Foxo1對(duì)小鼠顆粒細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、細(xì)胞凋亡是由體內(nèi)外因素觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)預(yù)存的死亡程序而導(dǎo)致的細(xì)胞死亡過(guò)程，是多細(xì)胞生物維持自身穩(wěn)定的重要機(jī)制。卵泡閉鎖的本質(zhì)是顆粒細(xì)胞和卵母細(xì)胞的凋亡。轉(zhuǎn)錄因子Foxo1主要通過(guò)轉(zhuǎn)錄調(diào)控和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育、代謝和細(xì)胞周期、凋亡等方面起重要作用。本實(shí)驗(yàn)主要通過(guò)構(gòu)建FOXO1真核表達(dá)質(zhì)粒，在小鼠顆粒細(xì)胞中過(guò)表達(dá)FOXO1，從而研究Foxol對(duì)小鼠顆粒細(xì)胞凋亡的影響，探索卵泡閉鎖的分子機(jī)理。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：①正常情況下，小

2、鼠顆粒細(xì)胞表達(dá)Foxo1蛋白，F(xiàn)oxo1在顆粒細(xì)胞中的分布與其磷酸化狀態(tài)緊密相關(guān)，未磷酸化的Foxo1蛋白位于細(xì)胞核中，而磷酸化的Foxo1蛋白明顯出核，位于細(xì)胞質(zhì)中；②通過(guò)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染成功實(shí)現(xiàn)了外源FOXO1基因在小鼠顆粒細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)；③轉(zhuǎn)染36小時(shí)后，顆粒細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化，AnnexinV-PI細(xì)胞凋亡染色和Caspase-8活性測(cè)定說(shuō)明FOXO1過(guò)表達(dá)促進(jìn)顆粒細(xì)胞凋亡，并依賴于FOXO1與DNA的結(jié)合；④Real-time PCR結(jié)