小麥鄭9023新型儲(chǔ)藏蛋白基因avenin-likeb的克隆和原核表達(dá)分析.pdf

1、小麥品質(zhì)是小麥籽粒對(duì)其終用途的適合性,包括營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)和加工品質(zhì)兩方面。與國(guó)外相比，我國(guó)小麥的加工品質(zhì)還有差距，而人們對(duì)優(yōu)良加工品質(zhì)小麥的需求日益加大，因此小麥加工品質(zhì)改良仍然是目前小麥育種的重要目標(biāo)。小麥品質(zhì)改良最有效的途徑之一是發(fā)掘優(yōu)良品質(zhì)基因，并運(yùn)用常規(guī)雜交育種和轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育優(yōu)質(zhì)新品種。
　　 小麥Avenin-like基因是新近發(fā)現(xiàn)的一類(lèi)新型的種子儲(chǔ)藏蛋白基因，分為Avenin-like type a和Avenin-lik

2、e type b兩類(lèi)。目前還未見(jiàn)有關(guān)Avenin-like蛋白與小麥加工品質(zhì)關(guān)系的研究報(bào)道。本研究以小麥鄭9023為研究對(duì)象，分離 avenin-like b基因，進(jìn)行表達(dá)并制備該蛋白抗體，試圖分析Avenin-like b蛋白整合進(jìn)入面筋蛋白聚合體的依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：
　　 （1）從小麥鄭9023的基因組中克隆得到4個(gè)新型avenin-like b基因的ORF，長(zhǎng)度為855bp，編碼的蛋白含有19個(gè)半胱氨酸殘基，存在著典

3、型的“Cys-Cys”結(jié)構(gòu)域，前18個(gè)氨基酸為信號(hào)肽序列。
　　 （2）本課題成功構(gòu)建了avenin-like b基因的原核表達(dá)載體pET-32a-avelb，實(shí)現(xiàn)了Avenin-like b蛋白在大腸桿菌（Escherichia coli）BL21內(nèi)表達(dá)和該蛋白的親和純化過(guò)程。并將純化的Avenin-like b蛋白免疫兔子，制備了針對(duì)Avenin-like b蛋白的多克隆抗體。
　　 （3）用本研究制備的多克隆抗體，