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文檔簡介
1、脫落細胞學,病理科,,,,,脫落細胞學,細胞固定的方法常見固定問題的處理體腔液樣本的制備,細胞固定的方法,將細胞標本制作完成后,在細胞濕潤時,立即放入以醇性溶液為主的固定液(95%酒精、無水酒精、甲醇、乙醚酒精液等)內,稱濕固定法。這種方法是目前最好的固定方法,可以完好的保存細胞內的各種結構,對正確認識各種細胞的性質,減少細胞學的誤診有很大的幫助。,細胞固定的方法,此方法在痰涂片、婦科涂片、穿刺物涂片、各種刷片、食道拉網(wǎng)涂片、腫塊印
2、片等水分較少的標本上使用非常方便,但在胸腹水、尿、心包積液、腦脊液等含水量較高的標本制作時,需要一定的技術,才能避免細胞的脫落,這在后面各章節(jié)具體會講。,細胞固定的方法,細胞經(jīng)過濕固定后,應該直接從固定液內拿出放入染色液中,無需水洗或干燥,水洗容易使細胞脫落,干燥會導致細胞褪變,也就是說無論在固定前還是固定后細胞干燥都會導致細胞褪變。,細胞固定的方法,濕固定后的固定液,一定要過濾或更換,防止細胞的脫落和污染。在固定和染色時,最好能將痰與
3、其他液體標本分開處理,盡可能不要使用相同的蘇木素液或使用前過濾,因為痰標本很容易吸附脫落的細胞,造成人為的污染,有時會導致誤診,常見固定問題的處理,1、 細胞褪變:通常是由于涂片在干燥過程中,細胞氧化,導致細胞褪變。解決方法,在半濕狀態(tài)下立即固定。其二,也可能是由于細胞不能及時送檢。解決方法:及時送檢,或在送檢液體內加入福爾馬林(送檢液體:福爾馬林=9:1)。,常見固定問題的處理,2、 細胞掉片:最常見的原因是涂片上
4、水分福爾馬林太多,導致放入酒精時有大量細胞脫落。解決方法,離心后要把試管內的液體全部吸干。其次可能是細胞量太多或玻片不干凈,解決方法,把玻片洗干凈,涂片要薄、均勻。,體腔液樣本的制備,體腔液樣本包括胸水、腹水、心包積液、尿、腎囊腫穿刺液等制作。當送檢標本為尿液時,應該要求患者排空清晨第一次尿液,因為這時的尿液中含鹽量高,非上皮性物質較多。應該選擇第二次以后的中段尿為佳。,體腔液樣本的制備,如果患者有有嚴重的尿道或陰道炎癥,應采用導尿管插
5、管取尿,連續(xù)三天送檢。 根據(jù)送檢標本沉淀物量的多少,區(qū)別對待: 一、制片 1、取液:輕輕的把送檢液體上部倒掉,取下層液體15-50ml二管,放入離心管。 2、轉速2000/分,5分鐘 。,體腔液樣本的制備,3、觀看離心管內沉淀物的量: (1)量少:離心后肉眼只能看到少許沉淀,快速倒去上清液,再加入送檢標本,重復離心,反復多次。最后將上清液倒去,把試管豎直倒立于吸水紙上,用吸水紙
6、吸干管口的水分,然后用吸管吸出沉淀物(濕固定的關鍵就在于如何把沉淀物上的水分去除干凈,過多的水分會導致細胞脫片)。,體腔液樣本的制備,如果沉淀物太少,又沒有多余的標本可以反復離心,或多次離心后細胞量還是很少,可將上清液倒去后,把試管口向上靜置幾秒,試管壁上的液體會流入管底,用吸管反復抽吸這點液體,把管底的細胞全部洗刷到液體里,然后吸出,放在0.5或1ml的尖底離心管內,重新離心,離心完成后,用200微升加樣槍吸取上清液,最后吸出沉淀物。
7、此時,由于離心管較小,底較尖,細胞會非常集中,容易吸出。,體腔液樣本的制備,(2)量多:離心后用吸管吸掉上清液,然后,用吸管吸取沉淀物上層細胞。(3)紅細胞多的標本處理:離心后吸取上層沉淀物,放入酒精冰醋酸液(25%酒精95ml+5ml冰醋酸)內,打勻,再離心沉淀。然后,吸取沉淀物。,體腔液樣本的制備,4、涂片:吸取沉淀物后,滴在載玻片上,可采用二張載玻片對拉法。吸取沉淀物涂片的關鍵:吸取沉淀物內不能帶有水分。涂片的關鍵在于平整,均
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