大鼠重癥胰腺炎急性肺損傷TLR4-NF-κB信號傳導(dǎo)通路及大黃附子湯治療作用的實驗研究.pdf

1、目的：　　探討Toll-樣受體4(TLR4)/核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)信號傳導(dǎo)通路在大鼠重癥胰腺炎急性肺損傷(SP-ALI)發(fā)病中的作用機制及中藥大黃附子湯對SP-ALI的治療作用。 方法： SD大鼠隨機分為假手術(shù)組(Ⅰ組)、SP-ALI(Ⅱ組)、大黃附子湯組(Ⅲ組)和血必凈組(Ⅳ組)，每組32只。各組再按3、6、12、24h時間點分為四個亞組，每個亞組各8只。Ⅰ組開腹后翻動胰腺數(shù)次，行空腸造瘺；Ⅱ組采用胰膽管逆行

2、注入4％牛磺膽酸鈉(1ml/kg)誘導(dǎo)SP-ALI模型，行空腸造瘺；Ⅲ組、Ⅳ組在Ⅱ組的基礎(chǔ)上于術(shù)后30min經(jīng)空腸造瘺管分別注入大黃附子湯及血必凈各2ml。各組按時間點處死大鼠，心臟取血測定內(nèi)毒素(LPS)、淀粉酶含量，取胰腺及肺臟觀察其病理形態(tài)學(xué)變化；應(yīng)用免疫組化(Immunohistochemistry)定位檢測肺組織TLR4、NF-κB p65的表達，免疫印跡(Western B1ot)檢測肺TLR4、NF-κBp65含量變化。

3、 結(jié)果： (1)Ⅱ組術(shù)后3～24h淀粉酶、內(nèi)毒素及胰腺和肺損傷病理組織學(xué)評分較I組均明顯升高(P<0.05)。術(shù)后3h出現(xiàn)胰腺充血，肺輕度水腫；6h胰腺明顯水腫，肉眼見肺水腫；12h和24h胰腺局部出現(xiàn)紫紅色壞死灶，少量血性腹水和胰周脂肪皂化、出血，肺水腫加劇，暗紅色肺表面可見散在小出血點。證明成功建立了大鼠SP-ALI模型。 (2)免疫組化及免疫印跡結(jié)果顯示肺組織TLR4、NF-κB p65各時間點表達顯著增加(

4、P<0.05)，TLR4與NF-κB表達呈顯著正相關(guān)(r=0.992，P<0.01)。 (3)Ⅲ組內(nèi)毒素、淀粉酶及胰腺和肺損傷病理組織學(xué)評分在術(shù)后各時間點較II組均顯著降低(P<0.05)；Ⅲ組各時間點肺組織TLR4、NF-κB p65的表達結(jié)果較II組均顯著降低(P<0.05)；Ⅲ組各時間點上述指標(biāo)結(jié)果較IV組均顯著降低(P<0.05)。 結(jié)論： (1)胰膽管逆行注入4％牛磺膽酸鈉成功建立大鼠SP-ALI模型。