糙皮側(cè)耳優(yōu)良雜交子篩選與側(cè)耳屬野生菌株馴化栽培研究.pdf

1、本試驗(yàn)以糙皮側(cè)耳（Pleurotus ostreatus）4個(gè)栽培菌株HP（華平特白）、PG30（平高30）、JG3（姬菇3號(hào)）、PG981（平菇981）為試驗(yàn)材料，采用單單雜交與雙單雜交兩種不同雜交方式獲得雜交子進(jìn)行育種試驗(yàn)，經(jīng)過(guò)秋栽和春栽篩選農(nóng)藝性狀優(yōu)良的雜交子。野外采集得到兩野生菌株子實(shí)體并進(jìn)行組織分離，基于ITS序列分析對(duì)兩野生菌株進(jìn)行鑒定，期望能馴化栽培出菇獲得新的種質(zhì)資源。
　　 以鎖狀聯(lián)合為遺傳標(biāo)記，利用原生質(zhì)體單

2、核化技術(shù)得到4個(gè)栽培菌株兩種不同交配型的單核體，用單單雜交與雙單雜交兩種不同雜交方式將4個(gè)栽培菌株之間相互進(jìn)行完全配對(duì)雜交，結(jié)合拮抗試驗(yàn)和ISSR分子標(biāo)記鑒定雜交子。運(yùn)用灰色關(guān)聯(lián)度法對(duì)供試菌株的8個(gè)農(nóng)藝性狀進(jìn)行綜合比較，結(jié)合鮮菇總產(chǎn)量鄧肯多重比較篩選雜交子?；贗TS序列構(gòu)建兩野生菌株的同源進(jìn)化樹(shù)，對(duì)兩野生菌株進(jìn)行鑒定。對(duì)未能出菇的張家界野生菌株利用原生質(zhì)體技術(shù)再生出雙核體，將再生雙核體萌發(fā)的雙核菌絲進(jìn)行馴化栽培出菇試驗(yàn)。
　　

3、 試驗(yàn)結(jié)果表明，華平特白、平高30、平菇981兩種交配型單核體的比例存在偏分離現(xiàn)象。4個(gè)供試菌株的8個(gè)單核體相互完全配對(duì)雜交，結(jié)合與雙親本的拮抗試驗(yàn)單單雜交配對(duì)得到13個(gè)雜交子。正反雙單雜交完全配對(duì)得到13個(gè)雜交子。運(yùn)用ISSR分子標(biāo)記對(duì)雜交子進(jìn)行了遺傳分析，從40個(gè)引物中篩選出5個(gè)條帶重復(fù)性好、譜帶清晰的引物，擴(kuò)增結(jié)果采用軟件NTSYS2.10e計(jì)算菌株間的遺傳相似系數(shù)，并進(jìn)行聚類(lèi)分析。聚類(lèi)結(jié)果顯示33個(gè)雜交子GS值變化范圍0.31～

4、0.94，進(jìn)一步驗(yàn)證了雙單雜交子的可靠性?；疑P(guān)聯(lián)度與鮮菇產(chǎn)量鄧肯多重比較結(jié)果確定了雜交菌株27號(hào)，26號(hào)、19號(hào)、37號(hào)，28號(hào)、30號(hào)等6個(gè)優(yōu)良雜交子，春季栽培觀察結(jié)果顯示該6個(gè)雜交菌株性狀表現(xiàn)穩(wěn)定。采用PCR產(chǎn)物克隆測(cè)序獲得兩野生菌株ITS序列，測(cè)序后與其相似系數(shù)最高的前10位菌株進(jìn)行同源性分析，鑒定出武當(dāng)山野生菌株為佛羅里達(dá)側(cè)耳，張家界野生菌株為鳳尾菇。
　　 上述研究表明單單雜交及雙單雜交均可獲得農(nóng)藝性狀優(yōu)于親本的雜交