增齡與國人角膜上皮干細(xì)胞增殖分化能力的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：通過檢測不同年齡組國人角膜緣基底細(xì)胞及透明角膜上皮細(xì)胞HTERT的表達(dá)，以證實HTERT作為角膜上皮干細(xì)胞標(biāo)志物的可能性，并且通過定量檢測不同年齡組國人角膜上皮干細(xì)胞HTERT的表達(dá)探討干細(xì)胞增殖分化能力與年齡的相關(guān)性，了解角膜上皮干細(xì)胞的生理特性，從分子生物學(xué)水平揭示眼表的生理特性及眼表疾病的成因，為臨床診療及角膜上皮干細(xì)胞移植供體的選擇提供理論依據(jù)。 方法：采集不同年齡組正常國人角膜緣基底細(xì)胞及透明角膜上皮細(xì)胞，除外腫

2、瘤、翳狀胬肉及干眼癥等角膜上皮干細(xì)胞異常供體。無菌狀態(tài)下破碎細(xì)胞，抽提RNA，以RNA為模板，加入HTERT特異引物經(jīng)RT-RCR反轉(zhuǎn)錄成CDNA后進(jìn)行產(chǎn)物擴(kuò)增，然后取樣行瓊脂糖凝膠電泳，紫外可見分析儀定性分析各標(biāo)本HTERT含量。對陽性標(biāo)本進(jìn)一步進(jìn)行HTERT含量實時定量測算，然后應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計軟件對所獲數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。 結(jié)果：定性檢測結(jié)果角膜緣基底細(xì)胞HTERT表達(dá)陽性，透明角膜上皮細(xì)胞HTERT表達(dá)陰性；定量檢

3、測10-80歲各年齡組國人角膜緣基底細(xì)胞HTERT相對含量平均值分別為2.592、3.165、3.433、3.685、3.392、3.563、3.315、3.380。SPSS11.5統(tǒng)計軟件分析各組數(shù)據(jù)間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.96)。 結(jié)論：角膜緣基底細(xì)胞HTERT表達(dá)陽性，透明角膜上皮細(xì)胞HTERT表達(dá)陰性，HTERT可作為角膜上皮干細(xì)胞標(biāo)志物之一；不同年齡組國人角膜上皮干細(xì)胞HTERT表達(dá)水平不隨年齡而變化，其增殖分化能