布斯-海恩 提出一個在航空世界關(guān)于飛行 的安全法則:每一起嚴(yán)重事故 的背后,必然有29次輕微事故 和300起未遂先兆以及1000起 事故隱患。法則強(qiáng)調(diào)兩點(diǎn):一、事故的發(fā)生是量的積累的結(jié)果. 二、再好的技術(shù)、再完美的規(guī)章在實(shí)際操作層面也無法取代人自
2、身的素質(zhì)和責(zé)任心.,海 恩 法 則,標(biāo)本采集是病原學(xué)檢測的第一步也是最關(guān)鍵的一步,? 無菌標(biāo)本:區(qū)別污染細(xì)菌 非無菌標(biāo)本:區(qū)別定植細(xì)菌,非無菌標(biāo)本 無菌標(biāo)本 痰 血液 咽拭子 腦脊液 尿液 關(guān)節(jié)腔積液 糞便 胸腹水 其他類別 其他類別,臨床微生物標(biāo)本的分類,是
3、指采集患者少許血液、排泄物、分泌物、嘔吐物、體液和脫落細(xì)胞以及組織細(xì)胞等樣本,通過物理、化學(xué)或?qū)嶒?yàn)室技術(shù)和方法進(jìn)行檢驗(yàn),作為判斷患者有無異常存在的依據(jù)。標(biāo)本在一定程度上可反映機(jī)體正常的功能狀態(tài)或病理變化。,標(biāo)本采集定義,協(xié)助疾病明確診斷推測病程進(jìn)展制定治療措施觀察病情,標(biāo)本采集意義,采集前 —遵照醫(yī)囑 —充分準(zhǔn)備:物品準(zhǔn)備,病人準(zhǔn)備,護(hù)士自身準(zhǔn)備采集中 —嚴(yán)格查對 正確采集,:采集方法、量、時間準(zhǔn)確、操作規(guī)范
4、采集后 —再次查對,及時送檢,標(biāo)本采集原則,血液標(biāo)本采集尿標(biāo)本采集大便標(biāo)本采集痰標(biāo)本采集咽拭子標(biāo)本采集,常見標(biāo)本采集原則及方法,是臨床最常用的檢驗(yàn)項(xiàng)目之一毛細(xì)血管標(biāo)本采集靜脈血標(biāo)本采集動脈血標(biāo)本采集,一、血液標(biāo)本采集,全血標(biāo)本:血沉、血常規(guī)、凝血功能、血型、交叉合血、測定血液中某些物質(zhì)含量血清標(biāo)本:血清酶、脂類、電解質(zhì)、肝功、兩對半及某些免疫檢查血培養(yǎng)標(biāo)本:血液中的致病菌,靜脈血標(biāo)本,先采生化、凝血標(biāo)本,再采血培養(yǎng)
5、標(biāo)本。,———關(guān)于各種血液標(biāo)本的采集順序,當(dāng)使用多種試管時的采集順序:血培養(yǎng)瓶不含添加劑的試管凝血管含添加劑的其他試管血培養(yǎng)→紅頭管→淺藍(lán)頭管→金黃頭管→黑色→綠頭管→紫頭管→灰頭管等。,采血順序,,,,,,,各類真空標(biāo)本管的應(yīng)用,空腹采血,提前告知病人禁食,特殊類采血應(yīng)告知病人注意事項(xiàng)。生化指標(biāo)禁食8-12小時后空腹采血,血脂禁食12-14小時后采血,血沉在早上10點(diǎn)前采血。根據(jù)目的選擇標(biāo)本容器,并計(jì)算所需采血量,填寫患
6、者相關(guān)信息全血標(biāo)本試管加有抗凝劑,輕、慢、上下顛倒混勻6—8次肘部采血不能拍打患者前臂,結(jié)扎止血帶時間少于1分鐘血培養(yǎng)標(biāo)本防止污染嚴(yán)禁在輸液、輸血肢體上抽取血標(biāo)本,乳腺切除術(shù)后患者應(yīng)在手術(shù)對側(cè)手臂采血及時送檢,送檢途中禁忌過分震蕩,采血注意事項(xiàng),血培養(yǎng)概念:,????,采集患者的血液或無菌體液標(biāo)本,送至微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)檢測.檢測原本無菌的血液及體液中是否有細(xì)菌存在.如有細(xì)菌,則極有
