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文檔簡介
1、草魚是我國淡水魚類養(yǎng)殖中最大宗魚類品種,近年來,隨著追求高產(chǎn)的草魚養(yǎng)殖池塘投放密度越來越高,導(dǎo)致水質(zhì)環(huán)境惡化和病害加劇。研究池塘養(yǎng)殖水體的微生物組組成結(jié)構(gòu),能促進淡水魚類健康養(yǎng)殖。本研究對湖南望城喬口草魚池塘暴發(fā)病與健康養(yǎng)殖水體微生物組進行了比較分析,對暴發(fā)病魚池病魚的疾病病原進行了分離鑒定及其拮抗菌篩選研究。
1.精養(yǎng)草魚池塘水體的微生物組結(jié)構(gòu)分析。采用Illumina Hiseq高通量測序技術(shù)和生物信息學(xué)技術(shù),分析比較了精
2、養(yǎng)草魚魚塘患病和健康養(yǎng)殖水體的微生物組結(jié)構(gòu)。對微生物宏基因組測序數(shù)據(jù)分析,結(jié)果表明不同水體的樣品菌群共鑒定到38門、70綱、133目、269科、423屬,暴發(fā)病和健康養(yǎng)殖水體中細菌群落的α-多樣性存在差異,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析沒有達到顯著性水平,主坐標(biāo)分析與樣本熱圖聚類分析表明細菌群落結(jié)構(gòu)明顯不同。CCA分析表明,COD對水體菌群的分布有著顯著影響。
2.草魚病原新菌株的分離鑒定。從暴發(fā)病魚池的患病草魚體內(nèi)分離純化出一批維氏氣單胞菌疑
3、似菌株,選取一株優(yōu)勢菌株進行鑒定。結(jié)合16S rDNA序列分析和生理生化特性,鑒定為維氏氣單胞菌的新菌株,命名為AvX005(GenBank登錄號:KU641161)。該菌進行回復(fù)感染試驗?zāi)苁共蒴~強致病,并研究了其藥敏特性和生長特性。
3.拮抗菌的篩選及其活性物質(zhì)分析。針對病原維氏氣單胞菌AvX005新菌株,經(jīng)廣泛分離篩選出解淀粉芽胞桿菌,研究了該菌株對魚類病原菌具有廣譜性拮抗作用,發(fā)現(xiàn)對氣單胞菌屬的抑制效果最好。經(jīng)共凝集率測
4、定,解淀粉芽胞桿菌和維氏氣單胞菌共凝集率達到36.98%,拮抗菌動物保護力試驗測定,解淀粉芽胞桿菌對草魚的保護率達到80%。對解淀粉芽胞桿菌的抑菌活性物質(zhì)進行了理化性質(zhì)研究,表明該抑菌活性物具有熱穩(wěn)定性、耐酸、不耐強堿、對蛋白酶不敏感,能被有機溶劑萃取、酸沉淀,可推測該活性成分為非蛋白類物質(zhì)。
4.拮抗菌的抑菌活性物質(zhì)分子質(zhì)譜鑒定。發(fā)酵培養(yǎng)解淀粉芽胞桿菌,進行發(fā)酵液的活性物質(zhì)提取,經(jīng)UHPLC分離純化和質(zhì)譜儀鑒定,發(fā)現(xiàn)該活性物
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