痰液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查和沉渣切片法在肺癌中的臨床診斷價值.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文痰液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查和沉渣切片法在肺癌中的臨床診斷價值姓名：任美思申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：李建華20090401美國新柏氏超薄細(xì)胞檢測儀，ThinPrep保存液及處理液，95％酒精，石蠟，脫水機，奧林帕斯顯微鏡，福建邁新公司單克隆抗體CKH(克隆號：34BE12)，CK7(克隆號：OVTL12／30722)，WrF1(克隆號：8G7G3／1)，NSE(克隆號：E27)等。二、方法1、實

2、驗方法：(1)傳統(tǒng)涂片將痰液制成傳統(tǒng)涂片4張，巴氏染色。(2)TCT的制備將痰液的一小部分直接加入30ml清洗液和7～8滴消化液(1，4二硫蘇糖醇)后振蕩約10分鐘。離心，2500轉(zhuǎn)／分，5分鐘。棄上清液，將少許沉淀加入到盛有保存液的小瓶中，靜置10分鐘后，用ThinPrep制成薄層細(xì)胞涂片，95％的酒精固定10分鐘，巴氏染色。(3)痰沉渣切片將剩余的痰液倒入試管中，加入95％的酒精，吹打均勻后離心，2500轉(zhuǎn)／分，5分鐘。取出沉渣，石

3、蠟包埋，49in連續(xù)切片。選2張切片進(jìn)行HE染色。(4)免疫細(xì)胞化學(xué)染色對于通過傳統(tǒng)涂片，TCT和痰沉渣切片法仍不能分型的病例進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色。石蠟切片(4“m)后脫蠟水化。滴加過氧化物酶阻斷溶液(試劑A)，室溫孵育10分鐘，PBS沖洗；滴加非免疫性動物血清(試劑B)，室溫孵育lO分鐘；滴加一抗，室溫孵育90分鐘，PBS沖洗；滴加生物素標(biāo)記的二抗(試劑c)，室溫孵育20～30分鐘，PBS沖洗；滴加鏈霉素抗生物素過氧化物酶溶液(試劑D