鎘對小鼠卵巢顆粒細胞凋亡作用及相關影響因素的研究.pdf

1、鎘是常見的環(huán)境和工業(yè)污染物，對雌性哺乳動物生殖系統(tǒng)具有明顯的毒性?？梢鹇殉膊±斫M織學改變，干擾排卵和受精過程，引起暫時性不育，還可能對雌激素受體、孕酮受體及基因表達產(chǎn)生影響。 研究目的：探討鎘對卵巢顆粒細胞的調(diào)亡誘導作用，闡明其作用機理；在理論上對鎘的性腺毒性作用給予補充，為今后的研究提供理論依據(jù)。 研究方法：該實驗采用25日齡未成年雌性小鼠為實驗對象，通過孕馬血清促性腺激素處理后再腹腔注射氯化鎘的在體實驗模型，采用病

2、理學方法檢測卵巢中卵泡閉鎖的變化；用TUNEL法來檢測卵巢顆粒細胞是否調(diào)亡及凋亡率的變化；用常規(guī)方法檢測顆粒細胞中MDA含量及SOD活性的變化；用免疫組化方法和半定量RT-PCR法檢測顆粒細胞p53基因的表達。 實驗結果：TUNEL法檢測結果為，48h對照組凋亡率為0.5426％；高、中、低劑量組分別為14.5248％、11.5764％、9.8762％；96h對照組凋亡率上升為10.2064％，高、中、低各組分別為21.4126

3、％、15.8864％、12.4721％。表明各組均有不同程度的凋亡，且隨鎘劑量增加，凋亡率有上升趨勢，差異有極顯著性(P<0.01)。病理學檢測卵巢切片中卵泡閉鎖情況，結果隨鎘劑量的增加，卵泡閉鎖率逐漸升高，差異有顯著性。常規(guī)方法檢測MDA含量和SOD活性的變化，MDA含量隨著鎘劑量的增加而升高，48h與96h兩時間段實驗組與對照組差異極顯著(P<0.01)：SOD活性隨著鎘劑量的增加而相應降低，48h各實驗組與對照組比較差異顯著，96

4、h除1mg/kg與對照組差異顯著(P<0.05)外，其余各組與對照組差異極顯著(P<0.01)。用免疫組化法和半定量RT-PCR法檢測p53蛋白表達，結果p53在各組普遍表達，并隨鎘劑量的加大而表達增強，除了用免疫組化法檢測時，96hlmg/kg組與對照組差異顯著外，其余各實驗組與對照組間差異極顯著(P<0.01)。 實驗結論： 1.鎘對小鼠卵巢顆粒細胞的凋亡有促進作用，具有劑量效應關系。 2.鎘對小鼠卵巢卵泡的