偃麥草屬E組及St組染色體編碼的高分子量谷蛋白基因的分子克隆.pdf

1、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文偃麥草屬E組及St組染色體編碼的高分子量谷蛋白基因的分子克隆姓名：唐朝暉申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：作物遺傳育種學(xué)指導(dǎo)教師：劉廣田孫善澄2002.6.1基類型。2普通小麥背景中中問偃麥草高分子量谷蛋白基因的克隆八倍體小偃麥中1、中2、中3、中4、中5，除具有普通小麥A、B、D染色體組外，還有中間偃麥草的一個(gè)染色體組，含有小麥育種可利用的最好亞基組合。在綠中1、中3、中4、中5以及中間偃麥草中，都擴(kuò)增出一條1074bp

2、的DNA片段，認(rèn)定這條高分子量谷蛋白基因是中間偃麥草所特有的，命名該基因?yàn)橹虚g偃麥草高分子量谷蛋l(fā)芻GluElh基因，編碼的亞基為Eh。Eh亞基是一種Y型亞基，氨基酸序列包括一個(gè)有21個(gè)氨基酸殘基的信號肽，～個(gè)有105個(gè)氨基酸殘基的N末端保守區(qū)，一個(gè)有42個(gè)氨基酸殘基C末端保守區(qū)，一個(gè)有188個(gè)氨基酸殘基的重復(fù)區(qū)。在重復(fù)區(qū)中含有21個(gè)六肽(PGQGQQ)，4個(gè)九肽(GYYPTsLQQ)，以及位于重復(fù)區(qū)起始端的十～肽(GYYPsVTSPQ

3、Q)和十二肽(GSYYPGQASPQQ)和重復(fù)末端的三肽(GYD)。Eh亞基在系統(tǒng)進(jìn)化中，與Dyl0、Dyl2、Dyl2、A，、By9、Ry和Cy7個(gè)亞基的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。3二倍體長穗偃麥草高分子量谷蛋白基因的克隆在二倍體長穗偃麥草P1276709中，利用高分子量谷蛋白基因兼并性引物P1、P2，克隆到一條全長含1155個(gè)核替酸的高分子量谷蛋白編碼基因，該基因命名為二倍體長穗偃麥草高分子量谷蛋白的GIuE1b基因。推導(dǎo)的亞基(Eb)是一個(gè)Y

4、型亞基，氨基酸序列包括一個(gè)有21個(gè)氨基酸殘基的信號肽，一個(gè)有105個(gè)氨基酸殘基的N末端保守區(qū)，一個(gè)有42個(gè)氨基酸殘基的c末端保守區(qū)，一個(gè)有215個(gè)氨基酸殘基的重復(fù)區(qū)。在重復(fù)區(qū)中含有24個(gè)六肽(PGQGQQ)，5個(gè)九肽(GYYPTSLQQ)，以及位于重復(fù)區(qū)起始端的十一肽(GYYPSVTSPQQ)和十二肽(GSYYPCQASPQQ)和重復(fù)末端的三肽(GYD)。Eb亞基與中間偃麥草Eh亞基親緣關(guān)系較近，而與OylO、Dyl2、Dyl2t、Ay

5、、B)，9、Ry和Cy7個(gè)亞基的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。在二倍體長穗偃麥草P1469212中，利用兼并性引物Pl、P2。克隆到一條全長編碼區(qū)含1224個(gè)核苷酸的高分子量谷蛋白基因，該基因命名為二倍體長穗偃麥草高分子量谷蛋白的OluEle基因。推導(dǎo)的亞基(Ec)是一個(gè)X型亞基，氨基酸序列包括一個(gè)有21個(gè)氨基酸殘基的信號肽，一個(gè)有86個(gè)氨基酸殘基的N末端保守區(qū)，一個(gè)有42個(gè)氨基酸殘基c末端保守區(qū)，一個(gè)有257個(gè)氨基酸殘基的重復(fù)區(qū)。在重復(fù)區(qū)中含有26個(gè)