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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:制備生物材料修飾的金納米棒-DNA(GNRs-DNA)納米載體給藥系統(tǒng),負(fù)載一線抗癌藥物鹽酸阿霉素,協(xié)同金納米棒熱療與抗癌藥物化療的作用,體內(nèi)外評(píng)價(jià)這種納米載體治療腫瘤方面的作用。
方法:采用簡(jiǎn)便的種子生長(zhǎng)法制備均勻分散的金納米棒溶液,大腸桿菌轉(zhuǎn)化法提取并酶切得到M13mp18 RF I DNA材料;通過(guò)金-硫鍵將穩(wěn)定材料聚乙二醇(PEG)和靶向材料多肽(RLT)修飾于GNRs-DNA,構(gòu)建出PEG&RLT修飾的GNRs
2、-DNA納米載體給藥系統(tǒng);瓊脂糖凝膠電泳測(cè)定DNA條帶;激光納米粒度儀測(cè)定電位值;透射電鏡掃描載體的形態(tài);紫外分光光度法評(píng)價(jià)載體特征;超濾離心法測(cè)定RLT結(jié)合率和載體包封率;MTT法考察給藥系統(tǒng)對(duì)MCF-7和PC3的細(xì)胞抑制率;熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡進(jìn)行細(xì)胞攝取定性分析;流式細(xì)胞儀對(duì) PC3細(xì)胞進(jìn)行攝取定量、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞活性氧分析;采用活體成像儀考察載體在PC3腫瘤模型裸鼠的體內(nèi)分布情況。
結(jié)果:優(yōu)化制備工藝
3、制得長(zhǎng)徑比4,形態(tài)均一的金納米棒和濃度為2.57ug/ul的M13mp18 RF I DNA。成功構(gòu)建出GNRs-DNA-PEG、GNRs-DNA-PEG-RLT載體,并將 DOX負(fù)載于載體內(nèi),包封率分別為79.73%、67.98%,釋藥緩慢,血清中比較穩(wěn)定,未見載體材料聚集,說(shuō)明可供注射使用。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示納米載體無(wú)細(xì)胞毒性,且能被腫瘤細(xì)胞攝取進(jìn)入細(xì)胞。DOX/GNRs-DNA-PEG、DOX/GNRs-DNA-PEG-RLT、各協(xié)
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