西地那非對(duì)兔自體原位肺移植模型肺缺血再灌注損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：采用兔自體原位肺移植模型，探討西地那非在肺移植模型中對(duì)肺缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其可能機(jī)制。 方法：選用健康成年家兔20只，體重2.5-3.0Kg(由江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供)，隨機(jī)分為對(duì)照組和西地那非組兩組，每組10只。建立兔自體原位肺移植模型，兩組分別用低鉀右旋糖酐液(LPD液)和含有0.7mg/L西地那非的LPD液(LPS液)作肺灌注及保存。各組分別于缺血前、再灌注1h、2h取左下肺靜脈血作血?dú)夥治鰴z測(cè)血氧分

2、壓(PvO2)；各組分別于缺血前、再灌注0.5h、1h、1.5h、2h取左下肺靜脈血，離心，取上清夜，超低溫冰箱保存，待集中檢測(cè)超氧化物歧化酶(SOD)活性、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)活性；于再灌注2h時(shí)取肺組織標(biāo)本制成100g/L的組織勻漿，離心，取上清液超低溫冰箱保存，待集中檢測(cè)丙二醛(MDA)含量、有髓過氧化酶(MPO)活性；術(shù)畢取左下肺相同部位肺組織約0.5g，稱濕重，70℃烘干48h稱干重，計(jì)算肺組織濕/干重比(W/D)；

3、另取兩塊左下肺相同部位肺組織光鏡、透射電鏡下觀察組織形態(tài)結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果： 1肺靜脈血氧分壓比較：再灌注后各時(shí)點(diǎn)PvO2均較缺血前下降，但西地那非組PvO2明顯高于同時(shí)點(diǎn)對(duì)照組，兩組結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(P＜0.05)。 2．MDA含量，SOD活性：再灌注后MDA值，西地那非組明顯低于對(duì)照組；兩組再灌注后各時(shí)點(diǎn)SOD的活性均較缺血前下降，但西地那非組明顯高于同時(shí)點(diǎn)對(duì)照組，兩組結(jié)果均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

4、 3．MPO及iNOS活性：兩組再灌注后各時(shí)點(diǎn)iNOS表達(dá)均較缺血前升高，但西地那非組明顯低于同時(shí)點(diǎn)對(duì)照組；再灌注后MPO活性，西地那非組明顯低于同時(shí)點(diǎn)對(duì)照組，兩組結(jié)果均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 4．肺組織濕/干重比：對(duì)照組與西地那非組兔肺組織濕/干重比比較顯示，對(duì)照組高于西地那非組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 5．光鏡下肺組織病理改變：西地那非組肺組織泡壁輕度增寬，血管內(nèi)皮完整，血管內(nèi)有血細(xì)胞，對(duì)照組肺組

5、織肺泡壁增寬，伴有散在的纖維蛋白沉積，血管內(nèi)皮完整，有大量的中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，可見較多的肺泡吞噬細(xì)胞，常伴有中性粒細(xì)胞的聚集。 6．電鏡下肺組織病理改變：西地那非組大部分肺泡組織結(jié)構(gòu)正常，Ⅰ、Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞大致正常，部分肺泡上皮細(xì)胞水腫脫落。表面絨毛尚可見，板層小體亦較多見，肺泡腔基本通暢，但少數(shù)肺泡腔內(nèi)有紅細(xì)胞滲出，部分區(qū)域毛細(xì)血管內(nèi)紅細(xì)胞堆積，可見到少量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；對(duì)照組肺泡間隔內(nèi)毛細(xì)血管淤血明顯，血管擴(kuò)張，肺泡腔內(nèi)紅細(xì)