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文檔簡介
1、目的：研究瘢痕疙瘩的發(fā)病機(jī)理，在基因水平上探索防治瘢痕疙瘩的新途徑。1．利用real time PCR驗證特異性靶基因在瘢痕疙瘩和正常皮膚成纖維細(xì)胞中的表達(dá)差異；2．利用siRNA沉默特異性表達(dá)基因，并在基因和蛋白水平驗證干擾效果；3．用全基因組芯片檢測siRNA沉默特異性表達(dá)基因后，成纖維細(xì)胞基因表達(dá)變化效果。 方法：1．瘢痕疙瘩組織與正常皮膚組織成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)。2．利用RealTimeRT-PCR驗證PTGS2、NFKBI
2、A、CCNA2、MIF、EGFR和FDPS在瘢痕疙瘩和正常皮膚成纖維細(xì)胞中的表達(dá)差異。3．成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)染條件優(yōu)化實驗4．對篩選出的靶基因PTGS2進(jìn)行siRNA干擾。5．在基因和蛋白水平驗證siRNA沉默效果。6．用全基因組芯片檢測成纖維細(xì)胞靶基因被siRNA沉默后基因表達(dá)變化。 結(jié)果：1．與前期研究所做的基因芯片結(jié)果對照，篩選出PTGS2基因與基因芯片結(jié)果一致，且差異明顯。2．siRNA干擾后，PTGS2基因在mRNA和蛋白水
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