酵母β-D-葡聚糖改性及對(duì)玉米赤霉烯酮吸附效果的研究.pdf

1、本試驗(yàn)以酵母細(xì)胞壁為材料，提取酵母β-D-葡聚糖，然后對(duì)其進(jìn)行硫酸酯化改性，以硫酸基取代度為試驗(yàn)指標(biāo)，正交試驗(yàn)優(yōu)化不同取代度產(chǎn)物的條件。探討酵母β-D-葡聚糖改性前后的產(chǎn)物對(duì)ZEA的體外、體內(nèi)吸附試驗(yàn)。本研究共進(jìn)行了2個(gè)試驗(yàn)。
　　 試驗(yàn)一：以酵母細(xì)胞壁為原料，利用酶堿法提取酵母細(xì)胞壁中的酵母多糖，對(duì)提取物進(jìn)行了定性定量分析。薄層層析和紅外光譜表明提取物主要成分為β-D-葡聚糖。制備的酵母提取物為白色粉末，無(wú)味，不溶于水。苯酚-

2、硫酸法測(cè)定其多糖含量為87.36%，蛋白質(zhì)含量為3.23%，多糖得率為20.14%。
　　 試驗(yàn)二：以試驗(yàn)一提取的酵母β-D-葡聚糖為原料，利用氯磺酸-吡啶法進(jìn)行硫酸酯化改性。以取代度(DS)為試驗(yàn)指標(biāo)，通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)得到不同取代度的酵母β-D-葡聚糖硫酸酯，體外吸附ZEA，結(jié)果表明，當(dāng)取代度為0.49時(shí)，對(duì)應(yīng)這一取代度的酵母β-D-葡聚糖硫酸酯對(duì)ZEA吸附量最大，為18.6528μg/mg，高于酵母β-D-葡聚糖的吸

3、附量2.2707μg/mg。此取代度對(duì)應(yīng)的酯化條件為：反應(yīng)溫度45℃，反應(yīng)時(shí)間2h，氯磺酸與吡啶的體積比1:6。紅外光譜分析表明：酵母β-D-葡聚糖硫酸酯的紅外光譜圖在1259.56cm-1和808.12cm-1處出現(xiàn)較強(qiáng)的特征吸收峰，分別對(duì)應(yīng)S=O拉伸振動(dòng)和C-O-S變角振動(dòng)，說(shuō)明已成功引入硫酸根基團(tuán)。通過(guò)掃描電鏡觀(guān)察，酵母β-D-葡聚糖硫酸酯顆粒表面結(jié)構(gòu)變成網(wǎng)格裝，比表面積增大。
　　 以20g左右的健康雌性昆明小鼠為試驗(yàn)動(dòng)

4、物，共30只，酵母細(xì)胞壁、酵母β-D-葡聚糖及酵母β-D-葡聚糖硫酸酯為吸附劑，采用單次灌胃方式，將其與玉米赤霉烯酮同時(shí)灌胃，評(píng)價(jià)酵母β-D-葡聚糖及其酯化物對(duì)小鼠玉米赤霉烯酮毒性損傷的保護(hù)能力。試驗(yàn)共分為5個(gè)處理組，每組6只，分別為空白對(duì)照A組；單獨(dú)灌服40mg/kg bw(8% LD50)ZEA的B組，同時(shí)灌服ZEA和吸附劑(酵母細(xì)胞壁、酵母β-D-葡聚糖、酵母β-D-葡聚糖硫酸酯)的C、D、E組。灌胃48h后收集血液測(cè)定血清學(xué)指標(biāo)

5、。結(jié)果顯示，和A相比，B組的AST和BUN水平顯著升高，TP水平顯著降低(p＜0.05)；和B組相比，C、D、E組的AST、ALT、ALP、TBIL水平降低，TP、ALB和CRE水平升高，但各組之間差異不顯著(p>0.05)；C、D、E組之間各指標(biāo)差異不顯著(p＞0.05)。這一結(jié)果說(shuō)明單次灌服ZEA，小鼠肝臟受到一定程度的損傷，β-D-葡聚糖及其酯化制劑可以吸附部分的ZEA，在一定程度上緩解小鼠的肝臟損傷。但改善效果不明顯，原因是因?yàn)?/p>