膜聯(lián)蛋白家族新成員的克隆及其結(jié)構(gòu)與功能的研究.pdf

1、膜聯(lián)蛋白(annexin)家族是一類(lèi)鈣磷脂結(jié)合蛋白超家族,存在于大多數(shù)真核生物細(xì)胞內(nèi),有著十分廣泛且重要的生理功能,如參與細(xì)胞骨架運(yùn)動(dòng)、調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、形成膜離子通道、參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等.這類(lèi)蛋白結(jié)構(gòu)上具有明顯特征:C端保守區(qū)大多由α螺旋組成,其中含有主要的Ca<'2+>磷脂結(jié)合活性位點(diǎn);N端為可變區(qū),不同家族成員N端序列組成及長(zhǎng)度各不相同.annexin B1是我們以免疫篩選法從豬囊尾蚴cDNA文庫(kù)分離得到的新基因.將其核酸和氨基酸序列

2、進(jìn)行同源比較和分析,發(fā)現(xiàn)它實(shí)際上是一新的annexin家族成員.作為扁形動(dòng)物門(mén)首次發(fā)現(xiàn)的annexin家族成員,研究annexin B1不僅可以了解其對(duì)豬囊尾蚴寄生、移行、生長(zhǎng)、發(fā)育等生命活動(dòng)的重要意義,為預(yù)防和治療該類(lèi)疾病提供新的藥物靶點(diǎn),而且可以為整個(gè)annexin家族的研究提供有意義的遺傳及分子進(jìn)化學(xué)資料.所以接下來(lái)我們構(gòu)建了annexin B1的融合及非融合表達(dá)載體,在大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高表達(dá),利用親和層析及離子交換層析技術(shù)純化蛋