26875.米曲霉蛋白酶基因的克隆表達(dá)_第1頁(yè)
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1、南昌大學(xué)碩士學(xué)位論文米曲霉蛋白酶基因的克隆表達(dá)姓名：周興生申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：李燕萍20100601ABSTRACTABSTRACTAspergiIlusoryzaeisallimportantindustrialmicroorganismsRisrichinenzymeswhichhavehighstabilityhi曲temperaturecapabilityproteaseandcarbohydraseSof

2、arithavenotfoundthefungusAspergillustoxinsSoitiswidelyusedinfoodandfeedindustriesbeCameofitshi[曲securitypharmaceuticalItisthedutytoimprovetlleiractivitytothebiologicalworkersinproductionInthispapertotalRNAWaSsuccessfully

3、extractedfromAspergillusoryzaefermentationproductThealkalineandneutralproteasegeneswereamplifiedbyRTPCILAlsotheproteasegenesareexpressedinEscherichiacoliandPichiapastorisrespectivelyThemaincontentareillustratedaSfollowin

4、g：1ThetotalRNAextractedsuccessfullyfromthesolidslatefermentationofAspergillusoryzae，clonedtheneutralandalkalineproteasegene；2Thegeneswereinsertedintoaexpressionvector6HisTpRX2togettherecombinantplasmid6HisTpRX2NIPand6His

5、TpRX2ALPTherecombinantplasmidtransformedintoEcofiBL21andinducerespectivelybylactoseandIPTG；3Therecombinantneutralprotease、析m6His。TagWaspurifybyNiNTAHisBindResin；Therecombinantneutralprote嬲e’sactivityis304U，gbyFuLinfenmet

6、hod；4ThegeneswereinsertedintoaexpressionvectorpPIC9KtogettherecombinantplasmidpPIC9KNIPJTpPIC9K—ALPZTtherecombinantplasmidtransformedintoyeastGSll5andinducebymethan01Comparethedifferentsignalpeptidesimpactionoftheownsign

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