2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩81頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、磷酸烯醇式丙酮酸/磷酸轉運子基因(Phosphoenolpyruvate/phosphate translocator1PPT1)是細胞質體碳水化合物轉運的一個關鍵基因,在植物莽草酸代謝和脂肪酸生物合成途徑中起著重要作用。根據(jù)模式植物擬南芥PEP轉運子AtPPT1基因序列與油菜數(shù)據(jù)庫BBSRC BrassicaDB中相應ESTs設計全長引物,以甘藍型油菜(Brassica napus)幼嫩葉片基因組DNA和種子cDNA為模板,克隆甘藍型

2、油菜PEP轉運子基因全長序列,命名為BnPPT1。該基因gDNA全長為2075bp,含有8個內(nèi)含子,編碼區(qū)長度為1224bp,編碼407個氨基酸。序列比對表明,BnPPT1與同屬于十字花科擬南芥AtPPT1轉運子同源性很高,僅有個別氨基酸的差異;進化分析結果進一步說明兩者近親緣關系。以BnPPT1全長cDNA為目標序列,構建組成性強啟動子CamV35S驅動的與報告基因eGFP融合的植物表達載體BPE,同時以-401bp的BnPPT1片斷

3、為靶片斷,構建CamV35S啟動子驅動的RNAi載體BPTi,通過花粉管浸泡法導入到擬南芥,進行融合蛋白亞細胞定位觀察以及功能表達驗證;亞細胞定位分析結果表明BnPP71基因編碼蛋白與ATPPT1蛋白一樣定位于細胞質體,且以BnPPT1基因部分cDNA片斷構建的RNAⅰ載體BPTⅰ的轉基因擬南芥表現(xiàn)出內(nèi)源基因AtPPT1的表達抑制,出現(xiàn)了明顯的低葉綠素表型,而BPE轉基因能完全恢復AtPPT1基因功能缺失擬南芥突變體表型。這些研究結果不

4、僅說明了BnPPT1基因與擬南芥AtPPT1基因高度同源,同時也表明兩者可能具有相同的生物學功能,由此推測在甘藍型油菜中,BnPPT1基因具有提供油脂/蛋白質生物合成的重要底物PEP這一十分重要的生物學作用。采用半定量RT-PCR分析表明,BnPPT1基因在油菜各器官中表達差異很大,在幼嫩的子葉、莖以及中早期發(fā)育時期種子中有較高豐度的表達,在種子中表達豐度隨發(fā)育時期逐步升高。但在成熟后期沒有表達,暗示該基因在油菜籽粒油份等物質積累中有重

5、要功能。因此,通過農(nóng)桿菌轉染油菜下胚軸的技術,將構建好的BPE載體導入了本研究室前期獲得高油份甘藍型油菜中,PCR檢測以及除草劑抗性篩選表明成功獲得了轉基因陽性株系32份;T0代單株套袋成熟種子油份以及脂肪酸成分的測定結果表明轉基因T0代植株油份分布出現(xiàn)類似正態(tài)分布的趨勢,與轉基因陰性對照相比,脂肪酸組分沒有明顯變化,而油份含量有所增高,最高增加了10.5個百分點。這些T0代植株出現(xiàn)類似正態(tài)分布的油份分布趨勢說明,目標基因在不同轉基因油

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論