乳腺癌動(dòng)物模型的研究現(xiàn)狀

1、,乳腺癌動(dòng)物模型 研究現(xiàn)狀,,乳腺癌動(dòng)物模型是研究乳腺癌生物學(xué)行為及進(jìn)行實(shí)驗(yàn)治療的重要工具之一。根據(jù)乳腺癌模型建立方法不同，可分為自發(fā)性、誘發(fā)性、移植性和轉(zhuǎn)基因性四類(lèi)，所用的動(dòng)物為大鼠或小鼠。,自發(fā)性乳腺癌模型,自發(fā)性乳腺癌的鼠模是最早被人類(lèi)使 用的乳腺癌動(dòng)物模型。已有將近100年的 歷史。最早的研究者Little等通過(guò)小鼠選擇 性的近交，發(fā)現(xiàn)了許多有著“自發(fā)性” 的乳 腺癌特性的小鼠。 Heppner

2、 GH et al. Nontransgenic models of breast cancer. Breast Cancer Res.2000.9;2(5):331-4,,現(xiàn)在常用的辦法是，在取得自發(fā)性乳腺癌鼠模后，取瘤組織進(jìn)行鼠間傳代，其形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)、病理分子生物學(xué)及遺傳學(xué)均有類(lèi)似人乳腺癌的生物學(xué)的特性，經(jīng)鼠間原位移植各代生物學(xué)性能穩(wěn)定。,,天津市腫瘤醫(yī)院腫瘤研究所實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤室，99年8月l7日發(fā)現(xiàn)一只繁育263日齡雌性TA

3、Ⅱ系小鼠左下腹自發(fā)乳腺腫物，伴呼吸困難。在無(wú)菌條件下處死荷瘤鼠，見(jiàn)肺部小結(jié)節(jié)，取肺轉(zhuǎn)移瘤結(jié)節(jié)，按常規(guī)制成2mm小塊，分別移植于5只8月齡同系雌性小鼠左下腹乳腺區(qū)域，移植后第5天，5只小鼠移植區(qū)出現(xiàn)瘤結(jié)，除1只荷瘤鼠作為鼠間傳代外，余4只荷瘤鼠第68天觀察發(fā)現(xiàn)有3只伴發(fā)肺轉(zhuǎn)移。病理診斷：乳腺癌A型伴肺轉(zhuǎn)移。,,以后鼠間移植均用原位移植瘤組織進(jìn)行連續(xù)傳代，移植瘤同原發(fā)瘤形態(tài)學(xué)特征，命名為BCML—TAⅡ99。 目前BCML—TAⅡ99

4、已傳至第35代，移植成活率為100％(190／190)，原位移植荷瘤鼠晚期只有肺轉(zhuǎn)移之特性(55．47％．76／137)。 孫慧等。我院發(fā)現(xiàn)并建立近交系TAⅡ鼠乳腺癌肺轉(zhuǎn)移原位模型.中國(guó)腫瘤臨床.2019,28(10):799,,自發(fā)性的腫瘤通常比用實(shí)驗(yàn)方法誘發(fā)的腫瘤與人類(lèi)所患的腫瘤更為相似，有利于將動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果用到人。 但腫瘤發(fā)生情況可能參差不齊，不可能在短時(shí)間內(nèi)獲得大量腫瘤學(xué)材料。 吳細(xì)丕等。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

5、與腫瘤研究 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社。2000.4,誘發(fā)性乳腺癌模型,以化學(xué)致癌物刺激使大鼠產(chǎn)生乳腺癌的方法，被廣泛地運(yùn)用于有關(guān)影響乳腺癌病程發(fā)展因素的假設(shè)檢驗(yàn)及疾病防治的研究中，二甲基苯蒽（DMBA）是最常用的化學(xué)致癌物。 Heppner GH et al. Nontransgenic models of breast cancer. Breast Cancer Res.2000.9;2(5):331-4,,張毅等用健康雌性W

6、ister大鼠30只,50~60天齡,體重90~110g, 以二甲基苯蒽10mg/100g體重右臀部注射,復(fù)制大鼠同時(shí)性乳腺癌與纖維肉瘤動(dòng)物模型。24周后取腫瘤及瘤旁組織標(biāo)本。以組織學(xué)觀察乳腺腫瘤均為乳腺癌,與人乳腺癌相似,右后肢腫瘤均為纖維肉瘤,與人纖維肉瘤相似。 張毅等。DMBA誘導(dǎo)大鼠乳腺癌與纖維肉瘤中cyclin D1及p53蛋白的表達(dá)及其意義。中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志。2019.9；8(5)：285－287,

