29315.基于astilbin發(fā)現(xiàn)的活化t細胞凋亡的新調(diào)控機制_第1頁
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文檔簡介

1、論文題目博士學(xué)位論文英文題目△nQY曼!鰻g叢!塹iQ墜魚￡蟲曼墾魚!iY塹星魚I曼曼!!者姓名科專業(yè)名稱究方向?qū)Ы處焛l衛(wèi)QP!Q墨i墨魚壘墨星亟Q墜△墨!i!墜i墮論文工作時間2006年9月至2010年5月作學(xué)研指2122篩選陽性克隆3l2123質(zhì)粒轉(zhuǎn)染3l22實驗結(jié)果3l221p34AsiRNA轉(zhuǎn)染效率檢測以及干擾序列的篩選一31222Knockdownp34A對Astilbin誘導(dǎo)活化JurkatT細胞凋亡的影響一33223過表

2、達p34A載體的轉(zhuǎn)染條件確定34224過表達p34A對Astilbin誘導(dǎo)活化JurkatT細胞凋亡的影響35225Astilbin須和p34A聯(lián)用導(dǎo)致線粒體損傷3623討論3824參考文獻40第二章P34A在活化T細胞中轉(zhuǎn)位至線粒體的調(diào)控機理42第一節(jié)活化T細胞中p34A轉(zhuǎn)位至線粒體4211實驗材料和方法42111試劑42112動物43113細胞43114細胞線粒體分離純化一44115Westernblot蛋白印跡45116免疫熒光染

3、色(Immunofluorescence，IF)45117免疫膠體金染色及透射電鏡檢測(Immunogoldlabelingandtransmissionelectronmicroscopy)46118流式細胞計數(shù)法檢測CD69表達47119免疫共沉淀(Immunoprecipitation，IP)4712實驗結(jié)果48121活化T細胞中p34A轉(zhuǎn)位至線粒體的發(fā)現(xiàn)及確證48122T細胞活化促進p34A轉(zhuǎn)位至線粒體5l123T細胞活化促進胞

4、內(nèi)p34A磷酸化并向線粒體轉(zhuǎn)位52124Astilbin不影響活化T細胞脆內(nèi)及線粒體上p34A及磷酸化p34A表達5313討j淪5414參考文獻55第二節(jié)p34A定位到線粒體的上游調(diào)控機制5621實驗材料和方法56211試劑56212細胞培養(yǎng)57213細胞線粒體分離純化57214Westernblot蛋白印跡57215免疫共沉淀57216二維凝膠電泳及質(zhì)譜分析鑒定蛋白5722實驗結(jié)果58221p34A與Akt，p38結(jié)合58222活化T

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