4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯誘導(dǎo)消化系統(tǒng)等腫瘤細(xì)胞分化的作用及對(duì)維甲酸受體和維甲類X受體的影響.pdf

1、目的:本研究觀察新型維甲酸衍生物ATPR對(duì)對(duì)胃癌細(xì)胞株SGC-7901,肝癌細(xì)胞株BEL-7402、HEPG2,結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29,卵巢癌細(xì)胞株SKOV3增殖的影響和誘導(dǎo)分化活性,并探討其作用的分子機(jī)制。
　　方法:
　　1.新型維甲酸類衍生物ATPR作用于腫瘤細(xì)胞株SGC-7901、BEL-7402、HEPG2、HT-29、SKOV3細(xì)胞后,通過MTT法檢測(cè)細(xì)胞的增殖。吉姆薩染色法在倒置相差顯微鏡下觀察加藥處理前后細(xì)胞

2、形態(tài)學(xué)變化。分光光度法檢測(cè)胃癌細(xì)胞分化標(biāo)志酶堿性磷酸酶(ALP)、乳酸脫氫酶(LDH)活性和肝癌細(xì)胞分化標(biāo)志酶LDH、谷酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)活性;酶聯(lián)免疫法檢測(cè)肝癌細(xì)胞標(biāo)志物甲胎蛋白(AFP),結(jié)腸癌細(xì)胞標(biāo)志物癌胚抗原(CEA)水平和卵巢癌標(biāo)志物糖鏈抗原125(CA125)。流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞周期的變化。
　　2.采用RT-PCR法檢測(cè)上述5種腫瘤細(xì)胞株維甲酸受體及維甲類X受體:RARα、RARβ、RARγ、RXRα的含量,比較其

3、差異性。
　　3.將藥物作用于腫瘤細(xì)胞72h,采用RT-PCR法檢測(cè)用藥后各腫瘤細(xì)胞中RARα、RARβ、RARγ、RXRα的轉(zhuǎn)錄水平的影響。
　　結(jié)果:
　　1.將ATPR作用于胃癌細(xì)胞株SGC-7901,肝癌細(xì)胞株BEL-7402、HEPG2,結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29,卵巢癌細(xì)胞株SKOV324h、48h、72h、96h后,抑制實(shí)體瘤細(xì)胞增殖作用呈劑量依賴性增加,明顯抑制作用出現(xiàn)在藥物作用48h,但在作用72h后則更

4、顯著。ATPR的誘導(dǎo)分化活性則表現(xiàn)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞趨于成熟分化。SGC-7901中ALP、LDH活性下降;BEL-7402、HEPG2中AFP、LDH、γ-GT水平下降;HT-29中CEA水平升高;SKOV3中CA125水平下降。流式細(xì)胞儀測(cè)定各腫瘤細(xì)胞G0/G1期細(xì)胞表達(dá)量增加,S期減少,細(xì)胞周期進(jìn)程受影響,細(xì)胞阻滯在G0/G1期。
　　2.上述五種腫瘤細(xì)胞中RARβ的表達(dá)量極少,甚至缺失;RARα在BEL-7402和HE

5、PG2細(xì)胞中表達(dá)量較高;RARγ在SGC-7901細(xì)胞中表達(dá)量較高;RXRα在SGC-7901、BEL-7402、HEPG2、SKOV3細(xì)胞中均有較高的表達(dá),而在HT-29中表達(dá)含量相對(duì)較低。
　　3.ATPR作用72h后,SGC-7901中RARα、RARβ表達(dá)量升高,RARγ、RXRα表達(dá)量下降;BEL-7402和HEPG2中RARα表達(dá)量下降,RARβ、RARγ表達(dá)量升高;HT-29中RARα、RARβ、RARγ表達(dá)量升高;

6、SKOV3中RARα表達(dá)量升高,RXRα表達(dá)量下降。
　　結(jié)論:
　　1.4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯(ATPR)有較強(qiáng)的抑制胃癌細(xì)胞株SGC-7901,肝癌細(xì)胞株BEL-7402、HEPG2,結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29,卵巢癌細(xì)胞株SKOV3細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其分化的活性,結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29的誘導(dǎo)分化活性有待于進(jìn)一步研究。
　　2.維甲酸受體和維甲類受體在各腫瘤細(xì)胞中分布的不同,含量差異較大。這種分布差異反映了這些

7、細(xì)胞接受維甲酸調(diào)控的能力及維甲酸受體不同亞型之間的比例不同,亦可能是腫瘤細(xì)胞對(duì)維甲酸及ATPR誘導(dǎo)分化敏感度不一的重要原因。3.受體RARα、RARβ、RARγ、RXRα可能與ATPR對(duì)胃癌細(xì)胞株SGC-7901的生長(zhǎng)抑制和分化作用有密切關(guān)系;受體RARα、RARβ、RARγ可能與ATPR對(duì)ATPR對(duì)肝癌細(xì)胞株BEL-7402、HEPG2生長(zhǎng)抑制和分化作用有密切關(guān)系;RARα、RARβ、RARγ可能與ATPR結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29生長(zhǎng)抑