7、,張毅等又以同樣的實(shí)驗(yàn)方法，探討聯(lián)合應(yīng)用三苯氧胺及全反式維甲酸對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠乳腺癌發(fā)生促進(jìn)期的化學(xué)預(yù)防作用。利用DMBA誘導(dǎo)大鼠乳腺癌發(fā)生。在給藥后第8周應(yīng)用三苯氧胺(TAM)和全反式維甲酸(RA)。在第24周觀察大鼠乳腺腫瘤發(fā)生情況及乳腺發(fā)育情況。結(jié)果 對(duì)照組大鼠乳腺癌發(fā)生率為70—58％；TAM組與RA組發(fā)生率分別為22.02％和15．79％，明顯低于對(duì)照組； TAM + RA 組無(wú)乳腺腫瘤發(fā)生。 張毅等。三苯氧胺聯(lián)

8、合全反式維甲酸對(duì)大鼠乳腺癌的預(yù)防作用 。第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)。 2019.8； 23(8):910-912,,林輝等進(jìn)行槲皮素抑制乳腺癌發(fā)生及增殖的實(shí)驗(yàn)研究。將79只SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)5天后隨機(jī)分為4組 ： A組（DMBA）、B組（DMBA+TAM）、C組（DMBA+槲皮素）、D組（空白對(duì)照）。 28周后, A組乳腺癌發(fā)生率為76.2%,明顯高于B組和C組。,,各組大鼠乳腺癌發(fā)生情況 組別 n 發(fā)生乳腺癌的

9、動(dòng)物數(shù) 乳腺癌發(fā)生率（%） A 21 16 76.2* B 22 9 40.9 C 22 10 4

10、5.5 D 10 0 0 與B、C組比較 *P<0.05 林輝等。槲皮素抑制乳腺癌發(fā)生及增殖的實(shí)驗(yàn)研究。中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志。2019.9.8(5):288-

11、291,,,,,楊筍等研究去氫表雄酮抗始發(fā)突變的作用，取21天齡剛離乳的雌性大白鼠60只，隨機(jī)分為四組，每組15只，持續(xù)給藥12周，第3周將DMBA(溶于花生油中)以70mg／kg劑量灌胃給藥攻擊。對(duì)照組SD雌性大鼠自口服DMBA后的第8周起，開(kāi)始發(fā)生乳腺腫瘤，此后腫瘤誘發(fā)率、每只大鼠荷瘤數(shù)及荷瘤體積均呈逐漸上升起勢(shì)，至第15周實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對(duì)照組腫瘤誘發(fā)率為73．0％。 楊筍等.去氫表雄酮抗始發(fā)突變作用的研究. 中華腫瘤

12、雜志。2019.3.24(2):137-140,,總之誘發(fā)性乳腺癌模型操作簡(jiǎn)單，已使用多年。 但致癌的誘癌過(guò)程需要較長(zhǎng)的時(shí)間，成功率多數(shù)達(dá)不到100％，且常誘發(fā)多部位腫瘤，故不常用于藥物篩選。,移植性乳腺癌模型,60年代，先天性免疫缺失的裸鼠的出現(xiàn)為異種移植模型提供了良好的條件。人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7,SHZ-88等相應(yīng)荷瘤鼠模型的建立，為研究人乳腺腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)性狀、抗腫瘤藥物的篩選及作用機(jī)理的研究提供了可靠

13、的研究基礎(chǔ)。 Heppner GH et al. Nontransgenic models of breast cancer. Breast Cancer Res.2000.9;2(5):331-4,,甄林林等用激素受體陽(yáng)性的MCF-7人乳腺癌細(xì)胞株，接種于20只裸小鼠右側(cè)胸壁乳墊下，腫瘤移植成功率（成瘤率）為95％，病理學(xué)檢查為浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌。該方法建立的人乳腺癌裸鼠移植模型，成功率高，腫瘤可部分保持人乳腺癌生物學(xué)

14、特性。 甄林林等。人乳腺癌裸鼠移植模型的建立。南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)。 2019.11；21(6)：509-510,,孫慧等將人乳腺癌細(xì)胞系MCF-7培養(yǎng)后的細(xì)胞懸液于SCID鼠下腹左側(cè)乳腺原位皮下注射，待腫瘤長(zhǎng)至1cm3時(shí)，行SCID鼠間原位傳代。后取鼠間傳第三代原位移植瘤組織，無(wú)菌剪切成1mm3左右小塊，分別移植于10只小鼠下腹左乳腺區(qū)域。初代細(xì)胞懸液接種5天后可見(jiàn)腫瘤生長(zhǎng)，第2－5代行組織塊接種，3天后

15、可見(jiàn)腫瘤生長(zhǎng)，共計(jì)鼠間傳代5次，成瘤率100％。最長(zhǎng)荷瘤鼠生存時(shí)間60天。 孫慧等。人乳腺癌細(xì)胞系MCF-7原位移植血管生成超微結(jié)構(gòu)觀察及相關(guān)因子表達(dá)。 中國(guó)腫瘤臨床。2019.5.20;28(5):368-371,,劉勝等研究溫腎活血中藥對(duì)體內(nèi)移植瘤的影響作用。選用BALB/c裸小鼠，雌性，將MCF—7細(xì)胞5×107接種于BALC/c裸小鼠皮下，建成人乳腺癌MCF—7裸小鼠移植瘤。連續(xù)傳3代后，取生長(zhǎng)旺

