出凝血疾病的檢測(cè)

1、中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液病醫(yī)院臨床檢測(cè)中心止血血栓室 孫海燕,出凝血疾病的檢測(cè),生理性止血,,血管損傷,血管收縮,血管內(nèi)皮下組織,5-HT、TXA2等,血凝塊形成與維持,纖維蛋白網(wǎng),加固,血小板血栓,抗凝系統(tǒng),纖溶系統(tǒng),XII,XIIa,XI,,XIa,IX,IXa,X,Xa,II,IIa,I,Is,Ii,XIII,XIIIa,VII,VIIa,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,VIII,VIIIa,,,,,TF +Ca2+,,,前

2、激肽釋放酶,激肽釋放酶,,,,,丟失不引起出血,Va,V,,,,,,Ca2+,PL,,,,,HMW-K,PL,凝血瀑布,凝血因子活性測(cè)定,,,,凝血因子活性測(cè)定,原理：凝血因子活性是通過其糾正乏該因子血漿所致的凝固時(shí)間延長(zhǎng)的能力而測(cè)得的。梯度稀釋已知凝血因子活性的血漿（標(biāo)準(zhǔn)品），與乏該因子的血漿混合，然后做APTT或PT測(cè)定，建立參考曲線。受檢者血漿與乏該因子的基質(zhì)血漿混合，測(cè)其APTT后PT值，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線可計(jì)算其凝血因子的活性。

3、因子缺乏或者假性降低：3個(gè)濃度當(dāng)存在狼瘡抗凝物等非特異性抗體時(shí)，凝血因子活性測(cè)定呈現(xiàn)稀釋效應(yīng),凝血因子活性測(cè)定,,VIII因子抑制物定量：489 Bethesda,糾正試驗(yàn),狼瘡抗凝物實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn),延長(zhǎng)的磷脂依賴的凝固時(shí)間：APTT、DRVVT、SCT、dPT等抑制的證據(jù)：糾正試驗(yàn)延長(zhǎng)是磷脂依賴的：DRVVT（或SCT）證實(shí)試驗(yàn)、PNP等除外其他的循環(huán)抗凝物：因子特異性抗體、DTI、肝素、華法令等補(bǔ)充檢測(cè)：抗心磷脂抗體、抗

4、β2糖蛋白1抗體,*ISTH LA-SSC, 1995 (TH 74:1185) & 2009 (JTH 7:1737-40); CLSI H-60A (2014),DRVVT （或SCT）,DRVVT Screen,RVV,PL (restricted),肝素中和劑,DRVVT Comfirm,RVV,Excess PL,肝素中和劑,陽(yáng)性：DRVVTScreen/DRVVT Comfirm > 1.2,,,未稀釋,1:1

5、,1:2,1:4,1:8,0.2ml咪唑,0.2ml咪唑,0.2ml咪唑,0.2ml咪唑,取0.2ml+0.2mlNPP,37℃孵育2小時(shí),0.2mlNPP+0.2ml咪唑,檢測(cè)因子活性,計(jì)算滴度,患者血漿,Bethesda Assay操作步驟,因子活性測(cè)定,抑制物滴度,凝血四項(xiàng),遺傳性缺乏,獲得性缺乏,血友病甲、血友病乙等,肝病、vitk缺乏、華法令治療、DIC等,因子特異性抗體,狼瘡抗凝物,一期止血,一期止血,血小板實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),

6、數(shù)量：血小板計(jì)數(shù)、外周血涂片功能：PFA-100（PFA-200）、血小板聚集試驗(yàn)其他：血小板膜糖蛋白受體、電鏡等,PFA-100（200）,PFA-100（200）結(jié)果解釋,,血小板聚集試驗(yàn),血小板與血小板之間相互粘附過程。是形成血小板血栓的基礎(chǔ)，也是血小板進(jìn)一步活化和參與二期止血、促進(jìn)血液凝固的保證。血小板聚集的要素GPIIb/IIIa ，F(xiàn)g，Ca2+誘導(dǎo)劑高切變率的條件下,vWF與Fn也參與血小板聚集,21,22,,

