氧化苦參堿對兔肺缺血再灌注損傷保護作用的實驗研究.pdf

1、目的：肺缺血再灌注損傷（Ischemic Reperfusion Injury，IRI）是肺移植患者術(shù)后早期發(fā)生肺功能障礙導(dǎo)致患者死亡的主要原因之一。缺血再灌注損傷的發(fā)生機制較復(fù)雜，迄今仍未闡明，但與炎性介質(zhì)、內(nèi)皮細胞損傷、能量耗竭與產(chǎn)能障礙、無復(fù)流現(xiàn)象、鈣超載、氧自由基損傷等機制有關(guān)。目前尚無理想的辦法預(yù)防肺移植術(shù)肺IRI的發(fā)生。明確肺IRI發(fā)生的機制，尋求防治肺IRI的藥物是目前研究的熱點和重點。而不少中藥已被證實有很強的抗氧化、抗

2、炎癥反應(yīng)、擴張血管等功效。如氧化苦參堿（oxymatrine，OMT）是一種具有苦參次堿-15-酮基本結(jié)構(gòu)的化合物，主要是從苦參根及苦豆子中提取的有效成分。現(xiàn)代研究表明氧化苦參堿具有抗菌、保護肝細胞、抗肝纖維化、抗炎抗氧化、免疫調(diào)節(jié)等藥理作用，而且對心、腦、腎、肝等多種臟器的缺血再灌注損傷具有保護作用。但對肺IRI的保護研究甚少，因此本實驗擬通過建立肺IRI的模型，應(yīng)用OMT進行干預(yù)，觀察氧化苦參堿對肺IRI的保護作用。 方法：

3、采用兔肺原位熱缺血再灌注損傷模型進行研究。24只大白兔隨機分為三組：①假手術(shù)組（sham operation group，SO組，n=8），開胸后不阻斷肺門，左頸靜脈緩慢推注生理鹽水5ml/kg；②缺血再灌注組（ischemia-reperfusion group，IR組，n=8），于缺血前5 min左頸靜脈緩慢推注生理鹽水5ml/kg，左肺接受45min的缺血，然后接受60min持續(xù)再灌注；③氧化苦參堿干預(yù)組（oxymatrine g

4、roup，OG組，n=8），于缺血前5 min左頸靜脈緩慢推注氧化苦參堿100mg/kg，左肺接受45min的缺血，然后接受60min持續(xù)再灌注。各組分別于缺血前，缺血后45min，再灌注30min、60min留取標本。硫代巴比妥酸比色法測定組織勻漿丙二醛（MDA）含量、黃嘌呤氧化酶法測定超氧化物歧化酶（SOD）活性，TUNEL法檢測細胞凋亡情況，SABC法測HSP70，光鏡觀察肺組織病理及損傷分級，電鏡下觀察細胞超微結(jié)構(gòu)的變化。

5、 結(jié)果：IR組再灌注30min及60min的MDA含量顯著高于SO組及OG組（P<0.05）；IR組再灌注30min及60min的SOD活性較SO組及OG組顯著降低（P<0.05）；IR組再灌注30min及60min的肺組織細胞凋亡顯著高于SO組和OG組（P<0.05）；免疫組化顯示OG組Ⅱ型肺泡上皮HSP70有強表達（平均吸光度值LD）高于IR組和SO組（P<0.05）；肺組織病理切片顯示：IR組肺泡廣泛出血，肺間質(zhì)彌散性水腫及肺泡

6、內(nèi)大量白細胞聚集、浸潤，伴有廣泛透明膜形成及肺間質(zhì)高度淤血水腫，肺泡腔內(nèi)滲出明顯，OG組肺泡內(nèi)出血、炎性細胞浸潤、滲出及間質(zhì)水腫均較IR組為輕；電鏡顯示：IR組毛細血管內(nèi)皮細胞腫脹破壞有髓樣小體形成，Ⅱ型肺泡上皮腫脹髓樣結(jié)構(gòu)形成，大量脫顆粒，胞漿稀疏，肺泡內(nèi)大量巨噬細胞滲出；而OG組細胞結(jié)構(gòu)基本正常，無明顯水腫，肺泡上皮細胞形態(tài)輕度改變，細胞器清晰可見。 結(jié)論：氧化苦參堿通過清除氧自由基、上調(diào)HSP70的表達，抑制脂質(zhì)過氧化，有