團(tuán)頭魴源嗜水氣單胞菌拮抗菌的篩選及拮抗特性研究.pdf

1、本研究采用紙片法分離篩選拮抗菌，篩選到生防效果優(yōu)良的菌種，并確定其生物學(xué)分類地位。研究了拮抗菌株的生物安全性，并對(duì)拮抗菌進(jìn)行了魚(yú)體的拮抗實(shí)驗(yàn)和保護(hù)力的測(cè)定。得到了如下的結(jié)論:
　　1、利用紙片法，對(duì)在LB培養(yǎng)基、TCBS培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基上初步分離的131株單克隆菌株進(jìn)行拮抗菌的篩選，得到5株對(duì)致病性嗜水氣單胞菌具有拮抗作用的菌株。
　　2、在體外通過(guò)對(duì)抑菌譜、共凝集率及在共培養(yǎng)條件下對(duì)致病性嗜水氣單胞菌的抑菌效果的測(cè)定，

2、篩選出5株嗜水氣單胞菌優(yōu)勢(shì)拮抗菌，分別為S13、S18、S24、S25和F4。其中拮抗菌S18、S24、F4在各方面指標(biāo)均為良好，有進(jìn)一步開(kāi)發(fā)為水產(chǎn)益生菌的潛在價(jià)值。
　　3、對(duì)優(yōu)勢(shì)拮抗菌S18、S24、F4進(jìn)行形態(tài)特征、生理學(xué)特性以及16SrRNA、gyrB基因的序列測(cè)定，鑒定三株優(yōu)勢(shì)拮抗菌為解淀粉芽孢桿菌。
　　4、對(duì)解淀粉芽孢桿菌S24進(jìn)行魚(yú)體試驗(yàn)，毒性試驗(yàn)表明拮抗菌S24對(duì)供試團(tuán)頭魴是安全的，不產(chǎn)生毒性反應(yīng);免疫保護(hù)

3、力試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，拮抗菌S24在飼料中的添加濃度為107CFU/kg時(shí)，受免團(tuán)頭魴獲得的免疫保護(hù)率為60％;魚(yú)體內(nèi)熒光蛋白標(biāo)記的致病性嗜水氣單胞菌拮抗的試驗(yàn)，得到與體外一致的抑菌效果。
　　綜上所述，拮抗菌S18、S24、F4作為嗜水氣單胞菌拮抗菌，為嗜水氣單胞菌生物防治提供了三株生防效果優(yōu)良的菌株。通過(guò)對(duì)拮抗菌S24體內(nèi)、體外對(duì)嗜水氣單胞菌的拮抗性能研究、安全性檢測(cè)、保護(hù)力研究表明拮抗菌S24的生防效果顯著，安全無(wú)毒，具備商品化的應(yīng)用