7、可能為致病的細(xì)菌.進(jìn)一步進(jìn)行鑒定/藥敏試驗(yàn).,血培養(yǎng)存在的主要問題:,?????,采血時機(jī)不合適采血套數(shù)不夠采血量不足只做需氧培養(yǎng),不同時做厭氧培養(yǎng)采血前或采血時正在使用抗生素治療,血培養(yǎng)存在的主要問題,,?如果皮膚定植的細(xì)菌沒有被殺死,這些細(xì)菌將通過針頭被吸入血培養(yǎng)瓶并在 瓶中生長?這些細(xì)菌(主要為凝固酶陰性葡萄球菌)引起導(dǎo)管相關(guān)性敗血癥
8、 (住院患者血培 養(yǎng)第一位)?醫(yī)生不能將真的凝固酶葡萄球菌感染和皮膚定植菌“污染”相區(qū)分,因此他們用萬古霉素治療患者,,,,,,,,,,,皮膚不是無菌的;定植細(xì)菌“污染”血培養(yǎng),,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,皮膚凝固酶陰性葡萄球菌定植于輸液管,“只有在發(fā)熱時,才需要進(jìn)行血培養(yǎng)?!?————關(guān)于血培養(yǎng)指征,想采就
9、采,血培養(yǎng)的指征,??,當(dāng)懷疑血流感染或膿毒癥時,應(yīng)常規(guī)行血培養(yǎng)懷疑患者有血流感染的癥狀有:? 不明原因的發(fā)燒(>38℃)或體溫過低(<36℃),??,白細(xì)胞增多( >10,000/L),粒細(xì)胞減少( <1,000/L)休克,寒顫,僵直,? 嚴(yán)重的局部感染(腦膜炎,心內(nèi)膜炎,肺炎,腎盂腎炎,腹部術(shù)后感染,…),??,心率異常加快、低血壓或高血壓,“何時采血進(jìn)行血培養(yǎng),有無特殊時間要求?!?—
10、——關(guān)于采血時機(jī),ST!,盡可能在出現(xiàn)畏冷、寒戰(zhàn)時立即采血,盡可能在使用抗生素前,先立即采血,ST!,采集血培養(yǎng)的最佳時間?,“為減輕患者痛苦,只從一個,穿刺部位采一份血液標(biāo)本即可。”,———關(guān)于采血套數(shù)及部位,基本概念,? 成人“一套”,血培養(yǎng)應(yīng)該包括需氧瓶和,厭氧瓶各一個,也叫“一份” 注意:一次穿刺采血,算“一套”,采集第二套應(yīng)從另一個穿刺點(diǎn)獲得。?兒童一般只做需氧培養(yǎng),但仍需從多個部位采集多次。特殊患者才考
11、慮厭氧培養(yǎng)。,研究表明,當(dāng)每套血培養(yǎng)采血20ml時一套檢出率:73.2%二套檢出率:93.9%三套檢出率:96.9%目前指南推薦采集2~3套血培養(yǎng),血培養(yǎng)采血量、份數(shù)與陽性率,采集兩套血培養(yǎng)(CLSI),從兩個獨(dú)立的皮膚位點(diǎn)采血,每瓶采集10ml,最好在5分鐘內(nèi)采集。,“患者靜脈中插有導(dǎo)管,可直接從,導(dǎo)管采血?!?———關(guān)于采血部位,推薦從外周靜脈采集血液標(biāo)本。不推薦動脈血,因其診斷價值沒有比靜脈血更大。不推薦靜脈留置
12、導(dǎo)管,因其常伴有高污染率。如果必須從留置導(dǎo)管內(nèi)采血,也應(yīng)同時從外周靜脈采集另外一個血培養(yǎng)標(biāo)本以幫助陽性結(jié)果的判斷。,采集部位,“每瓶采集多少血液有無特殊要求?!?——— 關(guān)于采血量,關(guān)于采集血液量,采血量是影響最佳靈敏度最關(guān)鍵因素成人一份標(biāo)本 2 個培養(yǎng)瓶(需氧+厭氧),每瓶8-10ml,共20ml;要求至少采兩份標(biāo)本,即40ml。兒童一般只需采集需氧瓶,在保證采集血量<1%總血量下,一般為1-3ml。采血量不足時應(yīng)優(yōu)
