CD56在梗阻性膽道疾病膽管上皮細(xì)胞中表達(dá)的研究.pdf

1、目的：
　　 膽道閉鎖(biliary atresia,BA)是引起新生兒阻塞性黃疸最常見的原因之一,在亞洲人群中發(fā)病率約為1/8000,在歐洲人群中發(fā)病率約為1/18000,女嬰發(fā)病數(shù)量較多。BA在嬰兒早期累及肝內(nèi)外膽道,最終導(dǎo)致肝硬化。隨著Kasai手術(shù)的開展,使膽道閉鎖的治療有了較大進(jìn)展,但仍有70％～80％BA患兒最終需接受肝移植手術(shù),而且手術(shù)時間越晚治愈的可能性越小。而臨床上BA和膽汁淤積型肝炎(cholestatic

2、 hepatitis)往往很難鑒別,許多BA患兒經(jīng)過了較長的保守治療期,延誤了最佳手術(shù)時期,因此探討B(tài)A特異性病理改變對于早期診斷及與膽汁淤積型肝炎鑒別是非常必要的。
　　 研究證實,膽管板由來源于門靜脈分支周圍肝母細(xì)胞的肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞圍繞門靜脈形成。在隨后長期改建過程中,膽管板細(xì)胞逐漸移行到門脈區(qū)的間充質(zhì),通過持續(xù)的膽管板重塑最終形成成熟膽管。在此過程中一旦發(fā)生膽管板重塑障礙,就會造成“膽管板畸形”(ductal plate

3、 malformation,DPM)的發(fā)生。該理論認(rèn)為BA亦屬于“膽管板畸形”中的一種類型。有關(guān)DP重塑的機(jī)制仍不完全清楚,可能與上皮細(xì)胞的增殖、凋亡及細(xì)胞黏附因子等多種因素有關(guān)。其中神經(jīng)細(xì)胞粘附因子(neural cell adhesion molecule,N-CAM)可能發(fā)揮作用。CD56(N-CAM1)是神經(jīng)細(xì)胞粘附分子(N-CAM)的一種同型異構(gòu)體,它通常在神經(jīng)細(xì)胞及個別腫瘤細(xì)胞中高表達(dá),也作為自然殺傷細(xì)胞(natural k

4、iller cells)的標(biāo)志物。通常正常成熟的膽管上皮細(xì)胞不表達(dá)CD56,而在某些引起膽管反應(yīng)(ductular reaction)的疾病中,新生的膽管上皮細(xì)胞可表達(dá)CD56。
　　 本文觀察可引起新生兒及小嬰兒梗阻性黃疸的幾種常見疾病肝組織膽管上皮細(xì)胞CD56的表達(dá)情況及毛細(xì)膽管增生情況,探討幾種引起新生兒及小嬰兒梗阻性黃疸、包括膽道閉鎖在內(nèi)的患兒肝臟組織病理改變,并對CD56與肝臟組織特異性病理改變的關(guān)系進(jìn)行初步探討,為特

5、異性病理診斷探索新方法。
　　 本研究以經(jīng)手術(shù)證實為BA患兒的肝臟病理標(biāo)本和膽汁淤積型肝炎、膽總管囊腫患兒肝臟病理標(biāo)本為研究對象,以無肝膽系統(tǒng)畸形的同年齡段尸檢患兒肝臟標(biāo)本為正常對照。觀察膽管結(jié)構(gòu)變化,并采用免疫組織化學(xué)染色方法觀察CD56在膽管中表達(dá)情況,初步探討CD56在上述梗阻性膽道疾病中的病理變化特點,了解BA早期患兒肝臟組織膽管的病理變化規(guī)律,為深入了解BA發(fā)病原因提供重要實驗依據(jù),為BA與膽汁淤積型肝炎的鑒別提供可供

6、應(yīng)用的病理診斷依據(jù)。
　　 方法：
　　 一、標(biāo)本制備及分組。
　　 經(jīng)術(shù)前超聲、MRCP、術(shù)中所見、術(shù)中膽道造影證實為:BA患者20例、膽汁淤積型肝炎患兒5例、膽總管囊腫患兒5例,術(shù)中無菌條件下取肝組織約0.5cm×0.5cm×0.5cm大小,4％多聚甲醛固定;無肝膽系統(tǒng)畸形的同年齡段尸檢患兒5例,取肝組織,用4％多聚甲醛固定。
　　 二、免疫組織化學(xué)。
　　 應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法檢測CD5

7、6在BA、膽汁淤積型肝炎、膽總管囊腫及正常對照組肝臟組織膽管上皮細(xì)胞內(nèi)的分布和表達(dá)情況。
　　 三、數(shù)據(jù)分析。
　　 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量數(shù)據(jù)以x±s表示,數(shù)值比較采用t檢驗分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1、BA組肝臟組織內(nèi)見大量毛細(xì)膽管增生,膽管失去正常管腔結(jié)構(gòu),結(jié)構(gòu)變化明顯,無固定形態(tài)或形態(tài)異常,分布紊亂,且內(nèi)有膽栓。
　　 2、膽汁淤積型肝

8、炎毛細(xì)膽管增生不明顯,肝臟匯管區(qū)可見顯著淋巴細(xì)胞浸潤。
　　 3、CD56在BA組肝臟組織小膽管及毛細(xì)膽管上皮細(xì)胞內(nèi)顯著表達(dá)(平均光密度為0.425±0.036),而膽汁淤積型肝炎組及膽總管囊腫組膽管未見明顯CD56表達(dá)(平均光密度為0.174±0.023及0.125±0.018),正常對照組也未見CD56表達(dá)(平均光密度為0.146±0.029),BA組與各非BA組差異顯著,P＜0.001。
　　 結(jié)論：