宮頸癌細(xì)胞GM-CSF免疫學(xué)作用相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(hGM-CSF)是一種刺激造血干細(xì)胞增殖和分化的細(xì)胞因子，可誘導(dǎo)粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞前體細(xì)胞集落生長，主要由巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞分泌，某些腫瘤細(xì)胞也可分泌產(chǎn)生，但不同類型腫瘤中腫瘤源性GM-CSF的免疫學(xué)作用及其調(diào)控機(jī)制仍不清楚。本實(shí)驗(yàn)通過研究宮頸癌細(xì)胞GM-CSF的表達(dá)對環(huán)氧合酶-2(COX-2)和誘導(dǎo)性一氧化氮合酶(iNOS)表達(dá)的影響，探討GM-CSF在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的作用。
　

2、　方法：
　　收集臨床宮頸癌標(biāo)本52例及正常宮頸15例和宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)組織標(biāo)本21例作為對照進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，分析宮頸癌組織GM-CSF的表達(dá)與COX-2和iNOS表達(dá)的相關(guān)性;為了從細(xì)胞水平進(jìn)一步論證其相關(guān)性，本實(shí)驗(yàn)使用宮頸癌細(xì)胞系Caski細(xì)胞系，Caski細(xì)胞經(jīng)GM-CSF轉(zhuǎn)染后過表達(dá)GM-CSF，并通過RT-qPCR和Western blot檢測COX-2和iNOSmRNA及蛋白的表達(dá)情況，以空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的Ca

3、ski細(xì)胞為對照，在細(xì)胞模型中探討GM-CSF強(qiáng)制表達(dá)對COX-2和iNOS表達(dá)的影響。同時(shí)，通過GM-CSFsiRNA干擾Caski細(xì)胞GM-CSF表達(dá)后，用RT-qPCR及Western blot方法檢測iNOS/COX-2mRNA及蛋白表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　免疫組化結(jié)果顯示，宮頸癌組織GM-CSF表達(dá)明顯低于正常組和CIN組（P均＜0.05），而COX-2及iNOS的表達(dá)顯著高于正常組(P＜0.01)，但與CIN

4、組無明顯差異;統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)GM-CSF與COX-2/iNOS的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=-0.542/-0.499）。細(xì)胞水平結(jié)果顯示，與空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞相比，轉(zhuǎn)染GM-CSF的Caski細(xì)胞COX-2/iNOS在mRNA及蛋白表達(dá)水平都有顯著下降（P均＜0.05）;GM-CSF在被干擾后，干擾組與對照組相比COX-2/iNOS在mRNA及蛋白表達(dá)水平有明顯差異（P均＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　在組織和細(xì)胞表達(dá)水平GM-CSF