16、盛期的瘤組織剪塊，無(wú)菌條件下接種于裸小鼠右側(cè)腋窩皮下。接種后24h隨機(jī)分籠。溫腎活血法組按高、中、低劑量每日灌胃給藥，陽(yáng)性對(duì)照CTX組隔天腹腔給藥，空白對(duì)照組口服給等量生理鹽水。3周后處死動(dòng)物，計(jì)算各組平均瘤重。 劉勝等. 溫腎活血法中藥對(duì)人乳腺癌MCF—7細(xì)胞株體內(nèi)外生長(zhǎng)的影響。 中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志。 2019；7(1):54-57,,王烈等將乳腺癌細(xì)胞SHZ-88培養(yǎng)擴(kuò)增后，以5×106細(xì)胞

17、數(shù)接種于SD大鼠右腋皮下，2周后腫瘤平均直徑達(dá)0.9±0.3cm,以此模型來(lái)研究乳腺癌的基因治療。 王烈等。HSV-TK,B7聯(lián)合基因治療誘發(fā)乳腺癌細(xì)胞調(diào)亡及增強(qiáng)免疫作用的觀察。中華實(shí)驗(yàn)外科雜志。2000.07.08；17（4）：326－327）,,華西醫(yī)科大學(xué)白紹槐等，將2019年1月獲得的一例乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者的原發(fā)腫瘤和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)，移植于BALB/c-nu/nu裸小鼠胸部乳墊下，31天

18、后在局部出現(xiàn)腫瘤結(jié)節(jié)，并逐漸長(zhǎng)大，以后進(jìn)行鼠間傳代移植，移植成功率100％，腫瘤保持了原先的生物學(xué)特性。 白紹槐等。人乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌裸鼠移植模型的建立。 華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)。2019；30（2）：220,,陳大富等將F35代人乳腺侵潤(rùn)性導(dǎo)管癌-癌塊分成4－6mm3大小，分別接種于16只裸鼠右腋乳墊下，接種55天后，腫瘤大小為2700±872 mm3，平均瘤重達(dá)1.25±0.24g。

19、 陳大富等。人參皂甙Rg3與化療藥物聯(lián)合應(yīng)用時(shí)對(duì)裸鼠原位種植人乳腺癌的影響。中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志。2019.9；9（5）：301－303,,邵志敏等建立了炎性乳腺癌移植腫瘤模型。他們將經(jīng)病理診斷證實(shí)的女性炎性乳腺癌標(biāo)本移植至雌性裸鼠（BALB/c）皮下，當(dāng)移植腫瘤直徑長(zhǎng)至1cm時(shí)進(jìn)行傳代移植，迄今已成功傳了10代。并證實(shí)該動(dòng)物模型表現(xiàn)為人類(lèi)炎性乳腺癌的生物學(xué)特征，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)該腫瘤動(dòng)物模型有肺部的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。 此動(dòng)物模型為研究腫瘤

20、轉(zhuǎn)移機(jī)制提供了很好的研究模型。 邵志敏等。 人類(lèi)炎性乳腺癌移植腫瘤裸鼠動(dòng)物模型的建立和生物學(xué)特性的研究。 中華外科雜志。2019.10;39(10):796-798,轉(zhuǎn)基因乳腺癌模型,轉(zhuǎn)基因技術(shù)促使了轉(zhuǎn)基因乳腺癌鼠模的出現(xiàn)。在國(guó)內(nèi)，此種方法 還剛剛起步。,,孫強(qiáng)等用引種的MMTV-Wnt-1陽(yáng)性雄鼠，目的基因?yàn)殡s合子（M/+）與正常雌性FVB(+/+)配種，即每一代都是同背景品系的回交。得到MMTV-Wnt-

21、1轉(zhuǎn)基因小鼠，最早從7周齡開(kāi)始出現(xiàn)乳腺瘤。將瘤組織移植裸鼠后，腫瘤可在裸鼠皮下生長(zhǎng)，移植腫瘤病理學(xué)形態(tài)與原發(fā)瘤一致，未出現(xiàn)轉(zhuǎn)移。從而認(rèn)為MMTV-Wnt-1轉(zhuǎn)基因小鼠可穩(wěn)定自發(fā)乳腺腫瘤，可作為研究乳腺癌動(dòng)物模型。 孫強(qiáng)等。MMTV-Wnt-1轉(zhuǎn)基因小鼠作為高發(fā)乳腺癌動(dòng)物模型的觀察 中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)。2019.9；10（3）,,所有的這些模型都有其優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。由于人類(lèi)發(fā)