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文檔簡介
1、目的:通過逆行胰膽管注射5%的?;悄懰徕c,制作穩(wěn)定高效的大鼠重癥急性胰腺炎肺損傷模型,并在此基礎(chǔ)上探討腹腔置管引流對大鼠重癥急性胰腺炎肺損傷的作用及相關(guān)機(jī)制。
方法:將32只雄性SPF級SD大鼠隨機(jī)分為以下4組,每組各8只:假手術(shù)組:麻醉大鼠后開腹,僅翻動胰腺數(shù)次后關(guān)腹;重癥急性胰腺炎組(SAP組):通過微量輸液泵,經(jīng)十二指腸乳頭逆行胰膽管注射5%的?;悄懰徕c,建立大鼠重癥急性胰腺炎肺損傷模型;腹腔置管引流組(APD組):通過
2、前述方法制作大鼠重癥急性胰腺炎肺損傷模型后,在關(guān)腹前留置一根特制引流管于大鼠腹腔,用以引流所產(chǎn)生的腹水;胰腺炎相關(guān)性腹水組(PAAF組):將重癥急性胰腺炎大鼠產(chǎn)生的腹水注射到正常大鼠腹腔。造模后24h,收集大鼠胰腺、肺組織,血液及腹水標(biāo)本,通過光鏡觀察胰腺及肺組織的病理學(xué)改變并進(jìn)行病理評分、計算肺組織濕/干重比(W/D),評估胰腺及肺組織損傷情況;分光光度計法檢測肺組織中MDA的表達(dá)及MPO的活性;分別檢測血液及腹水中淀粉酶、TNF-α
3、及IL-1β含量;肺組織中TNF-α、IL-1β及NF-κB含量;免疫組織化學(xué)及western blotting方法檢測肺組織中HMGB1蛋白表達(dá)情況。
結(jié)果:造模后24h,假手術(shù)組大鼠并無腹水產(chǎn)生,而重癥急性胰腺炎組有大量腹水產(chǎn)生,并且腹水中可檢測到大量淀粉酶及TNF-α、IL-1β。重癥急性胰腺炎組大鼠胰腺組織病理評分,血清淀粉酶及TNF-α、IL-1β含量均較假手術(shù)組升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);此外,重癥急性
4、胰腺炎組大鼠肺組織病理評分、W/D、MPO、MDA、TNF-α、IL-1β、NF-κB含量也明顯較假手術(shù)組升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);免疫組化及westernblotting也觀察到重癥急性胰腺炎組大鼠肺組織中HMGB1蛋白表達(dá)明顯高于假手術(shù)組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。而腹腔置管引流組大鼠與重癥急性胰腺炎組大鼠相比,胰腺組織病理評分及血清淀粉酶,TNF-α及IL-1β均有所降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);此
5、外,腹腔置管引流組大鼠肺組織病理評分、W/D、MPO、MDA、TNF-α、IL-1β、NF-κB含量也明顯較重癥急性胰腺炎組降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);免疫組化及western blotting也觀察到腹腔置管引流組大鼠肺組織中HMGB1蛋白表達(dá)明顯低于重癥急性胰腺炎組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);但較假手術(shù)組相比較,上述指標(biāo)仍有所升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與假手術(shù)組相比,胰腺炎相關(guān)性腹水組大鼠血液、胰腺
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