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文檔簡介
1、[目的]
通過培養(yǎng)人正常皮膚和瘢痕疙瘩(Keloid)的成纖維細(xì)胞,觀察25μM/L的組蛋白去乙酰化酶抑制劑辛二酰苯胺異羥肟酸(Suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)對瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的抑制情況;檢測SAHA作用后瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞凋亡情況和細(xì)胞周期變化以及正常皮膚成纖維細(xì)胞、瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞、加藥處理后瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的CDC2L1基因蛋白質(zhì)表達(dá)情況,探討CDC2L1基因與組蛋白乙酰
2、化修飾的關(guān)系。
[方法]
選擇人正常皮膚6例,瘢痕疙瘩3例,凍存的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞3例,瘢痕疙瘩患者及正常皮膚供者術(shù)前均未行注射、放射等治療。應(yīng)用組織塊貼壁法培養(yǎng)正常皮膚和瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞、復(fù)蘇凍存的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞,對培養(yǎng)出來的和復(fù)蘇的細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞免疫鑒定法,鑒定瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞;流式細(xì)胞術(shù)檢測25μM/L SAHA作用后瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞凋亡情況和細(xì)胞周期變化,western blot檢測正常皮膚成纖維細(xì)
3、胞、瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞、加藥處理后瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的CDC2L1基因蛋白質(zhì)表達(dá)情況,探討CDC2L1基因與組蛋白乙?;揎椀年P(guān)系。
[結(jié)果]
1.根據(jù)前面實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)論,以及這次實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)的6例正常皮膚和3例瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞,兩者爬出時(shí)間有差別(P<0.05)分別是15.50±2.47(天)和6.50±1.35(天),與前期實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)論相符;
2.對培養(yǎng)出來的和復(fù)蘇的細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞免疫鑒定,鑒定瘢痕疙瘩成
4、纖維細(xì)胞,符合瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的特點(diǎn);
3.SAHA作用后瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞與未加藥處理的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞相比,凋亡增加和細(xì)胞周期有變化;
4.CDC2L1基因蛋白質(zhì)表達(dá)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞較未加藥處理的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞高(P<0.05),正常皮膚和加藥處理后瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞表達(dá)無明顯差異(P>0.05)。
[結(jié)論]
瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞CDC2L1基因的組蛋白乙?;兄{(diào)控瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞
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