CpG對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化早期巨噬泡沫細(xì)胞形成及相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制研究.pdf_第1頁(yè)
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1、動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis AS)是目前人類發(fā)病率最高、危害最大的疾病之一,現(xiàn)已明確AS的發(fā)生是一個(gè)多種因素在多層次上綜合作用的過程,巨噬泡沫細(xì)胞是動(dòng)脈粥樣硬化斑塊早期損傷、脂質(zhì)條紋的主體,在動(dòng)脈粥樣硬化病理過程中起主要作用,巨噬泡沫細(xì)胞的形成及其作用是動(dòng)脈粥樣硬化斑塊損傷形成、發(fā)展和崩解的關(guān)鍵.CpG基序(CpG-motif)又稱為免疫激活序列,對(duì)CpG基序的認(rèn)識(shí)始于對(duì)細(xì)菌的DNA組份(bDNA)激活哺乳動(dòng)物免疫系統(tǒng)

2、作用的研究,進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證明發(fā)揮作用的主要是bDNA中的一些以未甲基化的CpG二核苷酸對(duì)為核心的堿基序列,而且含有這類序列的寡核苷酸(CpG-ODN)也具有與bDNA類似的免疫激活作用,能夠直接激活巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和B細(xì)胞等抗原呈遞細(xì)胞,誘導(dǎo)多種Th-1型細(xì)胞因子分泌,上調(diào)共刺激分子表達(dá)等.但其是否影響巨噬細(xì)胞的形成未見報(bào)道.我們?cè)诶没虮磉_(dá)譜芯片研究CpG-ODN對(duì)巨噬細(xì)胞基因表達(dá)譜影響的研究中,發(fā)現(xiàn)CpG-ODN刺激巨噬細(xì)胞后

3、,兩次芯片雜交篩選出重復(fù)差異表達(dá)的基因119條,其中有3條與泡沫細(xì)胞形成相關(guān)的基因受體CpG-ODN調(diào)控.這3條基因分別為CD36、脂蛋白脂酶和Fcγ2b受體.這些基因與泡沫細(xì)胞和動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成關(guān)系密切.為進(jìn)一步研究CpG-ODN對(duì)巨噬泡沫細(xì)胞形成及相關(guān)基因的調(diào)控作用,首先要確證芯片雜交的結(jié)果.我們采用半定量RT-PCR技術(shù)對(duì)相關(guān)基因的差異表達(dá)進(jìn)行了驗(yàn)證,采用組化染色的方法評(píng)估巨噬細(xì)胞泡沫化的程度,通過高效液相法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)的膽固

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