N-氨甲酰谷氨酸合成及其生理功能研究.pdf

1、本文闡述了以谷氨酸為原料N-氨甲酰谷氨酸(NCG)的合成工藝,其次利用分子生物學方法研究了其對母豬生理功能的影響機制;最后通過毒理學試驗評價其作為飼料添加劑的安全性能,其主要實驗內容如下：
　　 試驗一：以谷氨酸、尿素為原料,經過成鹽、縮合、酸化,再重結晶得到目標化合物N-氨甲酰谷氨酸的合成路線得到產品純度≧99％,總收率≧87％。針對文獻中NCG獲得方法的不足之處做了如下改進:采用化學合成法,產品簡單易得,副產物少、縮短反應時

2、間。直接使用濃鹽酸酸化,簡化了工藝流程,降低了生產成本;通過優(yōu)化摩爾配比、反應溫度、濃鹽酸的用量等試驗條件減少了氨類副產物,從而避免了分離純化步驟,收率高出文獻值20％。合成選擇堿性體系水解目標化合物,避免了酸性水解中產生氫氰酸帶來的安全隱患。對目標物的化學結構均通過液質及核磁共振進行了表征,證實了與目標物及其中間體的分子結構完全相符合。目前,其合成工藝文獻報道較少,在國內也未見規(guī)?；a。
　　 試驗二：以豬作為動物模型,研究

3、ARG和NCG對妊娠母豬生產性能的影響。VEGF-A、PLGF和eNOS可能在妊娠母豬營養(yǎng)供給作用產生的分子機理中發(fā)揮重要作用。提出“ARG-NO-VEGF途徑影響母豬胎盤血液供給”的假設。試驗選用體重、胎次、年齡、上胎產仔成績相近的懷孕90天的健康長大母豬27頭,隨機分成3組:空白對照組、ARG組和NCG組,每組9個重復,每個重復1頭,分別飼喂以下三種日糧:基礎日糧,基礎日糧中添加1％ARG和0.1％NCG。記錄各項生產指標,采集胎盤

4、尿囊絨毛膜組織,熒光定量PCR檢測VEGF-A、PLGF、eNOS基因表達水平。試驗三結果顯示： ①ARG組和NCG組活仔初生總窩重顯著提高(P＜0.05),ARG組窩均活仔頭數比對照組有提高的趨勢(0.05＜P＜0.1),窩均死胎數顯著減低(P＜0.05)；②母豬血漿中,試驗組NO、VEGF-A和NOS濃度均高于對照組；③試驗組ARG和NCG胎盤組織VEGF-A、PLGF、eNOS基因表達量均高于對照組。
　　 試驗三：50只

5、清潔級昆明小鼠隨機分為五組。NCG分別為按2500mg/kg·BW,1250mg/kg·BW和625mg/kg·BW作為高、中、低劑量組灌服劑量。另分別設一陽性對照組(環(huán)磷酰胺40mg/kg)和陰性對照組(蒸餾水)。按常規(guī)方法(GB15193.7-2003)進行小鼠精子畸形試驗。采用連續(xù)經口給予受試物5天,從首次給予受試物計第35天頸椎脫臼處死動物,取雙側附睪制片,每只動物計算1000個精子中的畸形數,計算畸形率。試驗三結果顯示,NCG