花生膜聯(lián)蛋白基因AnnAh1和AnnAh2的功能驗(yàn)證.pdf

1、在熱帶和亞熱帶地區(qū)，花生是非常重要的經(jīng)濟(jì)作物和食物來(lái)源。由于其豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和良好的口感，花生一直是世界范圍內(nèi)主要的油料作物。中國(guó)是世界上最大的花生生產(chǎn)和出口國(guó)，同亞洲的其他國(guó)家一起，花生產(chǎn)量占世界范圍的90％以上。然而，在中國(guó)，花生的主要產(chǎn)地集中在干旱和半干旱地區(qū)，所以研究花生的抗鹽和抗旱機(jī)制，培育花生抗逆新品種在中國(guó)有很重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
　　annexin蛋白是一種植物中普遍存在的鈣離子結(jié)合蛋白，占植物蛋白總量的1％，可以與植

2、物細(xì)胞的質(zhì)膜與內(nèi)膜系統(tǒng)可逆的結(jié)合。越來(lái)越多的證據(jù)表明，植物annexin蛋白不同于動(dòng)物中的annexin蛋白，具有其特有的功能特點(diǎn)，且與植物的抗逆性（包括生物與非生物脅迫）密切相關(guān)，在鈣離子和ABA信號(hào)通路中發(fā)揮作用。例如擬南芥中的annexin基因AnnAt1在非生物脅迫下可以開(kāi)啟依賴(lài)過(guò)氧化氫的鈣離子通道。
　　本實(shí)驗(yàn)室在花生‘魯花14’cDNA文庫(kù)中克隆得到兩條annexin基因序列，分別命名為AnnAh1和AnnAh2。7種

3、不同的非生物脅迫條件處理下，對(duì)花生‘魯花14’葉片中AnnAh1和AnnAh2的表達(dá)模式進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)在這些脅迫條件下AnnAh1和AnnAh2基因的表達(dá)均出現(xiàn)了下調(diào)。本文在此基礎(chǔ)上，以35s為啟動(dòng)子，將AnnAh1和AnnAh2基因在煙草中表達(dá)，深入研究AnnAh1和AnnAh2基因在鹽脅迫中的生理功能。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性植株為鹽脅迫敏感型。而大多數(shù)植物annexin基因的轉(zhuǎn)基因植株的抗鹽及抗旱性都明顯提高，這意味著花

4、生annexin基因AnnAh1和AnnAh2不同于其他物種中的annexin基因，有特殊的鹽脅迫響應(yīng)機(jī)制。
　　AnnAh1和AnnAh2基因在洋蔥表皮細(xì)胞中的瞬時(shí)表達(dá)結(jié)果顯示，其在細(xì)胞膜、胞質(zhì)與細(xì)胞核內(nèi)都有表達(dá)。大多數(shù)植物annexin基因已被發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞膜及胞質(zhì)中存在，只有極少數(shù)annexin基因被發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)，如豌豆和苜蓿中的annexin基因。本文為annexin蛋白在細(xì)胞核中的定位提供了新的證據(jù)，為annexin蛋