microRNA在維甲酸誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞分化中的作用.pdf

1、本文探討了維甲酸(RA)誘導(dǎo)小鼠成神經(jīng)瘤細(xì)胞N2a的分化，并研究microRNA(miRNA)對RA誘導(dǎo)神經(jīng)元分化中的作用。首先，我們驗證了N2a是否能在維甲酸(RA)的誘導(dǎo)下分化為神經(jīng)元。結(jié)果表明，經(jīng)過5天的RA誘導(dǎo)，N2a細(xì)胞的神經(jīng)突起延伸，胞體面積增大，有明顯的分化誘導(dǎo)作用，分化的N2a細(xì)胞占總細(xì)胞的數(shù)量約為40％。進(jìn)一步的實驗表明，成熟神經(jīng)元標(biāo)記蛋白MAP2的表達(dá)量明顯增加，證實了經(jīng)RA處理后，N2a細(xì)胞向神經(jīng)元方向分化。

2、>　　 大量實驗表明，miRNA在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和神經(jīng)元分化過程中起重要作用，但miRNA在RA誘導(dǎo)的N2a細(xì)胞分化過程中的作用尚未見報道。本文系統(tǒng)檢測了RA誘導(dǎo)N2a細(xì)胞后miRNA的表達(dá)變化，其中包括了miR-124、miR-125b、miR-9和let-7a。實驗結(jié)果表明，N2a細(xì)胞經(jīng)過RA處理后，miR-124、miR-9表達(dá)量明顯上升，而miR-125b的表達(dá)量下降，let-7a的表達(dá)沒有發(fā)生顯著改變。
　　 我們檢測

3、了三種miRNA在N2a細(xì)胞分化中的作用，首先，在N2a細(xì)胞中過量表達(dá)或抑制miR-124，然后通過觀察細(xì)胞的形態(tài)變化檢測其對神經(jīng)細(xì)胞分化的作用。實驗結(jié)果表明，過量表達(dá)miR-124能有效誘導(dǎo)N2a細(xì)胞神經(jīng)突起的生長，而抑制過表達(dá)的miR-124則幾乎完全阻斷了這種形態(tài)變化。免疫組化分析表明，過量表達(dá)miR-124后，MAP2蛋白的表達(dá)量明顯增加，進(jìn)一步證實了，miR-124過量表達(dá)誘導(dǎo)了N2a細(xì)胞向神經(jīng)元方向分化。過量表達(dá)miR-12