13、先保證需氧瓶,因臨床90%以上的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染。,———關(guān)于皮膚及培養(yǎng)瓶消毒,皮膚消毒程序:,? 推薦使用碘酊、洗必泰或碘,伏作為皮膚消毒劑。,? 碘酊作用1min,? 碘伏作用1.5-2min,? 洗必泰作用時間與碘酊一樣(但不能用于少于2個月嬰兒皮膚消毒),培養(yǎng)瓶的消毒程序:,1.去掉培養(yǎng)瓶口的塑料瓶蓋。,2.75%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子60秒。,3.自然待干。,4.將標(biāo)本注入培養(yǎng)瓶內(nèi)。
14、,5. 顛倒混勻標(biāo)本與肉湯,以避免血液,凝集。,“培養(yǎng)瓶未使用時,需要冷藏或冷,凍?!?———關(guān)于培養(yǎng)瓶的儲存溫度,不需冷藏,更不能冷凍。保存在15-25℃的室溫即可,溫度過低會導(dǎo)致對溫度敏感的耐瑟氏菌等死亡。,關(guān)于未用培養(yǎng)瓶儲存溫度,采集后的血培養(yǎng)瓶應(yīng)在1小時之內(nèi)送往實(shí)驗(yàn)室。血培養(yǎng)瓶在采血接種后在室溫不超過4小時。,血培養(yǎng)標(biāo)本的運(yùn)送,目的:常用于血液氣體分析部位:橈動脈 穿刺點(diǎn)位于前臂掌側(cè)腕關(guān)節(jié)上2cm,
15、動脈搏動明顯處股動脈 腹股溝動脈搏動最明顯處,動脈血標(biāo)本采集,注意事項(xiàng):1、采血前了解病人診斷,經(jīng)血傳染的傳染病患者操作人員做好隔離防護(hù)措施。2、采血前做好解釋工作,活動后喘氣明顯者應(yīng)休息15-30分,避免緊張、恐懼、活動時采血,否則影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。3、吸痰后20分鐘方可采集血?dú)鈽?biāo)本。4、嚴(yán)格無菌技術(shù)操作,以防感染。,動脈血標(biāo)本采集,二、尿標(biāo)本采集,尿標(biāo)本采集一般原則 1.應(yīng)采集晨起第一次尿。2.原則上應(yīng)選在抗
16、菌藥物應(yīng)用之前。3.連續(xù)多次送檢可提高陽性檢出率及確診率。4.注意避免消毒劑污染標(biāo)本 5.30分鐘內(nèi)不能立即送檢者,可暫存4℃冰箱,但保存不超過8h。6.女性在月經(jīng)期不宜留取尿標(biāo)本。,尿液標(biāo)本采集法,三種尿液標(biāo)本采集區(qū)別,尿培養(yǎng)標(biāo)本,???,清潔中段尿?qū)蚬軐?dǎo)尿經(jīng)恥骨上皮膚穿刺采集膀胱內(nèi)尿液,清潔中段尿液,棄去前段尿液,以沖刷尿道口的細(xì)菌,留取中段尿約10 ~ 20ml直接排入專用的無菌容器中,
17、立即送檢。疑為尿道炎時,可收集最初的3~4ml尿。詳細(xì)告知病人以下操作步驟:女性病人收集標(biāo)本前用清洗液沖洗干凈,從前向后仔細(xì)擦洗尿道區(qū)域分開陰唇,開始排尿排出幾毫升后,不停止尿流,采集中段尿。男性病人回縮包皮并清洗龜頭排出幾毫升后,不停止尿流,采集中段尿。,導(dǎo)尿管尿液,????,集尿袋內(nèi)的尿液不能用作培養(yǎng);導(dǎo)尿管末端的尿液也不能用于培養(yǎng),因?yàn)楹茈y避免沒有尿道菌群污染。
18、留置導(dǎo)管尿液標(biāo)本常通過專門的采樣端口采集,不能把導(dǎo)尿管與尿袋拔開后收集尿液。采樣端口用酒精消毒;必要時,可先夾住導(dǎo)尿管但不能超過30分鐘;將注射器針頭插入采樣端口,抽吸出尿液;注入無菌杯或試管中,恥骨上穿刺吸取尿液,????,常用于患兒、泌尿道厭氧菌感染或脊柱損傷病人等。可避免尿道或會陰細(xì)菌的污染,但對膀胱內(nèi)少量尿液的小兒難以實(shí)施。方法:消毒
