45575.高羊茅高頻再生體系的建立和基因槍法介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化研究;高羊茅幾丁質(zhì)酶基因ⅰ保守片段的克隆及其序列分析

1、分類號——密級單位代碼：!!!!!學(xué)號：20032604西北大學(xué)碩士學(xué)位論文題目高羊茅高頻再生體系的建立和基因槍法介導(dǎo)的遺籃堡絲嬰筮；直芏差且工廈酶基固!堡童垃墨的直隆叢墓莊到僉塹作者王堡指導(dǎo)教師簽量塾專業(yè)技術(shù)職務(wù)鏨握學(xué)科(專業(yè))塑壁壘塹鱟答辯El期20066學(xué)位授予日期零零六年六月灝性比對結(jié)果設(shè)計出一對簡并引物(P1：5’TGCCCCAACTGCCTCTGCT一3’、P2：5’ccT餓G(T／C)TGTAGCAGTC(c／G)A一3’

2、)，通過PCR艇廊克隆了兩條高羊茅幾丁質(zhì)酶基因片段?！裼?2％氯化汞溶液處理幼嫩葉片24h，提取總RNA，同時從新鮮幼嫩葉片中提取總DNA，鼓二囊為摸教分別進行RTPCR幫PCR反應(yīng)，擴壤囂褥《囂令長度各為849bp秘843bp的DNA贊段，分捌命名為fescue1及fescue2：縫六穰秘譯后推導(dǎo)出兩個遘續(xù)完整的氨基酸序列。分別命名為gympro1及gym—pro2。懶j懶弛i酊軟f憷行比對，發(fā)現(xiàn)這兩個推導(dǎo)出的氮基酸序列相似性達到99

3、％，兩個核苷酸序列相似性達到97％。譙NCBI網(wǎng)站上進行BLAST搜索，結(jié)果表明它們的核螢酸序列和氨蒸教序列分別和其它j艮本葦；植物的I類幾丁豢薅萋因彥魏蠢蠹薹黧黲期鴦較蹇鶼露漂瞧，其中，gym—pro一1與翠熱蓉、丈麥及黑麥l類幾丁質(zhì)酶的氨基酸序列相似性分別商達85％、87％和8496。同源性比對結(jié)果顯豕，兩條擴增片段在序列上具有微小差異，遮表明fescue一1與fescue2并非來自予同一個基因，即RTPCR中擴增產(chǎn)生rescue一