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1、動脈粥樣硬化(Atherosclerosis AS)是目前人類發(fā)病率最高、危害最大的疾病之一,現(xiàn)已明確AS的發(fā)生是一個多種因素在多層次上綜合作用的過程,巨噬泡沫細胞是動脈粥樣硬化斑塊早期損傷、脂質(zhì)條紋的主體,在動脈粥樣硬化病理過程中起主要作用,巨噬泡沫細胞的形成及其作用是動脈粥樣硬化斑塊損傷形成、發(fā)展和崩解的關(guān)鍵.CpG基序(CpG-motif)又稱為免疫激活序列,對CpG基序的認識始于對細菌的DNA組份(bDNA)激活哺乳動物免疫系統(tǒng)
2、作用的研究,進一步的實驗證明發(fā)揮作用的主要是bDNA中的一些以未甲基化的CpG二核苷酸對為核心的堿基序列,而且含有這類序列的寡核苷酸(CpG-ODN)也具有與bDNA類似的免疫激活作用,能夠直接激活巨噬細胞、樹突狀細胞和B細胞等抗原呈遞細胞,誘導多種Th-1型細胞因子分泌,上調(diào)共刺激分子表達等.但其是否影響巨噬細胞的形成未見報道.我們在利用基因表達譜芯片研究CpG-ODN對巨噬細胞基因表達譜影響的研究中,發(fā)現(xiàn)CpG-ODN刺激巨噬細胞后
3、,兩次芯片雜交篩選出重復差異表達的基因119條,其中有3條與泡沫細胞形成相關(guān)的基因受體CpG-ODN調(diào)控.這3條基因分別為CD36、脂蛋白脂酶和Fcγ2b受體.這些基因與泡沫細胞和動脈粥樣硬化斑塊的形成關(guān)系密切.為進一步研究CpG-ODN對巨噬泡沫細胞形成及相關(guān)基因的調(diào)控作用,首先要確證芯片雜交的結(jié)果.我們采用半定量RT-PCR技術(shù)對相關(guān)基因的差異表達進行了驗證,采用組化染色的方法評估巨噬細胞泡沫化的程度,通過高效液相法測定細胞內(nèi)的膽固
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