疏水改性羧甲基可德蘭自聚集納米粒用作抗腫瘤藥物載體的研究.pdf

1、本研究利用人體生理物質(zhì)脫氧膽酸疏水性修飾可德蘭衍生物-羧甲基可德蘭合成新型兩親性接枝聚合物用于制備自聚集納米粒子，以抗腫瘤藥表阿霉素為模型藥考察載體對藥物的負(fù)載能力及藥物的釋放行為；利用體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)考察載藥納米粒子的抗瘤效應(yīng)；利用動物實(shí)驗(yàn)考察載體的安全性，從而為抗腫瘤藥物提供一種可供選擇的藥物載體。主要研究工作如下： 合成了一系列脫氧膽酸修飾的羧甲基可德蘭(DCMC)，并用電位滴定、FTIR、1H NMR和XRD對產(chǎn)物的化學(xué)

2、結(jié)構(gòu)及物理特征進(jìn)行了表征。脫氧膽酸的取代度用紫外光譜儀進(jìn)行了測定，取代度分別為2.1，3.2，4.1 6.3(％，每一百個羧甲基可德蘭糖單元)。應(yīng)用1H NMR、掃描電鏡(SEM)、透射電鏡(TEM)、動態(tài)激光散射儀(DLS)、Zeta-電位儀和熒光光譜研究了DCMC在水溶液中形成的自聚集納米粒子的物化特性。DCMC偶聯(lián)物在水中能形成直徑為192～347mm單分散的自聚集納米粒子，粒徑隨著脫氧膽酸的取代度的增高而降低。DCMC自聚集納米

3、粒子的Zeta-電位在蒸餾水中為-60 mV左右，在PBS中為-26～-36 mV，說明帶負(fù)電荷的羧甲基可德蘭分子覆蓋于納米粒子的外殼。DCMC的臨界聚集濃度依賴脫氧膽酸的取代度，且在PBS中比蒸餾水中稍微降低，溶液中的電解質(zhì)及溶液pH值影響到自聚集體的粒徑和臨界聚集濃度。TEM和SEM說明這些自聚集納米粒子是球狀。 采用(NH4)2SO4梯度法制備了表阿霉素負(fù)載的DCMC自聚集納米粒子，載藥量隨著藥物和載體比的增高而增加，包封

4、率為61.3～41.6％，TEM顯示，載藥納米粒接近球形，表面較空白納米粒子的表面粗糙，這可能是表阿霉素有一部分吸附于納米粒子的表面。載藥納米粒子的粒徑隨著載藥量的增高而增加。通過透析方法研究表阿霉素在DCMC自聚集納米粒子中的體外釋放行為表明，其釋放與釋放介質(zhì)的pH值和載藥量有關(guān)，pH降低時釋放加快，載藥量高時釋放慢。 體外對MCF-7腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用表明，空白納米粒子在濃度甚至達(dá)100μg/ml也沒有抗瘤作用，而載藥納米

5、粒子和游離藥物在0.1～10μg/ml范圍內(nèi)都有抗瘤作用，且在1 μg/ml時載藥納米粒子的抗瘤效應(yīng)要強(qiáng)于游離藥物。流式細(xì)胞儀分析及激光共聚焦顯微鏡實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，MCF-7細(xì)胞對載藥納米粒子的攝取要大于對游離藥物的攝取。 體內(nèi)毒性研究結(jié)果表明，空白DCMC自聚集納米粒子沒有引起毒副作用，說明DCMC自聚集納米粒子作為藥物載體是安全的，載藥納米粒子的體內(nèi)毒性作用比游離藥物小，說明表阿霉素負(fù)載于DCMC自聚集納米粒子后可以降低其毒性