基因槍法轉(zhuǎn)化鋁敏感小麥體系的建立.pdf

1、小麥(Triticum aestivum L.)是世界上最重要的糧食作物之一。近年來，隨著世界工業(yè)化的發(fā)展，導(dǎo)致了土壤中鋁的大量活化，嚴(yán)重制約了小麥的生長和產(chǎn)量。因此，利用植物基因工程技術(shù)改良小麥品質(zhì)、提高耐鋁性是非常重要的。 為了建立基因槍法轉(zhuǎn)化鋁敏感小麥的穩(wěn)定體系，本課題研究了質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化與大量制備；酸性條件下鋁脅迫對(duì)小麥成熟胚盾片誘導(dǎo)和分化的影響；在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中加入卡那霉素對(duì)成熟胚污染問題的作用；此外，本文研究了在不同的條件

2、下，GUS基因瞬時(shí)表達(dá)量的差異，確定了利用基因槍轉(zhuǎn)化小麥幼胚的最適條件。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用TB 處理大腸桿菌細(xì)胞，并加入DMSO、PIPES 和無機(jī)離子K＋、Mn2＋，使轉(zhuǎn)化頻率有較大幅度的提高；抗性品系小麥Atlas66 受鋁毒害較小，培養(yǎng)基中鋁的存在與否對(duì)誘導(dǎo)率、分化率無顯著影響，而鋁敏感品系小麥EM12 隨培養(yǎng)基中鋁濃度的增加誘導(dǎo)率、分化率呈梯度下降；隨著卡那霉素濃度的增加，小麥離體完整胚在誘導(dǎo)培養(yǎng)過程中污染率呈線性降低