7、血小板聚集試驗(yàn)在遺傳性血小板疾病中的表現(xiàn),+正常，++增強(qiáng)，±反應(yīng)減弱，-缺乏反應(yīng)，v差別大，Ο缺乏第二相聚集,血管性血友?。╲WD）實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),vWF抗原檢測(cè)：vWF:AgvWF活性檢測(cè)：vWF:RCo，vWF:Act凝血因子VIII活性檢測(cè)：FVIII:C瑞斯托霉素（及小劑量）誘導(dǎo)血小板聚集vWF多聚體分析vWF與膠原結(jié)合力：vWF：CB,血管性血友?。╲WD）分型,1型：vWF部分缺失3型：vWF完全缺失2

8、型：2A：選擇性高中分子量vWF多聚體缺失 2B：功能獲得型突變導(dǎo)致vWF與血小板親和力增加，高分子量vWF多聚體被清除及輕度血小板減少 2M：功能缺失型突變導(dǎo)致vWF與血小板GPIb結(jié)合力降低 2N：vWF與VIII結(jié)合力降低，導(dǎo)致VIII被清除,vWD的實(shí)驗(yàn)室分型診斷,抗凝系統(tǒng)與纖溶系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),抗凝蛋白檢測(cè)： 抗凝血酶III活性

9、測(cè)定（ATIII） 蛋白C活性測(cè)定（PC） 蛋白S活性測(cè)定（游離）（PS free）纖溶系統(tǒng)： 纖溶酶原 tPA PAI-1 D-dimer FDP,易栓癥,遺傳性：1、抗凝蛋白缺陷：ATIII、PC、PS2、凝血因子缺陷：FV Leiden/FII 20210A、異常纖維蛋白原血癥3、纖溶蛋白缺陷：纖溶酶原、tPA缺乏、PAI-1增加4、代謝缺陷：高同型半胱氨酸血癥獲得性惡性腫瘤

10、、APS、肝病、腎病、凝血因子增加、創(chuàng)傷及圍手術(shù)期、妊娠、制動(dòng)、經(jīng)濟(jì)艙綜合征、避孕藥、老齡等等,D-Dimer,對(duì)VTE的陰性排除價(jià)值增高：老年、新生兒、妊娠、感染、腫瘤、手術(shù)、創(chuàng)傷、DIC、VTE、外周動(dòng)脈病變、溶血、出血、抗血栓治療、肝腎疾病等,我室的出凝血檢測(cè)項(xiàng)目匯總,,基因檢測(cè),,分析前因素對(duì)結(jié)果的影響,出凝血檢測(cè)的保存條件及間隔（推薦）,整合報(bào)告,檢測(cè)科室的職能,檢測(cè)樣本保證結(jié)果的準(zhǔn)確性提供有臨床價(jià)值的結(jié)果為臨床提供必

11、要的咨詢，正確解釋結(jié)果，最大限度提供可利用的信息,,整合報(bào)告,兩種方式：由醫(yī)師決定患者的檢測(cè)項(xiàng)目，我們將患者的所有報(bào)告整合，就所有的結(jié)果做出條理性的解釋，闡明其中異常結(jié)果的意義，可能會(huì)做出診斷性的結(jié)論，或者因?yàn)閷?duì)病史了解的局限性只能提出可能性的因素供臨床結(jié)合患者實(shí)際情況矯正，比如用藥史，家族史等我們將不同的疾病整合幾種不同的檢查項(xiàng)目套餐，臨床只需根據(jù)患者的情況挑選其中一種套餐，我們根據(jù)該患者的實(shí)際檢查結(jié)果情況決定接下來做何種檢測(cè)項(xiàng)目