米諾環(huán)素在鯉、氧阿苯達(dá)唑在鯽體內(nèi)的代謝研究暨鯉CYP450的初步研究.pdf

1、第一部分米諾環(huán)素在鯉、氧阿苯達(dá)唑在鯽體內(nèi)的代謝研究。
　　 中國(guó)是一個(gè)漁業(yè)大國(guó)。由于魚(yú)病的泛濫，各種各樣的藥物已經(jīng)被廣泛用于魚(yú)病的治療，漁藥的濫用導(dǎo)致了藥物在魚(yú)類(lèi)可食部分的殘留。由于我國(guó)的氣候有明顯的季節(jié)差異，所以研究藥物在不同水溫條件下在魚(yú)體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)和殘留消除規(guī)律可以為該藥物給藥方案以及休藥期的制定提供了理論依據(jù)。
　　 本文研究了在冬、夏季水溫(10℃和25℃)條件下，米諾環(huán)素(MINO)在鯉、氧阿苯達(dá)唑(ABZS

2、O)在鯽體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)及殘留消除規(guī)律。生物樣品通過(guò)萃取、吹干、濃縮等步驟的前處理，用高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定樣品中藥物的含量。本文所建立的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)線(xiàn)性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)(r)均在0.9997以上。試驗(yàn)藥品在血漿中的回收率均在88％以上，在組織中的回收率均在73％以上。日間變異系數(shù)均小于10％，日內(nèi)變異系數(shù)均小于5％。
　　 對(duì)鯉以10 mg/kg·bw劑量的MINO口灌溶液、對(duì)鯽以10 mg/kg·bw劑量的鹽酸氧阿苯達(dá)

3、唑口灌溶液?jiǎn)未谓o藥進(jìn)行藥物動(dòng)力學(xué)研究表明水溫對(duì)兩種藥物的代謝有顯著的影響，夏季水溫條件下吸收速率相對(duì)較快、消除半衰期相對(duì)較短。通過(guò)藥物動(dòng)力學(xué)軟件分析表明MINO、ABZSO及其代謝產(chǎn)物的藥-時(shí)曲線(xiàn)均符合有吸收一室模型。冬季水溫(10℃)條件下，MINO的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)為:吸收半衰期(t1/2ka)2.65 h，達(dá)峰時(shí)間(Tmax)7.21 h，峰濃度(Cmax)2.34μg/mL，消除半衰期(t1/2ke)11.16 h，表觀分布容積(

4、Vd/F)4.09 L/kg，清除率(CLb)0.25 L/(h·kg)，藥時(shí)曲線(xiàn)下面積(AUC)59.07μg·h/mL; ABZSO的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為:t1/2ka3.89 h，Tmax10.58 h，Cmax3.20μg/mL，t1/2ke16.34h, Vd/F1.99L/kg, CLb0.08 L/(h·kg), AUC118.21μg·h/mL; ABZSO2的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為:t1/2ka6.39 h，Tmax12.82 h，Cm

5、ax0.78μg/mL，t1/2k。12.86 h，Vd/F6.43 L/kg，CLb0.34 L/(h·kg)，AUC28.86μg·h/mL。夏季水溫(25℃)條件下，MINO的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為:t1/2ka1.65 h,Tmax3.50 h,Cmax2.97μg/mL, t1/2ke3.78 h,Vd/F2.66 L/kg, CLb0.49L/(h·kg)，AUC30.77μg·h/mL; ABZSO的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為:t1/2ka1.2

6、9 h，Tmax3.80 h，Cmax4.39μg/mL, t1/2ke6.72 h,Vd/F1.53 L/kg, CLb0.19 L/(h·kg), AUC63.21μg·h/mL; ABZSO2的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為:t1/2ka3.73 h，Tmax7.04 h，Cmax1.03μg/mL，t1/2ke6.56 h，Vd/F4.61 L/kg, CLb0.49 L/(h·kg), AUC20.52μg·h/mL。
　　 在殘留研究

