鞘氨醇激酶抑制劑和化療藥物聯(lián)用對體外胃癌細胞增殖與凋亡的研究.pdf

1、目的：觀察鞘氨醇激酶1(SPHK1)抑制劑二甲基鞘氨醇(N,N-Dimethylsphingosine DMS)與化療藥物聯(lián)用對體外胃癌細胞增殖與凋亡的影響。 方法：體外培養(yǎng)人胃癌細胞株SGC7901，DMS 1.0μmol/L分別與不同濃度的5-氟尿嘧啶(5-VET)、奧沙利鉑(OXA)、絲裂霉素(MMC)單用、聯(lián)用24h，利用四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法檢測各組細胞生長抑制率；流式細胞儀(FCM)檢測各組細胞凋亡率；同時采

2、用RT-PCR法檢測各組SPHK1 mRNA的表達。統(tǒng)計數(shù)據(jù)多組間比較采用單向方差分析(One-way ANOVA)；藥物聯(lián)用時，運用SAS軟件對抑制率作反應曲面分析，得到兩藥相互作用特征及反應曲面方程，根據(jù)方程的系數(shù)判斷聯(lián)用時的相互作用關(guān)系。 結(jié)果：1.DMS與化療藥物對胃癌細胞SGC7901增殖影響： (1)DMS 1.0μmol/l作用于胃癌細胞24h，其細胞增殖抑制率為10.23％±0.74％。 (2)化療藥物5-FU(

3、0.5μg/ml、2.5μg/ml、12.5μg/ml)作用于胃癌細胞24h，其細胞增殖抑制率分別為9.38％±0.79％、19.61±0.90％、 29.83％±0.54％；與5-FU相同濃度的OXA作用于胃癌細胞24h，其細胞增殖抑制率分別為9.95％±3.24％、21.04％±2.19％、45.49％±3.60％；MMC(0.05μg/ml、0.25μg/ml、1.25μg/ml)作用于胃癌細胞24h，其細胞增殖抑制率分別為15.

4、35％±0.77％、24.72％±0.83％、30.68％±0.28％；上述各組內(nèi)不同濃度藥物使用后細胞增殖抑制率均具有顯著性差異(P<0.05)。(3)DMS 1.0μmol/l分別與上述不同濃度的5-FU、MMC、OXA聯(lián)用24h，其胃癌細胞增殖抑制率分別為15.35％±0.86％、25.57％±0.27％、36.37％±0.54％;16.76％±0.41％、27.28％±0.29％、52.56％±0.36％和21.02％±0.28

5、％、32.10％±0.27％、36.36％±0.28％；運用SPSS12.0及SAS8.0統(tǒng)計軟件得出：不同濃度的化療藥物單用組與聯(lián)用DMS組抑制率均具有顯著性差異(P<0.05)，聯(lián)用組抑制率均高于單用組，兩者具有協(xié)同作用。 2.DMS與化療藥物對胃癌細胞SGC7901凋亡影響：單用DMS 1.0μmol/l及5-FU0.5μg/ml處理SGC7901細胞12h后，其凋亡率分別為7.56％±1.47％、9.08±2.04％，較

6、空白對照組1.48±0.39％明顯增高；而聯(lián)用組凋亡率為17.68±3.66％，聯(lián)用組胃癌細胞凋亡率較單用組明顯增加(P<0.05)。 3.DMS與化療藥物對胃癌細胞SGC7901 SPHK1 mRNA表達影響：單用DMS1.0μmol/l、5-FU 0.5μg/ml及聯(lián)用組處理SGC7901細胞24h后，DMS組SPHK1 mRNA表達未見明顯受抑，而5-FU組及聯(lián)用組較之空白對照組SPHK1 mRNA表達則明顯減弱。