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文檔簡介
1、當(dāng)前抗生素在畜牧業(yè)的合理使用問題是一個熱門話題??股貫E用的主要危害是會導(dǎo)致耐藥菌或稱超級菌在環(huán)境中比例的增加,而目前抗生素是保障人類健康不可替代的重要藥物,所以環(huán)境中耐藥菌或超級菌的產(chǎn)生會對人類健康帶來嚴(yán)重的威脅。歐盟和美國等發(fā)達國家近年都制定了限制抗生素在畜牧業(yè)中使用的相關(guān)制度或法規(guī)。
在我國養(yǎng)豬生產(chǎn)中,抗生素的使用主要是作為促生長劑和疾病治療與預(yù)防控制兩個方面,生產(chǎn)中存在不合理使用抗生素的情況。在養(yǎng)豬生產(chǎn)中作為促生長劑添
2、加在飼料中的抗生素到底有多少效果,在法規(guī)限定的添加劑量內(nèi)各種抗生素如何配伍促生長效果最好?抗生素添加后對豬的糞便微生物會產(chǎn)生多大影響,對糞便中微生物的抗性基因是否有影響?這些都是當(dāng)前值得研究的重要課題。
四環(huán)素類抗生素作為廣譜抗生素對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性茵都有很強的抑制作用。由于其良好的抗菌活性和無明顯是毒副作用,被廣泛地用于畜牧生產(chǎn)中。金霉素作為其中重要的一員,也有良好的抗菌活性和促生長作用。早前的研究表明,金霉素能夠促
3、進仔豬生長,改善仔豬腸道的菌群結(jié)構(gòu),同時金霉素的長期使用也會使仔豬糞便微生物中四環(huán)素類抗性基因的豐度升高。本文主要探索作為促進生長作用的低劑量的金霉素(75ppm,低于治療劑量)添加及其與其他抗生素或中藥提取物的配伍添加對斷奶仔豬的生長性能和糞便微生物豐度與多樣性的影響,以及對糞便微生物中四環(huán)素類抗性基因的影響。
本試驗隨機選取400頭健康的35日齡斷奶仔豬(杜×長×大),隨機分為8組,每組3個重復(fù)(欄),每個重復(fù)(欄)16-
4、17頭仔豬。CT組:為對照組,飼喂基礎(chǔ)日糧(不添加任何抗生素);CTC組:添加75 mg/kg金霉素;BC組:添加40mg/kg桿菌肽鋅和20 mg/kg硫酸粘桿菌素;CBC組:添加75 mg/kg金霉素、40 mg/kg桿菌肽鋅和20 mg/kg硫酸粘桿菌素;CS組:添加75 mg/kg金霉素和50 mg/kg博落回提取物;CO組:添加75 mg/kg金霉素和100 mg/kg喹乙醇;COE組:75 mg/kg金霉素、100 mg/k
5、g喹乙醇和20 mg/kg恩拉霉素;COV組:75 mg/kg金霉素、100 mg/kg喹乙醇和15 mg/kg維吉尼亞霉素。試驗第28天,每組隨機選取15頭仔豬(共120頭)采集血液樣品,每組隨機選取9頭仔豬(共72頭)采集新鮮糞便樣品。試驗分為三部分:
1抗生素的添加對斷奶仔豬的生產(chǎn)性能和免疫指標(biāo)的影響
本試驗旨在研究低劑量的抗生素添加對斷奶仔豬生長性能(平均日增重ADG、平均日采食量ADFI和料重比F/G)和免
6、疫指標(biāo)(IgG、IgM、IgA、IL-12和IFN-γ)的影響。試驗結(jié)果表明,試驗豬群健康狀況良好,各組腹瀉率在0.05%-3.04%。抗生素的低劑量添加對仔豬腹瀉率無顯著影響(P>0.05),對斷奶仔豬的平均日增重、平均日采食量和料重比影響不顯著(P>0.05),其中CS組(金霉素和博落回提取物配伍)日增重最高,BC組(桿菌肽鋅和硫酸粘桿菌素配伍)最低,二者之間差異顯著(P<0.05)??股氐牡蛣┝刻砑咏档土藬嗄套胸i血清中多個免疫指
7、標(biāo)(IgG、IgM、IgA、IL-12和IFN-γ)的濃度(P<0.05),但都在正常值范圍內(nèi)??傊?,低劑量的抗生素添加對于斷奶仔豬的生長性能影響不顯著,卻降低了血清中的免疫球蛋白和細胞因子等多個免疫指標(biāo)的濃度,但均在正常值范圍內(nèi)。
2抗生素的添加對斷奶仔豬糞便微生物的種類和豐度的影響
本試驗利用16S rRNA高通量測序技術(shù)分析了不同抗生素配伍添加對仔豬糞便微生物的種類和豐度的影響。結(jié)果表明:在7個試驗組中,與對照
8、組相比,金霉素、喹乙醇與恩拉霉素,或金霉素、喹乙醇與維吉尼亞霉素霉素的配伍添加減少了的仔豬糞便微生物的多樣性(P<0.05),其余5個組的糞便微生物多樣性與對照組相比差異不顯著(P>0.05)。上述兩種抗生素配伍添加,在門水平上極顯著提高了擬桿菌門Bacteroidetes的豐度;在屬水平上極顯著提高了普氏菌屬Prevotella的豐度??傊股氐牡蛣┝颗湮樘砑訉嗄套胸i糞便微生物種類和豐度的影響有限,7個抗生素配伍添加組中只有2個
9、組對糞便微生物的多樣性有顯著影響。
3抗生素的添加對斷奶仔豬糞便微生物抗性基因的影響
本試驗利用熒光定量PCR技術(shù)分析了低劑量的抗生素添加對仔豬糞便微生物的四環(huán)素類抗性基因(TRGs)豐度的影響。結(jié)果顯示,本研究檢測的6種TRGs基因(tetA、tetC、tetL、tetO、tetW和tetX)的相對豐度在1.5×10-4到2.0×10-1之間。說明TRGs基因廣泛存在于豬糞便微生物中并有較高的背景豐度。與對照組相比
10、,28天的低劑量抗生素添加增加了大部分TRGs基因的豐度;與金霉素的單獨添加相比,金霉素與其他抗生素的配伍添加能夠有效地抑制部分TRGs基因豐度的升高??傊?,抗生素的低劑量配伍添加提高了斷奶仔豬糞便微生物抗性基因的豐度,但金霉素與其他抗生素合理的配伍添加可以抑制部分TRGs基因豐度的升高,起到保護環(huán)境的作用。
綜上所述,與對照組(不添加任何抗生素)相比,金霉紊及其與其他抗生紊或中藥提取物的低劑量(75ppm)配伍添加對斷奶仔豬
11、的生長性能影響不顯著,其中金霉素和博落回提取物組日增重最高,桿菌肽鋅和硫酸粘桿菌素最低,這二者差異顯著??股氐奶砑舆€降低了血清中的免疫球蛋白和細胞因子濃度,但都在正常值范圍內(nèi);抗生素的添加對糞便微生物的豐度與多樣性的影響有限,與對照組相比,7個試驗組中僅有2個組有顯著變化。28天低劑量的金霉素添加增加了斷奶仔豬糞便微生物中大部分四環(huán)素類抗性基因的豐度,但金霉素與其他抗生素合理的配伍添加可以抑制部分TRGs基因豐度的升高。這些結(jié)果提示,
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