19、自臍以下至尿道之間區(qū)域的皮膚,局麻穿刺點(diǎn)部位;在恥骨聯(lián)合與臍連線上,高于恥骨聯(lián)合2cm處進(jìn)針刺入膀胱;取20ml尿液;置于無菌容器中并送往實(shí)驗(yàn)室??捎糜趨捬蹙鷻z測,三、大便標(biāo)本采集,,1.采集時間:腹瀉患者應(yīng)在用藥前、急性期采集;沙門菌感染、腸熱癥應(yīng)在2周內(nèi)采集;厭氧菌出現(xiàn)癥狀立即采集。2.采集方法:①直腸拭子法:用無菌拭子蘸生理鹽水濕潤,由肛門插入約 6~7cm,輕輕在直腸內(nèi)旋動取出大便少許,放入無菌便盒中,加蓋
20、封口送檢。②自然排便者可用小木棒挑取有膿血和黏液的部位的糞便2-3克,如液狀糞便取絮狀物盛于無菌的、密封的、不吸水的、容器內(nèi)或直接盛于增菌液或保存液中。,大便標(biāo)本采集規(guī)范(1),3.注意事項(xiàng):雖然糞便標(biāo)本本身含很多細(xì)菌但也要用無菌容器,不可混入尿液,采集時挑取粘液或膿血部分。在患者病情許可的條件下應(yīng)在用藥前采集標(biāo)本。厭氧細(xì)菌(難辯梭菌)培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)盡量減少與空氣接觸。,大便標(biāo)本采集規(guī)范(2),做便隱血實(shí)驗(yàn):檢查前三天禁食肉類、肝
21、類、血類及大量綠葉素的食物,禁服鐵劑,如已食用應(yīng)三天后留取標(biāo)本送檢。檢查阿米巴原蟲應(yīng)在采集前將容器加溫、便后立即送檢。檢查繞蟲卵應(yīng)取透明薄膜紙于夜晚12時左右或清晨,排便前由肛門口周圍拭取,并立即送檢。,大便培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范(2),四、痰標(biāo)本采集,??,唾液中口咽部定植菌的濃度可達(dá)108-109/ml。研究顯示,國內(nèi)常規(guī)痰標(biāo)本中約半數(shù)存在唾液嚴(yán)重污染現(xiàn)象。,咳痰途經(jīng)口咽部不可避免地受到污
22、染,我國痰細(xì)菌培養(yǎng)現(xiàn)狀,? 標(biāo)本送檢率低,? 苛養(yǎng)菌檢出率極低? 結(jié)果重復(fù)性差? 報(bào)告速度慢,? 感染菌與污染菌不易區(qū)分,? 藥敏結(jié)果與治療反應(yīng)存在差距,醫(yī)師或護(hù)士直視下采集標(biāo)本自然采集法 患者清晨起床后,用清水充分漱口后,用力自氣管深部咳出第一口痰,不可混入唾液、漱口液,鼻涕等。霧化采集法 對于無痰或少痰患者,可霧化吸入45℃的10% NaCl水溶液。支氣管鏡采集法 培養(yǎng)結(jié)果可靠,,痰標(biāo)本采集,24h痰標(biāo)
23、本采集 晨起漱口后第一口痰至次晨漱口后第一口痰止臨床上約半數(shù)咳痰標(biāo)本不合格!,,痰標(biāo)本采集,采集痰標(biāo)本注意事項(xiàng),???????,在抗生素使用前采集痰標(biāo)本;標(biāo)本采集后1~2h內(nèi)必須立即進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室處理咳痰標(biāo)本應(yīng)用最早且廣泛,但也是最受爭議的標(biāo)本取標(biāo)本前應(yīng)摘去牙托,清潔口腔如刷牙和漱口深咳,采集標(biāo)本過程中要有專業(yè)的醫(yī)務(wù)人員指導(dǎo)無痰可用10%NaCl 5ml霧吸約
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