7、中，對(duì)鯉以10 mg/kg·bw劑量的MINO口灌溶液、對(duì)鯽以10mg/kg·bw劑量的鹽酸氧阿苯達(dá)唑口灌溶液連續(xù)給藥3d。結(jié)果表明水溫對(duì)MINO在鯉、ABZSO及其代謝產(chǎn)物在鯽體內(nèi)的消除速率有顯著的影響，皮膚中的藥物代謝速率與其他組織相比相對(duì)較慢。所以，建議兩種藥物的殘留靶組織均為皮膚。若MINO和ABZSO均以10 mg/kg·bw的劑量口灌給藥，建議MINO的休藥期為:在冬季水溫(10℃)條件下19d，在夏季水溫(25℃)條件下8

8、 d;建議ABZSO的休藥期為:在冬季水溫(10℃)條件下17d，在夏季水溫(25℃)條件下10d。
　　 第二部分鯉CYP450的初步研究。
　　 細(xì)胞色素P450(CYP450)是由大量同工酶組成的一組超基因家族，對(duì)大多數(shù)內(nèi)源性化合物和外源性化合物的代謝起著重要的作用，該酶系在藥理學(xué)中具有極其重要的研究意義。盡管CYP450對(duì)動(dòng)物體內(nèi)藥物的代謝起著重要的作用，但目前對(duì)于該酶的研究主要集中在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和人體上，關(guān)于食品動(dòng)

9、物CYP450酶的研究相對(duì)較少。我國(guó)是魚(yú)類(lèi)食品的消費(fèi)大國(guó)，漁藥的合理使用與人類(lèi)的健康及環(huán)境安全密切相關(guān)。本試驗(yàn)以我國(guó)市場(chǎng)需求量大的鯉為研究對(duì)象，研究了不同的水溫(10℃和25℃)對(duì)鯉肝微粒體生化指標(biāo)的影響;常用磺胺類(lèi)藥物(SD、SMD、SM2)對(duì)鯉肝微粒體CYP450生化指標(biāo)的影響;以氯唑沙宗(CZX)作為探針?biāo)幬镅芯坎煌疁?5℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃)對(duì)鯉CYP2E1同工酶活性的影響。本實(shí)驗(yàn)旨在為水產(chǎn)動(dòng)物CYP45

10、0酶系的進(jìn)一步研究以及指導(dǎo)水產(chǎn)動(dòng)物合理用藥和魚(yú)類(lèi)用藥的安全性問(wèn)題提供理論基礎(chǔ)。具體研究結(jié)果如下:
　　 1.水溫對(duì)鯉肝微粒體CYP450生化指標(biāo)的影響。
　　 通過(guò)比較可以看出在冬季水溫(10℃)條件下鯉肝細(xì)胞色素P450酶的部分生化指標(biāo)與在夏季水溫條(25℃)件下的相比明顯偏低，這為解釋魚(yú)類(lèi)在夏季水溫(25℃)條件下藥物代謝速率會(huì)明顯高于在冬季水溫(10℃)條件下的代謝速率提供了理論依據(jù)。該結(jié)果為進(jìn)一步研究細(xì)胞色素CY

11、P450亞酶的活性與溫度的關(guān)系奠定了基礎(chǔ)。
　　 2.磺胺類(lèi)藥物對(duì)鯉肝微粒體CYP450生化指標(biāo)的影響。
　　 結(jié)果表明常用磺胺類(lèi)藥物(SD、SM2、SMM)對(duì)鯉肝微粒體蛋白含量，CYPb5的活性、ERND的活性沒(méi)有明顯的影響，對(duì)CYP450含量、AND、AH的活性具有明顯的抑制作用(P＜0.01)，這對(duì)磺胺類(lèi)藥物在水產(chǎn)動(dòng)物上的合理應(yīng)用具有指導(dǎo)意義。
　　 3.溫度對(duì)CYP2E1同工酶活性的影響。