肺心湯含藥血清對(duì)離體培養(yǎng)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖和低氧誘導(dǎo)因子脯氨酸羥化酶的影響.pdf

1、【目的】研究肺心湯含藥血清對(duì)體外缺氧環(huán)境下大鼠原代肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中PHDs-HIF-1α信號(hào)分子表達(dá)的影響，探索肺心湯含藥血清與對(duì)缺氧下大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖的關(guān)系。
　　【方法】細(xì)胞增殖部分：組織貼壁法培養(yǎng)大鼠原代肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，MTT法、EDU標(biāo)記法檢測(cè)不同濃度FXD含藥血清對(duì)缺氧處理（1％O2、94%N2和5%CO2）24h后大鼠PAMSC增殖情況?；虮磉_(dá)部分：Western-blot檢測(cè)不同缺氧時(shí)間（2h、4h、6

2、h、12h、24h）下HIF-1α的蛋白表達(dá)；選用HIF-1α表達(dá)量最高一組的時(shí)間點(diǎn)作為后續(xù)時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)常氧組、缺氧模型組、缺氧+FXD含藥血清組，缺氧+硝苯地平組PHDs、HIF-1α蛋白和mRNA的表達(dá)。
　　【結(jié)果】
　　1.肺心湯含藥血清可抑制體外缺氧處理24h后大鼠PASMC的增殖，且呈劑量依賴性。
　　2.不同缺氧時(shí)間點(diǎn)對(duì)HIF-1α蛋白表達(dá)的影響 Western Blot結(jié)果顯示：隨著缺氧時(shí)間的延長(zhǎng)，HIF

3、-1α的蛋白表達(dá)量呈遞增趨勢(shì)，缺氧12h組達(dá)到高峰值，高于缺氧2h組（P＜0.05），缺氧24h組維持高水平。
　　3.缺氧處理12h對(duì)大鼠PASMC中HIF-1α、PHDs蛋白表達(dá)的影響 Western Blot結(jié)果顯示：與正常對(duì)照組比較，缺氧模型組、缺氧+FXD組、缺氧+硝苯地平組HIF-1a、PHD3蛋白表達(dá)水平明顯增加（P＜0.01）。
　　4.缺氧處理12h對(duì)大鼠PASMC中HIF-1α、PHDs mRNA表達(dá)的影

4、響 RT-PCR結(jié)果顯示：與正常對(duì)照組比較，缺氧模型組HIF-1a、PHD2、PHD3 mRNA表達(dá)水平明顯增加（P＜0.01）。
　　5.肺心湯含藥血清對(duì)缺氧處理12h大鼠PASMC中HIF-1α、PHDs蛋白表達(dá)的影響Western Blot結(jié)果顯示：與缺氧模型組相比：缺氧+FXD組HIF-1α蛋白表達(dá)水平增加（P＜0.05），缺氧+FXD組PHD1蛋白表達(dá)水平明顯增加（P＜0.01）。
　　6.肺心湯含藥血清對(duì)大鼠PA

5、SMC中HIF-1α、PHDs mRNA表達(dá)的影響 RT-PCR結(jié)果顯示：與缺氧模型組相比，缺氧+FXD組和缺氧+西藥組PHD1 mRNA表達(dá)升高（P＜0.05）。
　　7.【結(jié)論】
　　1.肺心湯含藥血清可抑制體外缺氧處理24h大鼠PASMC的增殖；
　　2.肺心湯含藥血清能抑制缺氧處理12h大鼠PASMC中HIF-1α蛋白的表達(dá)，但能提高PHD1蛋白和mRNA水平的表達(dá)；
　　3.缺氧12h狀態(tài)下，肺心湯含藥